不同参数滚压模式对兔BMSCs向软骨细胞分化促进作用的研究

目的观察在不同滚压参数下,滚压载荷生物反应器对BMSCs-琼脂糖复合体中兔BMSCs向软骨细胞诱导分化的作用。方法分离2.5月龄新西兰兔BMSCs,培养至第3代后与低熔点琼脂糖复合成凝胶块,并在自制模具中形成直径4 mm、高4 mm的圆柱形BMSCs-琼脂糖复合体。将样本分别在0.4 Hz、3 h/d基本参数下比较压缩量10%、20%、30%(分别为A1、A2、A3组),以及0.4 Hz、20%压缩量基本参数下比较20 min、3 h、12 h滚压时间(分别为B1、B2、B3组)对BMSCs向软骨细胞分化的作用,以静态培养作为对照组。在培养24 h及7、14、21 d时取各组标本进行死活细胞检测、实时定量PCR检测、糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量检测及组织学染色观察。结果死活细胞检测:14、21 d时,A1、A2组活细胞比率均显著高于A3组,B1、B2组活细胞比率均显著高于B3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实时定量PCR检测:各实验组7、14、21 dⅡ型胶原及蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA表达均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);14、21 d时,A1、A2组Ⅱ型胶原、Aggrecan mRNA表达均高于A3组,B1、B2组均高于B3组,差异有统计学意义(P<0.05)。以上指标A1、A2组间及B1、B2组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。GAG含量检测:14、21 d时,A1、A2组GAG含量均显著高于对照组和A3组,B1、B2组GAG含量也显著高于对照组和B3组,差异均有统计学意义(P<0.05);21 d时A1、A2组间差异均有统计学意义(t=2.830,P=0.027)。组织学观察:21 d时,A2组和B2组出现明显蓝染,可见软骨陷窝样结构;而A1、A3组和B1、B3组蓝染效果较差,分布稀少。结论滚压载荷生物反应器在0.4 Hz、20%压缩量、3 h滚压时间参数下,能更有效地促进BMSCs-琼脂糖复合体中兔BMSCs向软骨细胞诱导分化。     

兔Vx-2移植性肝癌模型的建立及其影像学表现

目的　用 3种不同植瘤方式建立稳定的兔Vx 2移植性肝癌模型 ,分析移植性肝肿瘤的DSA影像特征。方法　 6 0只新西兰白兔随机分成 3组 ,每组 2 0只。第 1组 ,将Vx 2瘤细胞 (约 5× 10 7个 )经肝动脉灌注入兔的肝脏 ;第 2组 ,将Vx 2瘤细胞 (约 5× 10 7个 )经剖腹途径接种于兔的肝左叶 ;第3组 ,将瘤组织块 (约含 10 6～ 10 8个瘤细胞 )经剖腹途径植入兔肝左叶。之后 ,对 3组兔比较观察 :1.不同方式植瘤的成活率 ;2 .肝内肿瘤体积变化和肿瘤生长率 ;3.大体及镜下 (光镜和电镜 )瘤组织形态特征 ;4 .成熟模型的DSA表现。结果　 1.3组植瘤成活率分别为 7/ 2 0、10 / 2 0、19/ 2 0 ,第 3组植瘤成活率最高 (P <0 .0 5 ) ,其瘤体呈指数性生长 ;2 .病理学及CT表明该瘤在肝组织中呈浸润式生长 ,其性状与移植于兔其它部位的Vx 2鳞状细胞癌特征相似 ;3.DSA影像示移植性肝肿瘤具有丰富的血供。结论　成功建立了兔Vx 2移植性肝癌模型 ,瘤组织块种植方式成功率明显高于其他两种方法 ,为肝癌介入治疗的实验研究提供了可靠的大型动物模型     

