关注中国布鲁杆菌病疫情发展和疫苗研究

布鲁杆菌病(布病)是《中华人民共和国传染病防治法》中规定管理的乙类人畜共患传染病.近年来我国布病疫情形势严峻,尤其是2000年以后,人间布病成为报告发病数上升速度最快的传染病.为此,全面、深入地开展人畜间布病疫情的防控工作,研究出高质量的布病疫苗对易感人群和家畜开展预防性接种,是当前我国布病防治的主要任务.     

优化单纯疱疹病毒DNA疫苗的研究进展

单纯疱疹病毒(HSV)是生殖器疱疹(GH)的主要病原体,主要通过性接触传播。HSV感染机体后可长期潜伏在骶神经节中,逃避宿主免疫系统的识别,因而无法彻底清除。在一定条件如应激、疲劳、免疫力低下等情况下,潜伏病毒被激活而发     

148例麻疹临床分析

目的 分析2005—2011年本院收治的148例麻疹流行病学和临床特点,为进一步预防和控制麻疹提供依据。方法 回顾性调查148例麻疹病例的流行病学和临床特点。结果 本地区春季发病率高,3—6月达114例(77.0%);8月龄以下婴幼儿发病数增加,成人麻疹发病率逐年上升,21~40岁80例(54.0%)。结论 建议加强对高危人群中的成年人强化免疫,加强对外来流动人口麻疹疫苗接种的监测。     

GM-CSF基因增强HCV核心蛋白基因DNA疫苗的免疫应答

目的:研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)编码基因对丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)核心(core,C)蛋白编码基因重组质粒诱导的免疫应答有无增强作用.方法:人工合成HCV核心蛋白基因至克隆载体pUC 119上,酶切后与真核表达质粒pCMH6K连接,测序正确后将重组质粒pCMH6K/HCV-C转染中华仓鼠卵巢(China hamster ovary,CHO)细胞.免疫荧光检测转染的CHO细胞中HCVC蛋白分布与表达.将已构建成功的GM-CSF编码基因重组子(pGM-CSF)联合pCMH6K/HCV-C肌注免疫Balb/c鼠,ELISA法检测免疫小鼠血清抗HCV C特异性抗体水平,经流式细胞仪检测不同免疫原免疫鼠后脾T淋巴细胞亚群及Th细胞内细胞因子[干扰素-(interferon-,IFN-)、白介素-4(interleukin-4,IL-4)]变化,LDH法测定CTL活性.结果:pCMH6K/HCV-C经鉴定构建正确.所编码的蛋白主要分布于胞膜,少量分布于胞浆.pGM-CSF+pCMH6K/HCV-C联合免疫组和pCMH6K/HCV-C单独免疫组均产生抗HCVC特异性抗体,两组间比较差异无统计学意义;联合免疫组CD4+T淋巴细胞比例为44.90%±5.99%,明显高于其他组(P<0.05).不同免疫组CD8+T细胞比例变化不大,与空载体pcDNA3.1(+)组比较,差异无统计学意义(P>0.05).联合免疫组CTL活性为56.48%±4.68%,明显高于其他组(P<0.05).联合免疫组IFN-/IL-4比值为18.20±2.36,明显高于其他组(P<0.05).结论:GM-CSF编码基因可增强HCV C基因DNA疫苗的细胞免疫应答,并能够诱导Th1型免疫应答.     

湖北地区季节性H1N1流感病毒NA和M基因特性分析

目的分析湖北省2000年以来甲型流感病毒株神经氨酸酶(NA)和M基因特性,以及耐药性位点的变异情况。方法从2000～2008年临床样品中分离毒株,运用RT-PCR扩增NA和M基因,对扩增片段进行序列测定,利用DNAStar软件与世界卫生组织推荐的流感疫苗毒株进行同源性比较,对NA和M基因重要功能性位点和耐药性位点进行分析,利用Mega软件进化分析。结果2000～2008年临床样品流感病毒分离株的NA和M基因与同年疫苗株相应基因的同源性分别为96.6%～99.7%和96.6%～99.6%,分离株NA基因中潜在的抗原性位点和糖基化位点与2000～2008年疫苗株基本相同,与2009年疫苗株有一定差异。NA基因未发生耐药性突变,但M基因在2005年以后的分离株中发生了S→N突变。NA和M基因进化分析表明不同年份分离株呈现出不同的亲缘关系。结论湖北省季节性甲型H1N1流感病毒分离株与2000～2008年世界卫生组织推荐的疫苗毒株有高度同源性,但与2009年疫苗株有所不同,未出现达菲类药物抗药性位点的核苷酸突变,但2005年后的分离株在M基因上均发生金刚烷胺类耐药性突变。NA和M基因进化树中可以看到甲型H1N1流感病毒进化关系在时间(年)上具有聚集性。     

狂犬病病毒弱毒疫苗株反向遗传操作系统的建立

目的构建狂犬病病毒弱毒疫苗株SRV9全长cDNA感染性克隆,并建立其反向遗传操作系统。方法通过DNAStar对狂犬病病毒SRV9株全长基因组序列进行分析,利用单一的酶切位点,将SRV9全长cDNA分为4段,根据每段重叠区域的酶切位点拼接全长,分别连入pCI和pCDNA3.1(+)载体,并通过PCR方法分别在全长序列的3′端和5′端引入核酶HamRZ和HdvRZ序列,构建全长真核表达质粒pCI-SRV9和pD-SRV9。同时构建能表达狂犬病病毒核蛋白(N)、磷蛋白(P)、糖蛋白(G)和聚合酶蛋白(L)的4个辅助质粒。分别将pCI-SRV9或pD-SRV9与辅助质粒通过脂质体共转染BSR细胞,拯救重组病毒。结果两种质粒表达系统均可拯救到有感染活性的病毒粒子,但pD-SRV9表达质粒的拯救效率(8/8)较pCI-SRV9表达质粒拯救效率3/30高;重组病毒与母本野生病毒的体外生长动力学曲线相一致,相同培养时间的病毒滴度差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功构建了狂犬病病毒弱毒疫苗株的反向遗传操作系统,为进一步研究狂犬病病毒致病机理、筛选新型狂犬病疫苗或开发基于狂犬病病毒载体的其他疾病疫苗奠定了基础。     

