人工饲养条件下死亡实验恒河猴肠道病理改变特点分析

目的 观察人工饲养条件下实验恒河猴肠道病理改变,探讨实验猴肠道疾病分布规律和病理改变特点,丰富实验猴自发病变基本研究资料.方法 对1998 ～2008年云南地区饲养的自然死亡的155只恒河猴(年龄2～20岁)的肠道进行病理检查,按年龄分为幼年组、成年组、老年组,并对观察结果进行统计学分析.结果 155例恒河猴中58例检出肠道病变,有慢性肠炎、急性肠炎、黏膜充血水肿、出血、糜烂、溃疡、穿孔、寄生虫共8种主要病变,出现率最高的为急性肠炎(20.00％).实验猴不同年龄组肠道病变类型分布基本相同,肠道病变率随年龄增长而增高,不同年龄组间统计学分析差异无显著性.结论 人工饲养条件下死亡实验猴肠道病变检出率较高,急性肠炎是实验猴的主要致死原因之一,实验猴肠道病理改变随年龄增长而病变加重.对实验猴饲养和研究时,应重视肠道病变因素,尤其是急性肠炎.死亡实验猴肠道病变研究对实验猴的质量控制和相关动物实验有重要指导价值.     

第60届日本实验动物年会重点科研内容介绍与分析

正2013年5月,随中国实验动物学代表团,参加了第60届日本实验动物科学技术年会。除日本本国研究者外,中国、中国台北、意大利、澳大利亚、韩国、菲律宾、印度、新加坡等多个国家和地区的实验动物界派人参加会议,会议汇集了的近千名实验动物相关领域的科研、技术及管理专家。本次会议共接收了论文及报告投稿200多篇,涉及了实验动物的各个领域。按照不同议题设置5个分会场进行报告,现将其中部分重点内容作一简要介绍与分析,与读者分享。     

实验恒河猴肺自发病变的组织学观察

目的 了解人工饲养条件下恒河猴脏器自发病变的发生情况，建立恒河猴自发病变的病理图谱。方法 采用常规组织学技术结合特殊染色方法，观察了各个年龄阶段的52只恒河猴肺的组织病理变化。结果 发现84．6％的肺存在不同程度的病变，包括各型肺炎、炎性细胞浸润、坏死、脓肿、结缔组织增生、纤维化等共17种病变。随年龄增长肺病变程度和病变发生率增加。结论 肺脏是恒河猴自发病变较严重的器官之一，自发病变对动物实验的干扰应引起足够重视。     

SMART技术构建恒河猴睾丸组织全长cDNA文库

目的 运用SMART技术构建恒河猴睾丸组织全长cDNA文库.方法 提取恒河猴睾丸组织总RNA并分离出 mRNA,用clontech公司SMARTMcDNA文库构建试剂盒反转录合成第一链cDNA,LD-PCR扩增获得全长cDNA双链;经SfiI酶切、层析柱分离后,500bp以上的片段与pDNR-LIB连接后电转化及铺板,建成原始文库.结果 经鉴定,原始文库为2.5×106个重组子,扩增后文库滴度为4.5 X 109CFU/mL.重组率为100%,平均插入片段为1.6kb.结论 已构建文库质量较高,为进一步筛选、克隆睾丸特异表达基因奠定了基础.     

体外扩增恒河猴自体内皮细胞人工血管移植研究（一）

目的:为恒河猴人工血管移植研究提供内皮化人工血管.方法;将恒河猴表浅静脉内皮细胞在体外培养13.89±1.36天;扩增培养的内皮细胞衬里于用纤维蛋白胶预衬的ePTEE人工血管,继续培养9天.结果:细胞数增加147.93±88.68倍.所培养的细胞为二倍体细胞,纯度99%.原代及传代细胞培养上清液中6-keto-PGFla和vWF含量无显著性差异.细胞种植后2小时和9天、人工血管腔面见一层均匀的基质,基质表面有一层连续的内皮细胞单层.内皮细胞紧密排列,呈梭状,形态饱满.细胞种植后9天,内皮细胞胞浆内微丝、微管数量明显增加,表明细胞骨骼成熟.结论:内皮化人工血管可用于置换恒河猴动脉.     