模拟失重对新西兰兔股静脉压力-容积关系的影响

目的观察模拟失重对兔股静脉压力 -容积关系的影响及静脉壁显微结构的变化。方法采用头低位 ( - 2 0°)倾斜的方法作为模拟失重家兔模型。 2 4只雄性健康新西兰兔 ,随机分为对照组、模拟失重 2 1d组和模拟失重 1 0d组 ,每组 8只。进行股静脉的压力 -容积 (P V)关系测试 ,并观察血管壁的显微结构。结果模拟失重后股静脉P V曲线向容积变化比增大的方向移动 ,模拟失重 2 1d组较 1 0d组移动更明显。分别于加、卸载测试时拟合出的模拟失重 2 1d组P V二次抛物线方程式系数B1 、B2 值均显著高于对照组及模拟失重 1 0d组 (P <0 .0 1 ) ,模拟失重 1 0d组的B1、B2值和对照组相比有增加的趋势。组织学观察表明 ,模拟失重组股静脉内皮细胞呈立方或矮柱状并有细胞脱落 ,平滑肌层变薄等变化。结论模拟失重后股静脉顺应性增加 ,2 1d组较 1 0d组增加明显 ,同时股静脉管壁结构也发生明显改变     

hBMP7基因转染对兔骨髓间充质干细胞增殖及胶原合成的影响

使用含hBMP7基因的重组逆转录病毒液感染兔骨髓间充质干细胞（BMSc）,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,^3H脯氨酸掺故法检测I型胶原合成和表达情况。结果显示,经hBMP7基因转染的BMSc与空载体转染及未转染的BMSc在细胞增殖、细胞周期表现方面无显著性差异,经转染的BMSc合成胶原显著高于空载体转染和未转染者。提示采用逆转录病毒介导转染BMSc后能促进细胞的胶原合成,对BMSc增殖和细胞周期无显著影响,有利于进一步 应用于构建组织工程化骨组织。     

131I胶囊和液体在家兔及人体代谢的对比研究

目的观察131I胶囊和液体在家兔和甲亢患者甲状腺吸131I率(TUR)的异同,建立测量131I胶囊TUR的方法.方法①家兔实验.6只家兔随机分为胶囊组和液体组(均予7.4 MBq 131I).行γ显像,计算TUR.②甲亢患者131I胶囊标准源测量.104例Graves甲亢患者,131I示踪和治疗剂量均采用胶囊给药,与均采用液体给药的118例患者进行治疗前后24 h TUR比较.结果①家兔甲状腺对131I胶囊和液体的2,4,6,24 h TUR均无差异.②131I胶囊标准源测量溶解计数较胶囊直接测量高(13.8±2.8)%,t=8.97,P<0.01.③甲亢患者胶囊组示踪剂量TUR为(71.4±10.9)%,治疗剂量TUR为(68.5±14.7)%(t=1.62,P>0.05.);液体组分别为(71.3±12.3)%和(65.1±13.0)%(t=3.82,P<0.01).示踪剂量24 h TUR在80.0%以上者,2组治疗剂量平均TUR均低于示踪剂量.结论①家兔对131I胶囊各时相TUR与液体比较无差异.②131I胶囊做标准源须溶解于甲状腺模型内.③胶囊剂型可以作为131I治疗甲亢的标准方法.④示踪量TUR 80.0%以上者2组示踪剂量TUR均高于治疗量TUR,注意加大131I投予量.     

海藻酸钠-成年软骨细胞培养移植修复成年兔关节软骨缺损的研究

目的 利用海藻酸纳-成年软骨细胞复合构建工程化软骨,并观察应用该工程软骨移植修复成年兔关节软骨缺损的长期效果。方法 取34周龄成年新西兰兔双膝关节软骨,分离软骨细胞.与海藻酸钠混合,细胞密度为4×10~6/ml,通过硅胶模型制成圆形柱状海藻酸纳-软骨细胞盘(20μl/个),体外培养。分别于2、4、6、8、10周取细胞盘,行苏木素-伊红(HE)、AB-PAS染色、免疫组织化学分析。同时选用成年新西兰兔28只,两侧股骨内髁造成全层软骨缺损模型,缺损处随机植入体外培养4周的海藻酸钠一软骨细胞盘(实验组)及无细胞的海藻酸钠载体(对照组),分别于术后6、12、24、48周取材,观察软骨缺损修复情况。结果 成年软骨细胞在海藻酸钠中呈丛状或球状增殖,4周时达增殖高峰,培养期内软骨细胞始终呈圆形或椭圆形,免疫组织化学显示盘中Ⅱ型胶原含量丰富,无Ⅰ型胶原产生。动物实验实验组软骨缺损以透明样软骨修复为主,对照组则以纤维组织填充为主,48周时两组修复组织均有一定程度退变。结论 成年软骨细胞在海藻酸钠中体外培养可维持良好的细胞表型,并形成工程化软骨。用此工程化软骨修复关节软骨损伤经48周观察有透明样软骨修复。     

