Hoechst 33342标记恒河猴皮肤干细胞向结膜上皮细胞分化

 [目的]探讨皮肤干细胞诱导分化为结膜上皮细胞,为组织工程结膜探索一种新型的种子细胞,为严重眼表疾病的治疗奠定基础。[方法]在体外培养纯化鉴定恒河猴皮肤干细胞,并用Hoechst 33342标记,标记后的皮肤干细胞与结膜上皮细胞进行Transwell非接触共培养10d,然后对诱导后的细胞用细胞免疫化学以及流式细胞术检测结膜上皮细胞的特异性表面标志,包括角蛋白4和粘蛋白4,同时检测细胞的Hoechst 33342表达情况。[结果]纯化后的皮肤干细胞比例接近90%。Hoechst 33342标记后的皮肤干细胞胞核显示蓝色荧光。在与结膜上皮细胞共培养10d后,皮肤干细胞显示结膜上皮细胞的标志粘蛋白4和角蛋白4阳性,流式细胞术检测阳性细胞比例分别为49.9%和95.6%,同时细胞还显示胞核的Hoechst 33342表达。[结论]灵长类动物恒河猴的皮肤干细胞,在体外的适宜条件下,可诱导分化为有结膜上皮细胞特征的细胞。     

bFGF在成年猴脊髓表达的免疫组织化学研究

目的探讨多肽生长因子bFGF在成年猴脊髓的表达分布情况，为成年猴脊髓存在该生长因子的表达提供可靠的免疫组织化学证据．方法取云南成年健康雄性猕猴1r8脊髓节段制作20μm厚的连续冰冻切片。间隔取片后以抗bFGF抗体行免疫组化ABC染色．在Olympus光学显微镜下观察bFGF样免疫阳性反应物（bFGF—IR）在脊髓的分布．结果bFGF—IR在成年猴脊髓腹角神经元、背角神经元、背角Lissauer束和中央管（X板层）均有分布．结论成年猴脊髓存在多肽生长因子bFGF的表达，提示该多肽生长因子在成年猴脊髓的生理过程中发挥作用，而且这种作用具有复杂性和多面性．     

中国恒河猴CD8+T细胞缺失模型制备

目的：测试用抗-HuCD8^＋T细胞单克隆抗体方法去除中国恒河猴体内CD8^＋T细胞效果，为建立CD8^＋T细胞缺失恒河猴模型提供实验依据。方法：抗-HuCD8^＋T抗体cM-T807在0、3、7d注射2只中国恒河猴，不同的时间取外周血，腹股沟和腋下淋巴结。制备CD3／CD4／CD8标记的外周血和淋巴细胞悬液，流式法测定恒河猴外周血和淋巴结中CD8^＋T细胞的去除效果。结果：注射了cM-T807的中国恒河猴，24h后，外周血中的CD8^＋T细胞缺失99．9％，持续27d；168h后，淋巴结中CD8^＋T细胞缺失约90．0％，持续21d。结论：首次证实抗-HuCD8^＋T细胞抗体cM-T807能有效去除中国恒河猴体内CD8^＋T细胞，为建立CD8^＋T细胞缺失动物模型（CD8^＋T Cells del）奠定基础。     

人工合成胸腺素α1在猴体内静脉注射的药动学研究

目的：研究人工合成胸腺素α1（sTα1）在猴体内i.v.的血药浓度-时间曲线、药动学参数特点。方法：用竞争性ELISA法测定sTα1在猴体内i.v.后血清中的药物浓度,用DAS药动学统计软件进行血药浓度-时间曲线拟合及药动学参数计算。结果：猴i.v.sTα11.2mg/kg的药动学特征符合二室开放模型,呈一级动力学消除。结论：猴i.v.sTα1的药动学行为符合二室一级消除。     

含吐温80中药注射剂对不同动物的过敏反应

目的:观察吐温80及含吐温80的中药注射剂对不同动物的过敏反应,阐明不同动物出现毒性反应的原因.方法:在犬和猴两种不同种属的动物体内,分别静注或静滴0.35%吐温80溶液及含相同百分含量吐温80的中药注射剂,观察动物的血压、心率、心电图及过敏反应.结果:犬静滴吐温80溶液及含吐温80的中药注射剂5ml·kg-1(内含吐温80 17.5mg·kg-1)后,均出现血压下降、心率减慢及皮肤红斑、流涎呕吐、痉挛抽搐等过敏反应;而猴静注或静滴吐温80溶液及含有吐温80的中药注射剂10ml·kg-1(内含吐温80 35mg·kg-1),未出现过敏反应.结论:犬对吐温的过敏反应是动物的种属性特异反应.     