不同部位皮内注射DC疫苗对恶性肿瘤化疗患者免疫功能的影响

目的比较树突状细胞(DC)疫苗在腹股沟和腋窝淋巴结富集区皮内注射对恶性肿瘤化疗患者免疫功能的影响。方法对接受DC疫苗治疗的恶性肿瘤患者30例,按入院治疗先后分成腹股沟组和腋窝组各15例,分别在腹股沟淋巴结富集区和腋窝淋巴结富集区皮内注射DC疫苗。均采用流式细胞术检测DC治疗前后外周血淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞及CD4+/CD8+比值,比较两组患者的免疫功能、注射后的不良反应及疼痛程度。结果注射后两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);注射时腹股沟组疼痛程度显著轻于腋窝组(P<0.01)。两组DC治疗后外周血CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞及CD4+/CD8+高于注射前(均P<0.01)。结论DC疫苗两种部位皮内注射均能提高恶性肿瘤患者的免疫功能,但腹股沟淋巴结注射可减轻患者的疼痛程度。     

乙型肝炎疫苗成人免疫策略的研究进展

乙型肝炎是影响人类健康的重要公共卫生问题,根据世界卫生组织(WHO)统计,全世界大约有20亿人感染或曾经感染过HBV,主要来自亚洲、非洲及拉丁美洲等发展中国家,其中约3.5亿为HBV慢性感染者,每年死于乙型肝炎的患者约有100万人[1].我国乙型肝炎流行率较高,据调查显示[2],我国每年因治疗HBV感染所花费的金额高达6000亿元,这给国家和人民带来沉重的负担,而注射乙型肝炎疫苗是预防乙型肝炎最实用也是最有效的方法.2002年我国开始实施新生儿免费接种乙型肝炎疫苗,经过数十年的不懈努力,我国适龄儿童乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者减少了约2000万[3],这也说明了儿童乙型肝炎疫苗接种的必要性和重要性,但考虑到我国具体国情,普遍让成人接种乙型肝炎疫苗还不能实现.因此,研究乙型肝炎疫苗成人的免疫策略,提高免疫接种成功率,是今后乙型肝炎预防工作的热点.本文就近年来乙型肝炎疫苗成人免疫策略的研究进展作一综述,希望能为成人乙型肝炎预防研究提供参考.     

西咪替丁联合阿昔洛韦治疗小儿水痘的临床分析

目的 探讨西咪替丁联合阿昔洛韦治疗小儿水痘的临床疗效。方法 选取80例水痘患儿,随机数字表法分为两组,对照组患儿（40例）静脉滴注阿昔洛韦注射液15 mg/（kg·d）,观察组患儿（40例）静脉滴注西咪替丁注射液和阿昔洛韦注射液各15 mg/（kg·d）,两组均治疗7 d。观察并记录两组患儿临床疗效,治疗后患儿退热时间、皮疹结痂时间、瘙痒消失时间,治疗前后HAMA评分及治疗期间不良反应情况,评价西咪替丁联合阿昔洛韦治疗小儿水痘的临床疗效。结果 观察组治疗有效率87.5%,对照组治疗有效率65.0%,观察组治疗有效率高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后观察组患儿退热时间、皮疹结痂时间、瘙痒消失时间均短于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗前,两组患儿HAMA评分相比,无统计学差异;治疗后,两组患儿HAMA评分均明显降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义（P<0.05）;且观察组明显低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗期间,两组不良反应率无明显差异。结论 西咪替丁联合阿昔洛韦治疗小儿水痘效果良好,能较快改善水痘临床症状,减轻小儿焦虑情绪,治疗方案安全性高,值得临床推广使用。     

自动化系统在水痘疫苗半成品配制中的应用

目的 应用自动化系统进行水痘疫苗的半成品配制,以降低劳动强度,提高产品均一性.方法 采用自动化系统完成水痘疫苗的原液稀释和半成品分装,并与人工操作方法进行比较,比较两种方法的清洁、灭菌和保温效果以及疫苗半成品、成品的检定结果.结果 自动化操作可使工作人员减少60％,工时缩短80％.两种方法对容器或罐体的清洗和灭菌效果均达到工艺要求.采用自动化方法保温时温度可控.用自动化操作系统制备的半成品疫苗,其滴度差异小于人工操作方法,变异系数分别为0.00％和2.17％.两种方法生产的成品疫苗的稳定性试验结果均达到标准[病毒滴度不低于3.3 lg蚀斑形成单位(plaque-forming unit,PFU)/0.5 ml].自动化和人工方法生产的成品疫苗于37℃放置7d,病毒滴度分别为3.7和3.6 lgPFU/0.5 ml;于2～8℃放置18个月分别为3.5和3.4 lgPFU/0.5 ml.结论 将自动化系统应用于水痘疫苗的原液稀释、半成品分装,可降低劳动强度,提高产品的均一性.