化维纤胶囊中腺苷含量的测定

目的:建立化维纤胶囊中腺苷的HPLC测定方法。方法:用不同提取试剂提取后,以HPLC法测定腺苷含量及加标回收率,选择最佳提取液,并作方法学论证。结果:以纯水作为提取试剂,腺苷在0.84~66.96μg/m l的线性范围内,回归方程Y=68700X-18500(r=0.9999)。最低检出浓度为0.02 mg/100 g;当样品添加浓度为8.37~41.85 mg/100 g时,方法回收率为95.9%~102.1%。结论:以纯水提取化维纤胶囊中的腺苷,操作简便、定量准确可靠。     

凹凸棒对盐酸小檗碱吸附作用考察

目的：考察凹凸棒对中药水煎提取液中盐酸小檗碱的吸附影响和对无效成分的吸附清除作用，并与自然静置沉淀法进行对比研究。方法：以水煎提取液中总固体物量和盐酸小檗碱含量作为评价指标，分别用不同量的普通凹凸棒和酸化凹凸棒处理黄连、一清颗粒水煎提取液，评价其吸附沉淀效果，平行与自然静置沉淀法进行比较。结果：凹凸棒对无效成分具有明显的吸附清除作用，对盐酸小檗碱也有一定的吸附影响，酸化凹凸棒沉淀去除无效成分的效果优于普通凹凸棒。结论：酸化凹凸棒作为中药水煎提取液中盐酸小檗碱精制提取的吸附沉淀剂，尚需进一步进行表面结构修饰研究。     

凹凸棒对大黄素吸附作用考察

目的：研究凹凸棒对大黄药材及一清颗粒水煎提取液中大黄素和浸膏的吸附作用。方法：以大黄素的含量和浸膏得量作为评价指标，HPLC法作为大黄素定量方法，分别采用普通凹凸棒和酸化凹凸棒对大黄药材及一清颗粒水煎提取液进行吸附澄清处理，并与自然静置沉淀法进行比较。结果：酸化凹凸棒使大黄素含量和浸膏得量均有一定降低，而普通凹凸棒对大黄素含量和浸膏得量无明显影响。结论：凹凸棒用于蒽醌类化合物水煎提取液的吸附澄清，可明显去除一些无效成分，但也对有效成分大黄素产生较少吸附。     

大鼠胚胎小脑提取液对培养脊髓神经细胞的作用

目的：探讨不同胎龄大鼠小脑提取液（ＣＥ）对体外培养脊髓神经细胞的影响。方法：制备不同蛋白浓度的１４,１６,１８,２０ｄ胎鼠（Ｅ１４,Ｅ１６、有８、Ｅ２０）ＣＥ〈加入原代培养的Ｅ１６胎鼠脊髓神经细胞中,２４ｈ后以微量快速自动比色法检测细胞活性。结果：实验组各胎龄ＣＥ均能促进培养脊髓神经元的存活,并有蛋白浓度依赖关系,与对照组及其它各实验组相比有极显著性差异,Ｅ１４和Ｅ１８ＣＥ分别在蛋白浓度为０．２０     

OCE对体外培养的视网膜组织的抗氧化作用

目的：观察不同成份的培养液对成年犬视网膜组织进行体外培养的前后相关生化指标的改变，旨在为视网膜移植提供抗氧化能力的保护性方法。方法：将健康成年家犬74眼随机分成六组，Ⅰ（新鲜视网膜组）Ⅱ（常规培养液组）Ⅲ（高浓度OCE组）Ⅳ（低浓度OCE组）Ⅴ（高浓度全脑组织提取液组Ⅵ（低浓度全脑组织提取液组）培养一周。六组视网膜取材后进行SOD、MDA、G－Px,GST,T－AOC生化指标的测定。结果：Ⅱ组与Ⅰ组SOD、G－Px、GST、T－AOC明显下降；DMA值增多非常显著；Ⅲ、Ⅳ组与Ⅱ组比较，T－AOC、SOD、G－Px、GST值显著增高，Ⅳ组明显高于其它各培养组；Ⅲ、Ⅳ组与Ⅱ组比较，MDA值降低明显，Ⅳ组降低最明显。结论：成年犬OCE中含有清除自由基、增强抗氧化能力的特殊物质。并且低浓度OCE对体外培养的视网膜组织抗氧化作用显著。     

损伤胰腺提取液对骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的作用

背景：损伤胰腺提取液含有胰腺再生过程的特异性生长因子，能够促进β细胞系增殖和胰岛素分泌，可能有助于胰岛再生和细胞分化。 目的：观察损伤胰腺提取液对骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的影响。 设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2005-06/2007-03在解放军军事医学科学院生物工程研究所完成。 材料：清洁级雄性Sprague-Dawley大鼠6只，由解放军军事医学科学院实验动物中心提供。活化素A、视黄酸、胰蛋白酶抑制剂为Sigma公司产品，链脲菌素为Sigma公司产品。 方法：大鼠腹腔注射链脲菌素，2 d后血糖浓度超过10 mmol/L时取其胰腺组织，在含有胰蛋白抑制剂的磷酸盐缓冲液中制备匀浆，2次离心后取上清，即为损伤胰腺提取液。采用密度梯度离心法分离大鼠骨髓间充质干细胞，当传代细胞生长至70%~80%融合时，随机分为4组：对照组以体积分数为0.02的胎牛血清的低糖DMEM培养11 d；活化素A+视黄酸组以活化素A、视黄酸各自诱导24 h，再以碱性成纤维生长因子、尼克酰胺、尼克酰胺+exendin 4各自诱导3 d；活化素A+视黄酸+损伤胰腺提取液组在前组基础上添加损伤胰腺提取液；损伤胰腺提取液组单纯以损伤胰腺提取液诱导11 d。 主要观察指标：应用免疫细胞化学和反转录聚合酶链反应等方法对分化细胞表型进行检测，ELISA法检测细胞胰岛素的分泌水平。 结果：活化素A+视黄酸组、活化素A+视黄酸+损伤胰腺提取液组有较多的胰岛素阳性反应细胞出现，且后者形成的胰岛样结构较前者大而多；损伤胰腺提取液组可见较少的胰岛素阳性反应细胞及胰岛样结构。各诱导组均检测到胰岛素1 mRNA的表达，培养上清中均可检测到胰岛素的分泌，且活化素A+视黄酸+损伤胰腺提取液组胰岛素分泌水平>活化素A+视黄酸组>损伤胰腺提取液组（P < 0.05）。对照组各项指标均呈阴性表达。 结论：基于前期活化素A、视黄酸及其他成熟因子的诱导方案基础上，损伤胰腺提取液对骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞具有促进作用，能够提高诱导分化效率。