人类胚胎生殖细胞体外分化为心肌细胞的研究

胚胎生殖（EG）细胞是来源于胚胎原始生殖细胞（PGCs）的多潜能干细胞。采用无饲养层细胞、无细胞因子等的基础培养液（DMEM＋20％NBS＋0．1mM 2Me）培养EG细胞，部分在基础培养液添加10μmol／LRA＋0．75％DMSO或10μmol／L 5-氮胞苷（5-AZA）诱导人类EG细胞向心肌细胞分化，以检测其是否具有向心肌细胞自发分化的能力。9例（8．49％，9／106）胎儿EG细胞在体外分化得到20个节律性心脏跳动样细胞团，其搏动节律为20～120次／min，体外维持节律性搏动最短2d，最长至15d，呈PAS，Myoglobin，α-actin阳性；对K^＋、Ca^＋、肾上腺素等具有与在体心脏相似的反应性；透射电镜观察具有心肌细胞样结构。添加DMSO和RA或5-AZA诱导未得到跳动样心肌细胞，但可提高心肌α-actin免疫组织化学染色阳性率；表明人类胚胎生殖细胞具有向心肌细胞分化的潜能。     

胚胎干细胞自我更新的分子机制

调节胚胎干细胞 (ES)细胞自我更新是一个复杂的分子信号系统 ,当这个信号系统处于总体平衡时 ,ES细胞的自我更新才能得以维持。只有明确了这些信号通路的功能才能实现对ES细胞的应用 ,并发展以干细胞为基础的下游技术。本文从重要的细胞因子LIF、Oct4、Nanog及细胞周期的影响等方面综述了ES细胞自我更新分子机制的研究进展。     

慢病毒介导的外源基因体外投递系统的建立

目的针对不同哺乳类细胞建立相应的慢病毒体外感染体系，以建立慢病毒介导的外源基因体外投递系统。方法按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒（携带EGFP基因）包装（脂质体介导的瞬时转染）、超速离心浓缩和保存等，随后用病毒上清或浓缩后的病毒感染293FT细胞，24—48h后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功生产；将携带EGFP基因的病毒上清或浓缩后的病毒分别加入内含293FF细胞、小鼠ES细胞、小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）或小鼠睾丸生殖细胞的培养板孔内，感染6—12h后，用相应培养基替换感染液，数天后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功感染不同哺乳类细胞。结果按标准程序生产的携带EGFP基因慢病毒（病毒上清或浓缩后的病毒）成功高效率感染293FF细胞、MEFs或小鼠睾丸生殖细胞；用浓缩后的病毒（携带EGFP基因）感染小鼠ES细胞，亦可获得EGFP阳性的ES细胞克隆。结论熟练掌握了慢病毒包装、浓缩及鉴定等技术，同时针对不同哺乳类细胞建立了相应的慢病毒介导的外源基因体外传递系统，这些为相关后续研究打下了良好的基础。     

血红蛋白单克隆抗体的制备及其特性研究

本文报告应用淋巴细胞杂交瘤技术制备了抗人血红蛋白单克隆抗体(Hb-McAb)。经实验证明，Hb—McAb局有特异性强，效价高、使用简便，安全等优点，可作为大肠癌早期诊断的初筛指标。     

糖尿病及糖尿病肾病患者血浆尾加压素Ⅱ的变化

目的研究2型糖尿病及糖尿病肾病患者血浆尾加压素Ⅱ（UⅡ）的变化，探讨UⅡ在糖尿病及糖尿病肾病中的作用及其临床意义。方法2型糖尿病患者按尿白蛋白排泄率（UAER）分为三组：Ⅰ组：UAER〈20μg/min，Ⅱ组：UAER：20μg/min～200μg/min，Ⅲ组：UAER〉200μg/min。采用放射免疫分析法检测52例2型糖尿病及20例对照者血浆UⅡ含量。结果2型糖尿病各组患者血浆UⅡ水平均明显高于健康人血浆UⅡ水平（P〈0．01），并且Ⅲ组患者血浆UⅡ水平均高于Ⅰ组及Ⅱ组患者血浆UⅡ水平（P〈0．01），而且Ⅱ组患者血浆UⅡ水平高于Ⅰ组患者血浆UⅡ水平（P〈0．05）。血浆UⅡ水平与空腹血糖（FBS）、糖化血红蛋白（HbA1c）均无相关。结论UⅡ水平与糖尿病肾病的发生和发展可能有关。联合测定糖尿病患者血UⅡ及UAER水平，不仅可作为诊断糖尿病肾病早期损害较灵敏的预警指标，还将有助于监测、判断糖尿病肾病的病程进展。     