补肾活血方对恒河猴PCO模型卵巢PAI-1mRNA表达影响的实验研究

目的:探讨补肾活血方对恒河猴PCO模型卵巢局部纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1mRNA)表达的影响。方法:选择健康育龄雌性恒河猴随机分为正常组、模型组、中药组;采用皮下注射丙酸睾丸酮和绒毛膜促性腺激素方法建立PCO模型;分别灌胃给予生理盐水、补肾活血方,采用原位杂交技术观察其卵巢局部PAI-1mRNA表达的变化。结果:恒河猴卵巢PAI-1mRNA的表达主要存在于卵泡膜细胞及间质细胞,模型组表达强度超过正常组,中药组表达水平明显低于模型组,与正常组相比无差异(P>0.05)。结论:恒河猴PCO模型卵巢局部PAI-1mRNA异常表达,补肾活血方具有改善这种异常表达作用,可能是其促进卵巢排卵的作用机制。     

“猴王”万籁鸣的养生之道

万籁鸣，我国动画事业的创始人，原上海美术电影制片厂导演。1926年，万氏兄弟完成了中国第一部动画片《大闹画室》，1941年，他们又完成了中国也是亚洲第一部动画长片《铁扇公主》。1964年，万籁鸣先生导演了动画巨片《大闹天宫》，该片多次获国内、国际电影大奖，在国内外赢得很高声誉。1997年，万籁鸣先生在上海逝世，享年98岁。     

绿色荧光蛋白标记骨髓基质干细胞在恒河猴体内构建组织工程骨的示踪作用

目的 用绿色荧光蛋白(GFP)标记恒河猴骨髓基质干细胞(rBMSC),以示踪其在体内参与组织工程骨形成的情况.方法 用OBI-293A细胞对腺病毒Ad5.CMV-GFP进行扩增,用Ad5.CMV-GFP转染rBMSc,将转染成功的第三代BMSc在转染后48 h消化制成细胞悬液,接种至块状可吸收HA上,体外培养3 d后,将其植入恒河猴(同体移植)背阔肌的肌袋内,以未转染GFP的BMSC用同样的方法接种块状可吸收HA上,作为对照,术后6周取材,4%的中性多聚甲醛固定,塑料包埋,制作骨磨片PI染色在激光共聚焦显微镜下进行观测.结果 转染GFP后,rBMSc仍贴壁生长,呈梭形或多角形,仍分裂增殖,但增殖速度有所降低.48 h可见细胞发出强烈的荧光,呈全细胞分布,计数转染率达80%.在激光共聚焦显微镜下观察骨磨片,可见材料内有发出较强荧光的细胞结构,能同时被PI染液着色.结论 绿色荧光蛋白能有效示踪组织工程骨种子细胞,种人体内的BMSC是组织工程骨骨组织形成的主要细胞来源.     

中国源恒河猴Mamu-B＊17等位基因的筛查

目的对本场中国源恒河猴Mamu-B＊17等位基因的存在情况进行筛查,为艾滋病动物模型的制备和疫苗效果的评价提供帮助。方法随机筛选07年出生的恒河猴101只,股静脉采取抗凝血200μL,提取基因组。根据Mamu-B＊17等位基因的特异性序列设计引物,利用序列特异性引物PCR（sequence specific primers polymerasechain reaction,PCR-SSP）筛查这101只恒河猴B＊17等位基因的存在情况。结果没有筛查到Mamu-B＊17阳性的恒河猴,与印度源恒河猴12%的存在率有很大的差异。     

恒河猴血清孕酮含量测定方法

目的 建立恒河猴血清中孕酮含量测定方法.方法 本文采用放射免疫测定技术.结果 孕酮的回收率为94%,批内CV为5.1%~8.3%,批间CV为4.5%~7.7%,灵敏度为5~10pg.说明该方法具有较高的灵敏度、特异性、准确性.分别测定了幼年组、成年组和老年组的雌性恒河猴的血清中的孕酮含量分别为:(0.20±0.04)ng/mL、 (6.26±0.17)ng/mL和(0.35±0.06)ng/mL;成年雌性恒河猴月经周期孕酮的变化范围为:滤泡期为(1.10±0.12)ng/mL,排卵期(2.36±0.18)ng/mL,黄体期(6.17±0.15)ng/mL,妊娠期随着妊娠月份的增加,孕酮浓度也增加,最高可达50ng/mL.结论经实验验证,该方法灵敏、可靠、适用,可作为恒河猴血清中孕酮含量测定的一种方法.