放线菌素23-21对HeLa细胞的作用

采用本室培养的子宫颈癌细胞PPMI1640加15%小牛血清.研究放线菌素23-21的抗癌作用.通过多项生物学指标的体外实验,证明20μg/ml的放线菌素23-21处理6小时后对HeLa细胞的生长有显著的抑杀作用,其生长曲线、软琼脂生长能力、分裂指数、集落生成率均较未用药的对照降低.放射自显影试验结果,放线菌素23-21对DNA有抑制作用.经此药处理的HeLa细胞在免疫小鼠体内不能生成肿瘤.电镜显示放线菌素23-21对HeLa细胞的损伤改变主要在核膜内侧,失去其原有的层状排列,核仁缩小.     

抗生素8302-1抗肿瘤作用的实验研究

抗生素8302-1是从灰色链丝菌-变种培养发酵液中,提取的放线菌素K的同类物。本文从体内和体外观察它的抗肿瘤作甩。结果显示体外对人红白血病K562和小鼠S180细胞有明显细胞毒作用,体内对小鼠S180腹水型有明显抗肿瘤作用,作用与药物浓度、剂量和作用时间有明显相关性。腹腔注射急性半数致死量(LD_(50))与8302-1的放线菌素K相仿。结果为进一步扩大临床前药理研究提供实验依据。     

海洋放线菌Streptomyces parvulus OUCMDZ-2554产放线菌素D的发酵条件优化

目的 对海洋放线菌Streptomyces parvulus OUCMDZ-2554产放线菌素D的发酵条件进行优化,提高放线菌素D的产量。方法 对培养基的组成、种龄、接种量、温度、装液量、pH、盐度和发酵时间等条件的研究,通过单因素和正交试验,选择最优发酵条件;并通过波谱分析及其理化性质确定放线菌素D结构。结果 最佳培养基为：K2HPO4 1.5 g、MgSO4 0.5 g、酵母浸膏5 g、可溶性淀粉22.5 g、陈海水1000 mL;最佳发酵条件：装液量150/500 mL（v/v）、种龄4天、接种量5%、盐度3%、起始pH 7.5、发酵温度28℃、摇床（180转每分）发酵12天。结论 以最佳发酵条件发酵,优化后放线菌素D的产量为优化前的3.6倍,达到364 mg/L。     

低浓度放线菌素D诱导HepG2细胞周期G2阻滞的分子机制研究

目的:探讨低浓度放线菌素D处理导致HepG2细胞周期G2阻滞的分子机制。方法:应用低浓度放线菌素D处理HepG2细胞不同时间,然后应用流式细胞仪检测HepG2生长周期变化;免疫荧光观察核磷蛋白B23(NPM)定位的变化;免疫印迹法检测NPM及其细胞周期相关蛋白P53和P21表达水平。结果:低浓度放线菌素D能够抑制HepG2细胞生长并使细胞周期阻滞于G2期;在放线菌素D作用下,NPM蛋白表达水平没有明显改变,但出现定位改变,即从核仁移位到核浆;放线菌素D处理引起P53和P21蛋白表达水平上调。结论:低浓度放线菌素D作用HepG2细胞导致细胞周期G2阻滞,其机制可能与NPM移位促使其相互作用靶蛋白P53和P21蛋白水平上调有关。     

姜黄素对放线菌素D/TNF-α诱导的PC12细胞和大鼠海马神经元损伤的影响

目的: 探讨姜黄素对放线菌素D(ActD)/TNF-α诱导的PC12细胞和大鼠海马神经元凋亡的影响及其作用机制。方法: 将PC12细胞分为以下6组:对照组、TNF-α组、ActD组、姜黄素组、ActD/TNF-α组和姜黄素+ActD/TNF-α组。各组细胞培养24 h后进行下列处理:倒置荧光显微镜普通光观察各组细胞的形态变化;Annexin V/PI染色流式细胞术检测各组PC12细胞凋亡率; Fluo-3 AM染色流式细胞术测定细胞内Ca²⁺浓度。制备离体大鼠海马脑片,分组处理同PC12细胞,细胞外微电极记录技术观察各组海马脑片CA1区长时程增强(long-term potentiation,LTP)的变化情况。结果: 10 μg/L ActD和50 μg/L TNF-α协同处理可导致PC12细胞明显损伤,而5 μmol/L姜黄素则可以减轻这种损伤作用(P<0.05);ActD/TNF-α可诱导PC12细胞内Ca²⁺浓度升高,姜黄素可以通过降低胞内Ca²⁺浓度而减少ActD/TNF-α引起的细胞凋亡(P<0.05)。此外,LTP实验也证实ActD/TNF-α可以显著抑制大鼠海马脑片LTP的诱发,而姜黄素可以拮抗这种抑制作用,改善神经元突触可塑性(P<0.05)。结论: 姜黄素可以改善ActD/TNF-α引起的神经元损伤,其机制可能是通过降低细胞内Ca²⁺浓度,维持胞内钙稳态而发挥作用。