缺血预处理对兔主动脉阻断后脊髓一氧化氮、后肢神经功能和肌电图的影响

目的　探讨缺血预处理 (IPC)对缺血预处理对兔主动脉阻断后脊髓功能和一氧化氮(NO)的影响。方法　 2 4只日本大白兔随机分为假手术组 (A组 )、缺血再灌注组 (B组 )和IPC保护组 (C组 ) ,每组 8只。分别于首次预处理即刻 (C 40 )、缺血即刻 (I0 )、缺血 45min(I45)、再灌注后 60min(R60 )和术后 7d处死动物前即刻 (R7d)采血检测血清和R7d脊髓组织NO的浓度。术后观察后肢神经功能的评分、后肢针电极肌电图 (EMG)和脊髓组织病理学的改变。结果　缺血再灌注损伤后B组血清NO浓度较缺血前和A、C组对应时点值显著升高 (P <0 .0 1)。C组R7d血清NO浓度明显低于其他时点及A组R7d测定值 (P <0 .0 5或 0 .0 1)。B组脊髓组织NO浓度显著高于A、C组(P <0 .0 1)。B组后肢神经功能和脊髓病理学评分均显著性低于A、C组 (P <0 .0 5或 0 .0 1) ,其后肢EMG亦较C组有显著性病理改变 (P <0 .0 1)。结论　IPC对家兔主动脉阻断后脊髓缺血再灌注损伤有良好的保护作用 ,其保护作用机制与抑制NO的生成有关。     

非细胞型组织工程化骨加自体红骨髓复合植骨修复兔尺骨长段骨缺损的实验研究

组织工程化骨可根据其种子细胞的来源分为细胞型和非细胞型。我们将猪长骨干骺端松质骨制成改良Kiel’s骨作为支架材料，从皮质骨提取骨形态发生蛋白(BMP)作为生物活性因子，两者按一定比例混合制成非细胞型组织工程化骨，对单独植入和加自体红骨髓复合植入修复骨缺损的能力进行了实验观察。     

Bax和Bcl-2在实验性兔梗阻性黄疸肝损伤中的表达及意义

梗阻性黄疸是外科的常见病症，肝脏是最先受损并损伤最重的器官。目前对细胞凋亡在梗阻性黄疸肝损害中的作用报道甚少。我们采用免疫组化法检测梗阻性黄疸大耳白兔肝组织Bax、Bcl-2蛋白在不同时期的表达情况，旨在探讨梗阻性黄疸时细胞凋亡在肝损伤中的作用及其调控机制。     

兔肢体高压电烧伤后骨骼肌MRI特征

目的:连续性观察兔肢体电烧伤后骨骼肌MRI平扫、增强及DWI成像特点,总结其变化规律。方法:选取16只实验兔,制作兔肢体高压电烧伤模型,分别于造模后2 h、24 h、48 h、72 h行双后肢MRI平扫、DWI检查（b=600 s/mm²）及造模肢增强扫描,每个时间点扫描完成后随机抽取2只兔处死,取病变肌肉行病理检查。结果:所有实验兔电极入口及出口处皮肤及皮下组织增厚、肿胀（入口处损伤更重）,局部皮下软组织间隙少量积液（14例）。骨骼肌可见“袖套样”损伤、“夹心样”坏死,整体呈“跳跃性”分布（16例）,随时间延长,损伤肌肉肿胀更明显、病变范围扩大、边缘逐渐模糊不清,电极入口处较出口处损伤累及更多肌群。T₂WI损伤肌肉呈片状高信号、稍高信号、低信号,部分混杂,24 h较2 h信号稍减低;T₁WI抑脂序列呈斑片状稍低、稍高混杂信号,但所显示病变范围明显小于T₂WI;增强扫描2 h时病变区明显强化,24～72 h强化程度逐渐减低、范围逐渐减小;DWI示受损肌肉呈明显扩散受限高信号,随时间延长,病变范围逐渐...