S36-29 醇的甲苯磺酰化

脂肪醇或脂环醇在二氯化钴六水合物催化下和等当量对甲苯磺酸在1，2-二氯乙烷中回流反应，可得到高产率相应的磺酸酯，9例收率78％～95％。当同时存在仲醇和伯醇，可选择性对前者进行磺酰化。     

氯化钴后处理对新生鼠缺氧缺血性脑损伤学习记忆的作用

目的探讨氯化钴(cobalt chloride,CoCl2)后处理对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠空间学习记忆的作用。方法生后7日龄SD大鼠66只,分为假手术组(n=16)、缺氧缺血组(HI组,n=18)、CoCl2即刻干预组(C1组,n=14)、CoCl2术后1 d干预组(C2组,n=18)。Western blot检测术后1、2、7 d脑组织HIF-1α蛋白的表达。大鼠生后7周行水迷宫观察CoCl2对大鼠空间学习记忆的影响。结果 HI组和C1组HIF-1α蛋白在术后第1、2天增多,第7天则不能检测到HIF-1α蛋白。而C2组第7天仍能检测到HIF-1α蛋白表达。水迷宫实验显示C2组较HI组3～5 d时平均潜伏时间明显缩短,穿越原平台区域的时间增加,空间学习记忆能力部分恢复(P<0.05)。结论在新生鼠缺氧缺血性脑损伤时,CoCl2促进HIF-1α蛋白的持续表达,术后1 d干预可有效恢复大鼠的空间学习记忆能力。     

氯化钴诱导HIF-1α增高拮抗过氧化氢引起的人骨肉瘤MG-63细胞凋亡

[目的]验证氯化钴抑制过氧化氢诱导的人骨肉瘤MG-63细胞的凋亡作用并探讨其可能的分子机制.[方法]将人骨肉瘤MG-63细胞分为正常对照组、过氧化氢组、过氧化氢+氯化钴预处理组、过氧化氢+氯化钴+YC-1组.应用MTT法测定细胞存活率;流式细胞术测定细胞凋亡;免疫荧光染色、蛋白印迹法检测HIF-1α表达.[结果]与过氧化氢组比较,氯化钴预处理组细胞存活率明显增加(P<0.05);凋亡细胞比率降低.缺氧可激活HIF-1α的表达并诱导其转位,100μmol/L氯化钴可明显增加HIF-1α蛋白的表达(P<0.01).[结论]氯化钴可抑制过氧化氢诱导的人骨肉瘤MG-63细胞的凋亡,其分子机制可能与激活HIF-1α的表达有关.     

氯化钴预处理对缺氧预适应小鼠缺氧耐受的影响

目的观察氯化钴对缺氧预适应小鼠缺氧耐受的影响。方法用氯化钴(CoCl2)处理小鼠,观察小鼠在重复缺氧中缺氧耐受时间的变化及其离体海马脑片缺氧时群峰电位(PS)消失时间的变化。结果CoCl2预处理小鼠的缺氧耐受时间不随缺氧次数的增加而增加,缺氧耐受性显著增高,CoCl2预处理小鼠离体海马脑片缺氧时群峰电位消失的时间比对照组明显延长,但明显低于预适应组。结论小鼠CoCl2预处理激活缺氧诱导因子-1(HIF-1),可对脑产生保护作用,但其机制可能不同于由急性重复缺氧获得的缺氧耐受机制。     

The protection of dexmedetomidine against chemical hypoxia-induced neurons injury and its mechanism

目的 探讨α2肾上腺素能受体激动剂右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)是否通过抑制p38MAPK通路保护PC12细胞对抗化学性低氧引起的损伤.方法 应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞以建立化学性低氧损伤神经细胞模型.采用Western blot法测定p38MAPK蛋白的表达水平,CCK-8比色法检测细胞存活率,Hoechst 33258核染色法观察细胞凋亡的形态学及数量改变,罗丹明123染色荧光显微镜照相测定线粒体膜电位(MMP).结果 在60～180 min 的时间范围内,600 μmol/L CoCl2处理PC12细胞后明显地促进磷酸化p38MAPK表达;在120 min,p38MAPK表达量达到高峰;400 μmol/L Dex不仅能保护PC12细胞对抗CoCl2引起的细胞毒性、致凋亡作用及MMP损伤作用,还能抑制CoCl2对p38MAPK表达的上调作用;p38MAPK抑制剂SB203580能模拟Dex的抗化学性低氧损伤的神经保护作用,使细胞存活率升高,凋亡细胞数量减少及MMP升高.结论 Dex能保护神经细胞对抗化学性缺氧引起的损伤,抑制p38MAPK通路可能是其作用机制之一.     