人胚胎下丘脑与腺垂体SP、SRIF、L-ENK和M-ENK阳性细胞的发育与分布的研究

本文用免疫组化方法观察了P物质(SP)、生长抑素(SRIF)、亮啡肽(L—ENK)、甲啡肽(M—ENK)在16～40周胎儿下丘脑及腺垂体内的发育与分布。结果表明在16周胎儿下丘脑已出现SP、SRIF、L—ENK、M—ENK阳性神经元。第三脑室室管膜上皮亦呈阳性染色。下丘脑的变化以16～24周最为明显,阳性细胞主要分布于室周核、室旁核、视上核及腹内侧核。腺垂体在16周只有少量L—ENK和M—ENK阳性细胞,而SP与SRIF阳性细胞则在第17周出现,17～24周变化最为明显。本文对这几种神经肽在发育中的变化及功能进行了讨论。     

蛋白激酶C在卵母细胞成熟、受精和早期胚胎发育过程中的作用

小鼠胚胎发育过程中,蛋白激酶C(PKC)家族在调节卵的活化、完成减数分裂和开始有丝分裂、胚胎的致密,以及囊胚形成过程中都有作用,但其多个亚型的功能还知之甚少.研究表明,已知的十种PKC亚型以及PKC锚定蛋白--活化的磷脂酶C受体(RACK)在小鼠胚胎2-细胞期至囊胚期都有表达.本文归纳了近年来对PKC亚型各自不同的动态分布模式和表达水平的研究,这些研究表明它们在早期胚胎发育的各个时期都至关重要,尤其在胚胎4-细胞期的早期,个别亚型在核内的浓度是瞬间升高的,提示我们这些PKC亚型也许控制着早期小鼠胚胎核的组建以及机能调节.本文对核移植胚胎中PKC的可能作用也进行了分析.     

脑瘫婴儿的早期临床特征及综合治疗预后分析

目的为探讨脑瘫在婴儿期的临床特征、早期发现、早期干预，以减少其后遗症的发生。方法将2005．06～2007．06在我院新生儿科住院的新生儿，NBNA评定总分≤35分者，分为干预组及对照组，干预组进行早期干预，观察两组高危因素、0—3个月出现早期症状、体征及后遗症方面有无明显差异，并随机收集无高危因素组为健康组，观察三组运动发育、姿势反射建立时间的差别。结果高危因素发生情况、0-3个月出现早期症状、体征方面，干预组与对照组无显著性差异，后遗症方面干预组1岁时无一例发生脑瘫，对照组1岁时有3例诊断为脑瘫，癫痫1例，脑积水1例，白内障1例，双侧神经性耳聋1例。结论早期干预，可降低脑瘫发生率，减轻脑瘫程度。对高危儿进行早期干预开始时间越早越好。     

毫米波辐射对植入前小鼠胚胎及早期胚胎的影响

本文报道小鼠受精卵体外及在体受毫米波辐照后一些改变。毫米波源为36.11GHz固态微波连续发生器,波长8mm,功率密度为10mW/cm~2、8mW/cm~2、4mW/cm~2及2mW/cm~2。结果发现2-4mW/cm~2毫米波辐照即可使体外培养之受精卵细胞表面微绒毛减少、脱落,细胞表面形成许多囊泡。透射电镜下可见细胞间隙扩大、胞浆中线粒体膨胀、空化,用FITC-ConA试验可见细胞表面结合荧光减少。酶试验证明辐照后卵胚细胞表面AKP,ATPase,5′-Nase均有降低。在体受精卵细胞经辐射后证明,辐射可使胎儿体重增长减慢,囊胚形成数量下降,植入率降低,而表面酶下降不明显。     

鸡胚制作及其在人体胚胎学教学中的应用

胚胎的发育是一个连续的过程,胚胎的早期发育,是胚胎学研究和学习的重点,在教学中除应用胚胎模型及教学电影、幻灯片等配合外,我们要有形象直观性的实物标本来帮助学生认识、理解胚胎的发生、发育及演变的过程,让学生通过学习胚胎学之后,能以发展的、变化的眼光真正完整地了解人体结构。但是,人的胚胎标本特别是早期阶段的胚胎标本极难获得,为了让学生了解、理解、掌握这门学科,我们特制作16h、19h、24h、36h、48h等不同发育时期的鸡胚,用以观察胚胎的发生发育及变化情况。1材料与方法1·1材料新鲜鸡种蛋、苦昧酸、甲醛、冰醋酸、硫酸铝钾、…