SHIV-KB9感染中国恒河猴的实验研究

目的研究SHIV-KB9感染中国恒河猴的可能性,确定其有效病毒浓度,明确实验猴感染SHIV-KB9后的病毒复制和免疫反应情况,建立SHIV/SAIDS模型,并确定、完善SHIV/SAIDS模型评价指标。方法实验前采集猴血清并进行血清学检查。选出6只无SIV、STLV、SRV/D和B病毒感染的恒河猴,分别用10倍系列稀释的病毒液静脉感染实验猴,使用流式细胞术、血常规检测、病毒分离、DNA-PCR和RT-PCR等方法确定实验猴是否被感染,以及感染后恒河猴体内病毒复制和免疫细胞损伤情况,持续测定3个月。结果实验猴的血浆病毒载量、病毒分离结果、CD4+/CD8+比值和CD4+细胞数等证实,4.8×106copies/mL以上浓度的SHIV-KB9病毒液能成功感染中国恒河猴。结论SHIV-KB9成功感染中国恒河猴为进一步建立SHIV/SAIDS模型奠定了良好的实验基础,为使用此模型评价抗病毒药物或疫苗提供了条件。     

猴痘病毒及其预防

猴痘是由猴痘病毒引起的一种罕见、散发的、天花样临床表现的急性传染病。猴痘病毒是一种动物源性病毒，与天花病毒同属正痘病毒科。该病毒一旦发生突变重组，将会在人类中更易传播，甚至取代早已消灭的天花病毒，填补已出现的生态链缺口。2003年5月，猴痘在美国首次暴发，截止2003年6月17日，根据美国疾病预防与控制中心(CDC)公布的最新统计，美国4个州共发现猴痘疑似或确诊患者81名。本文就近年来有关猴痘病毒的流行病学特征及预防作一综述。     

血管新生调节因子VEGF及其受体在恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘中的表达

目的:研究血管新生调节因子VEGF及其受体Flt-1、KDR在恒河猴正常妊娠和药物流产胎盘组织中的表达。方法:用免疫组化方法检测妊娠30天的恒河猴上述蛋白在胎盘中的表达。结果:VEGF蛋白主要表达于胎盘绒毛和子宫内膜,在母胎界面和子宫内膜血管中显著高表达;KDR蛋白的表达模式与VEGF类似;Flt-1蛋白在两组胎盘中的表达无显著差异。VEGF和KDR在药物流产胎盘中的表达量明显低于正常妊娠胎盘。结论:VEGF、Flt-1及KDR在恒河猴妊娠早期参与子宫内膜和胎盘发育过程中的血管新生,在胎盘绒毛的浸润以及腺上皮细胞分化及其分泌等过程中也发挥着重要作用;流产药物可能通过下调VEGF和KDR蛋白的表达,影响了血管发生和胎盘发育,增加了流产机会。     

儿童和青少年医学文献

儿童医疗支出的经济负担方面的差异,在押青少年中丙肝病毒感染的发病率和危险因素,2003年印第安那州猴痘病毒在接触获感牧羊犬人群中的传播,绒膜羊膜炎对早产儿神经系统发育的影响.     

猴B病毒相关抗体及B病毒抗体检测的比较研究

本文比较了用ＨＳＶ－１（ＩＥＡ）和Ｂ病毒（ＩＦＡ）的方法检查猴Ｂ病毒相关抗体和Ｂ病毒抗体的结果：ＩＥＡ检查出的Ｂ病毒相关抗体阴性猴，经ＩＦＡ检查，全部为Ｂ病毒抗体阴性。用ＩＦＡ检查了Ｂ病毒相关抗体阴性的恒河猴，在单笼隔离饲养六个月后，有９８．３％的动物Ｂ病毒相关抗体仍为阴性，表明ＩＲＡ的阴性结果有较好的一致性。本文讨论了建立无Ｂ病毒感染猴群的可行性。