金葡菌检测方法与应注意因素体会

葡萄球菌广泛存在于自然界，但能引起中毒的只有某些能产生肠毒素的菌株，金黄色葡萄球菌引起的食物中毒，在我国细菌性食物中毒中占很大比例，正确鉴定金葡菌非常重要，血浆凝固酶是鉴定金葡菌的常规方法，分为玻片法和试管法，下面我把该检测方法及应注意的影响因素简介如下。     

超滤膜技术分离灵芝多糖的研究

目的:研究超滤膜技术应用于提纯灵芝多糖的可行性及工艺.方法:采用卷式超滤膜对灵芝多糖进行分离提纯研究.结果:膜截留分子量6 000 D、超滤温度45～50 ℃、超滤压力0.6 MPa、时间45 min,制得灵芝多糖的纯度为73.5%,回收率为69.4%.结论:超滤膜技术分离提纯灵芝多糖工艺简单,效果较好,有产业化前景.     

高速逆流色谱提纯茶叶粗提物中EGCG单体研究

目的:研究高速逆流色谱(HSCCC)技术应用于提纯茶叶功能成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的可行性及工艺.方法:采用HSCCC技术从茶叶粗提物中分离提纯得到高纯度的EGCG.结果:乙醚-乙酸乙酯-水溶剂系统(体积比4∶ 10∶ 25)具有较好的分离效果,较佳工艺条件为温度35℃、转速800 r/min和流动相流速2.5 mL/min.结论:采用HSCCC技术分离得到的EGCG样品的HPLC纯度达95%.     

延胡索中盐酸脱氢紫堇碱对照品的制备与鉴定

目的:研究中药延胡索中盐酸脱氢紫堇碱的制备方法.方法:延胡索粗粉用80%乙醇提取,浓缩后经D101大孔树脂柱色谱分离获得总生物碱,再以氧化铝柱色谱和凝胶G-15柱色谱分离,收集含脱氢延胡索碱的组分,经甲醇重结晶制备对照品,并采用波谱方法对其进行结构鉴定.结果:经HPLC分析和面积归一化法计算,盐酸脱氢紫堇碱对照品纯度为98.6%.结论:该制备方法简便可行,可用于盐酸脱氢紫堇碱对照品的制备.     

大鼠骨骼肌中19S调节复合体的分离、提纯及其在严重烫伤后蛋白水平的变化

目的：探讨19S调节复合体蛋白在烫伤大鼠骨骼肌蛋白降解中的作用机制。方法：利用层析技术，分离、纯化大鼠骨骼肌19S调节复合体，并常规免疫制备其抗体。制作Wistar大鼠烫伤模型，随机分为烫伤组，设伤后1、2、3、5、7d时相点（每时相点8只），另取8只正常大鼠设为对照组。用固相免疫印迹法测定19S调节复合体含量的变化。另取64只烫伤大鼠，行19S抗体注射实验，分为：注射组，由尾静脉分两次注射纯化的19S抗体（3mg/kg),分别于注射后第1、2、3天处死；对照组；尾静脉注射相同体积等渗盐水，其余处理同注射组。测定烫伤大鼠骨骼肌中酪氨酸的释放速率。结果：获得了纯度较高的19S调节复合体。从烫伤后第1天起，与对照组比较，大鼠骨骼肌中的19S调节复合体含量开始明显增加，骨骼肌蛋白质降解速率也在伤后第2天显增强，大鼠骨骼肌中的19S调节复合体含量开始明显增加，骨骼肌蛋白质降解速率也在伤后第2天显增强，19S抗体则能明显抑制蛋白质降解的增加。结论：烧伤刺激可上调骨骼肌19S调节复合体的蛋白水平，从而激活26S蛋白酶复合体对蛋白质的降解作用，这可能是烧伤后负氮平衡的发生重要原因。     

几种不同方法制备恶性疟原虫基因组DNA的比较

目的　比较３ 种不同的基因组 Ｄ Ｎ Ａ 提取方法制备恶性疟原虫基因组 Ｄ Ｎ Ａ 的效果。方法　分别采用酚－ 氯仿－ 异戊醇抽提法、 Ｗｉｚａｒｄ 基因组 Ｄ Ｎ Ａ 纯化试剂盒和磷酸钠盐溶液, 分离提取恶性疟原虫基因组 Ｄ Ｎ Ａ, 通过 Ｄ Ｎ Ａ 含量测定和 Ｐ Ｃ Ｒ 鉴定, 比较它们的提取效果。结果　前两种方法制备恶性疟原虫基因组 Ｄ Ｎ Ａ 的效果相仿, 纯度较高; 第三种方法最为简便, 所得的 Ｄ Ｎ Ａ 含量明显高于前两种方法, 但其纯度较低, 蛋白质含量最高。结论　３ 种方法各有优缺点, 第３ 种方法简便、快捷、经济, 更有实用价值。     

两种功能单体制备柯里拉京分子印迹聚合物的比较

[目的]优选合成柯里拉京(corilagin)分子印迹聚合物的功能单体.[方法]通过评价甲基丙烯酸和丙烯酰胺两种功能单体所合成的柯里拉京分子印迹聚合物的色谱表征,考察这两种聚合物对柯里拉京模板分子的印迹作用.[结果]以丙烯酰胺为功能单体得到的聚合物分子印迹效率高于甲基丙烯酸.[结论]丙烯酰胺是合成柯里拉京分子印迹聚合物的适宜功能单体.     

纤维素酶在提取丹参多糖中的应用

目的研究酶法提取丹参多糖的最佳工艺。方法运用正交设计法设计酶法提取丹参多糖工艺,采用分光光度法测定丹参多糖含量。结果酶法提取丹参多糖的最佳工艺是温度60℃、加酶量5％、提取时间120min。结论酶法提取丹参多糖节省能源,提取率高。     

月桂树提纯得到的山奈酚糖苷与喹诺酮类药物对MRSA的协同作用

之前展开的一项研究中,LiuMH等报告了从月桂树中分离得到的2种山奈酚糖苷,山奈酚-3-O-α-L-（2”,4”-di-E-P-香豆酰基）-鼠李糖苷（C2）和山奈酚-3-O-α-L-（2″-E-P-香豆酰基-4″-Z-p-香豆酰基）-鼠李糖苷（C3）,这2种山奈酚糖苷对MRSA和耐万古霉素肠球菌都具有较强的抗菌活性。     

人源瞬时受体电位M2型通道Nudix水解酶9同源结构域的提取和纯化

摸索人源瞬时受体电位M2型通道（TRPM2）羧基端Nudix水解酶9（NUDT9）同源结构域（NUDT9-H）的蛋白提取和纯化方法。 异丙基硫代半乳糖苷诱导表达的Rosetta（DE3）大肠埃希菌菌株经超声破碎和离心后,将收集到的上清液与GST磁珠结合并用还原型谷胱甘肽洗脱以抽提GST-NUDT9-H融合蛋白,浓缩离心后再经分子排阻色谱层析纯化,最后经凝血酶酶切并与GST磁珠结合即得NUDT9-H蛋白。 含有0.5%的十二烷基-β-D-麦芽糖苷（DDM）裂解溶液体系和0.025%的DDM分子排阻层析色谱溶液体系能够提高GST-NUDT9-H融合蛋白的稳定性,再按每2 mg融合蛋白加入1 U凝血酶切割24 h,即获得高纯度NUDT9-H蛋白。 NUDT9-H蛋白稳定性较差,提取和纯化体系中需添加DDM以稳定其构象从而提高目的蛋白的产量和纯度。