二氯化钴所致缺氧对A549细胞增殖抑制和凋亡的影响

目的:探讨CoCl2作用不同时间所致缺氧对体外培养的人肺腺癌A549细胞株增殖、凋亡和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法:对肺腺癌细胞A549分别进行常氧和氯化钴模拟缺氧培养,采用MTT法检测CoCl2作用不同时间所致缺氧对A549细胞增殖的影响;半定量RT-PCR法测定缺氧不同时间HIF-1αmRNA表达水平的变化。AnnexinV-FITC/PI双标记染色,流式细胞术检测CoCl2作用不同时间缺氧肿瘤细胞凋亡情况。结果:CoCl2对A549细胞增殖抑制作用表现出时间依赖性抑制作用。常氧条件下的A549细胞即有一定水平的HIF-1αmRNA的表达,随着CoCl2作用时间的延长,HIF-1αmRNA水平呈升高趋势,与正常对照组比较,各缺氧组差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,正常对照组、CoCl2作用4、12、24、48 h组细胞凋亡率分别为(0.60±0.10)%、(1.10±0.10)%、(8.63±0.75)%、(12.80±0.85)%和(19.33±0.80)%。结论:CoCl2对A549细胞具有上调HIF-1αmRNA表达作用,可抑制细胞的增殖和一定的凋亡诱导作用,这些说明HIF-1α可能在肺癌的发展中扮演着重要的作用。     

氯化钴诱导化学缺氧对N9小胶质细胞的损伤作用及机制

目的研究氯化钴(CoCl2)对N9小胶质细胞的损伤作用及机制。方法不同剂量CoCl2处理N9小胶质细胞后,XTT法检测细胞活力;倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;硫代巴比妥酸(TBA)显色法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)含量;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期变化。结果 CoCl2(50～1 000μmol.L-1)处理24 h后,细胞活力明显降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。细胞形态发生明显改变,部分细胞出现皱缩、破碎,细胞密度减小,随CoCl2剂量增大,细胞形态损伤程度进一步恶化。MDA含量检测结果显示,氯化钴处理后,细胞上清液中MDA含量明显增多(P<0.05)。Hoechst 33258染色结果显示,氯化钴处理组的细胞凋亡比例较对照组明显增多(P<0.01),且比例随CoCl2剂量增大而增多。细胞周期检测结果显示,CoCl2可使细胞周期阻滞于G1/G0期。结论 CoCl2可呈剂量依赖性损伤N9小胶质细胞,机制与诱导细胞凋亡、引发氧化应激反应及细胞周期阻滞有关。     

热休克蛋白90在氯化钴对抗血清-葡萄糖剥夺引起的心肌细胞损伤中的作用

目的观察氯化钴(CoCl2)对血清-葡萄糖剥夺(SGD)诱导的H9c2心肌细胞损伤的影响,探讨热休克蛋白90(HSP90)在其中的作用。方法用SGD的方法处理H9c2心肌细胞,建立缺血性损伤的心肌细胞模型。在SGD过程中同时给予CoCl2处理;在应用SGD和CoCl2之前给予HSP90抑制剂(17-AAG)预处理。处理结束后,检测细胞存活率、HSP90的表达、细胞内活性氧(ROS)以及线粒体膜电位(ΔΨm)。结果 SGD处理可引起H9c2心肌细胞损伤,表现为细胞存活率降低、胞内ROS水平升高及ΔΨm丢失。SGD处理还可降低H9c2心肌细胞内HSP90的表达。在50～100μmol.L-1浓度范围内,CoCl2处理可保护H9c2心肌细胞对抗SGD引起的存活率降低,100μmol.L-1CoCl2还可对抗SGD引起的ROS水平升高和ΔΨm丢失。100μmol.L-1CoCl2可时间依赖性地促进胞内HSP90的表达。在50～200μmol.L-1浓度范围内,CoCl2处理可对抗SGD诱导的HSP90表达下调,其中100μmol.L-1的CoCl2具有最强的拮抗作用。17-AAG通过抑制HSP90的作用可明显减弱CoCl2诱导的上述心肌细胞保护作用。结论 CoCl2可保护H9c2心肌细胞对抗SGD引起的损伤,其机制之一与上调HSP90表达有关。     

骨髓间充质干细胞对溃疡性结肠炎模型小鼠的研究

目的 研究氯化钴(CoCl₂)模拟低氧处理的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠的治疗作用。方法 通过在饮水中添加葡聚糖硫酸钠(DSS)构建UC模型小鼠。将模型小鼠分为模型组、对照组和实验组,每组3只;另取3只正常小鼠作为空白组。空白组给予饮用蒸馏水处置;模型组给予尾静脉注射磷酸盐缓冲溶液0.2 mL;对照组给予尾静脉注射BMSCs细胞0.2 mL(1×10⁶个);实验组给予尾静脉注射50μmol·L^-1 CoCl₂处理48 h的BMSCs细胞0.2 mL(1×10⁶个)。4组小鼠每天给药1次,连续给药7 d。用酶联免疫吸附实验法检测结肠组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,用实时荧光定量聚合酶链反应检测小鼠脾中叉头框蛋白3(FOXP3)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10) mRNA的表达水平。结果 实验组、对照组、模型组和空白组小鼠结肠组织中SOD含量分别为(9.56±0.23),(8.7...     

上调HIF-1对老龄大鼠心肌线粒体功能的影响

目的 评价老龄大鼠心肌发生缺血再灌注(I/R)损伤时,应用氯化钴(CoCl2)上调缺氧诱导因子(HIF-1)对心肌线粒体呼吸功能的影响.方法 雄性SD大鼠60只(其中健康大鼠24只、健康老龄大鼠36只).健康SD大鼠24只(体重350～400 g)随机分为两组,每组12只:正常对照组(N组)为直接灌注180 min;正...