体外培养恒河猴外周血单核巨噬细胞的研究

目的：建立一种简单、经济、高效地培养恒河猴外周血单核巨噬细胞（monocyte-derived macrophage,MDM）的方法。方法：用肝素钠抗凝管采集健康成年中国恒河猴（Macaca mulatta）全血,密度梯度离心法分离外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）。同时用无抗凝剂采血管采集同一只猴外周血,自凝后分离血清。将猴PBMCs置于CELLBIND Surface的96孔（0.8×106个细胞/孔）或48孔培养板（3×106个细胞/孔）中,用含不同百分比的猴自体血清或胎牛血清（fetal calf serum,FCS）的RPMI 1640培养液培养24h后洗弃未贴壁细胞,加入含有猴自体血清或FCS的新鲜培养基继续培养7天后观察细胞形态学。分化良好的猴单核巨噬细胞贴壁能力强,占据板底大部分区域。胞体形态多样,多数呈长梭形。用巨噬细胞标记受体（CD14）抗体染色判断细胞纯度。并用细菌内毒素（LPS）刺激分化的巨噬细胞,检测巨噬细胞炎性因子的表达。此外,用猴艾滋病毒（SIVmac17E-Br、SIVmac251）和人-猴嵌合体艾滋病毒（SHIV KU-1）感染分化良好的猴巨噬细胞,检测病毒在猴巨噬细胞中的复制。结果：在含2%猴自体血清的RPMI 1640培养条件下,大多数（>85%）猴单核细胞能在24h内贴壁,体外分化5-7天后,猴巨噬细胞纯度大于96%。相比而言,含较高浓度（4%,8%或10%）猴自体血清或FCS的RPMI 1640 培养基对猴单核细胞的贴壁和分化作用较差。分化良好的猴巨噬细胞对LPS刺激敏感,可产生多种巨噬细胞炎性因子。此外,这些细胞对SIV或SHIV均易感,产生感染性病毒。结论：含2%猴自体血清的RPMI 1640培养基适于原代猴单核细胞的贴壁和分化。该方法简单、花费少,无需生长因子,且分化效果好,是培养猴艾滋病毒及开展相关免疫学实验的重要手段。     

中国恒河猴DNGR-1分子C型凝集素样结构域在大肠杆菌系统表达

目的获得恒河猴C型凝集素结构域家族9的A成员(Clec9A)基因编码区序列;体外表达CLEC9A的C型凝集素样结构域(CTLD)。方法利用Clec9A基因特异引物,反转录PCR扩增中国恒河猴Clec9A基因编码区,亚克隆至pGEM-T载体,获得pGEM-T-DNGR质粒并进行测序。构建CLEC9A分子的CTLD区原核表达质粒pET-32a-CTLD,转化BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,并用SDS-PAGE和Western blot法对目的蛋白进行鉴定。结果 PCR扩增得到726 bp的Clec9A编码区全长,测序和序列比对发现恒河猴CLEC9A编码区的核苷酸序列与人和小鼠的同源性分别为95.0%和73.1%,推测的氨基酸同源性分别为91.7%和57.3%。体外表达获得相对分子质量(Mr)约32 000的CTLD融合蛋白,Western blot方法鉴定发现其与人DNGR-1分子具有相似的抗原性。结论中国恒河猴Clec9A基因与人的高度相似并能编码与人CTLD抗原性相似的蛋白。     

接种天花疫苗对猴痘病毒感染的保护作用研究进展

2022年,猴痘疫情从区域的地方性流行扩大至全球暴发,并被WHO列为国际关注的突发公共卫生事件。由于正痘病毒之间的基因序列具有高度相似性且正痘病毒可诱发交叉反应型抗体,接种天花疫苗可能会影响猴痘病毒感染诱导的免疫应答水平及感染者的健康结局。分析天花疫苗接种对猴痘病毒感染的保护作用将有助于确定疫情防控策略和措施。因此,本文通过了解既往猴痘疫情中天花疫苗的接种情况及其健康结局,综述天花疫苗接种、免疫应答情况和临床数据之间的关联性,为猴痘疫情的预防控制策略提供科学证据。     

高效液相色谱法测定猴耳环消炎胶囊中没食子酸的含量

目的:建立一种高效液相色谱法直接测定猴耳环消炎胶囊中没食子酸的含量。方法:色谱柱为alltimaC18 (250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水(0.1%磷酸)=6:94,流速为0.9mL/min,检测波长为273nm。结果:没食子酸在15.2～152μg/mL范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.8%(RSD =0.73%)。结论:本法操作简便,重现性好,结果准确,快速,可作为猴耳环消炎胶囊的质量控制方法。     

锡类散治疗慢性糜烂性胃炎的40例效果观察

中成药锡类散,在治疗口腔溃疡、咽喉肿痛糜烂方面效果显著。近几年来,我们将其治疗慢性糜烂性胃炎40例,也取得良好的效果。现总结报告如下:1资料与方法1.1临床资料选择本科2002年5月￣2004年4月收治的慢性糜烂性胃炎74例,男46例,女28例,男:女=1.64:1;年龄22￣84岁,平均年龄48岁     

单笼与群居饲养对雌性食蟹猴生理指标的影响

目的 了解单笼与群居饲养雌性食蟹猴生理指标的差异.方法 选取9只4～6岁雌性食蟹猴作为实验对象,前5个月单笼饲养,后5个月群居饲养.对体质量、体温、血常规、血生化、尿常规等生理指标进行测定.采用重复测量方差分析比较两阶段指标是否存在差异.结果 食蟹猴单笼阶段的体质量显著低于群居阶段(P＜0.05).血常规中,单笼阶段的白细胞计数(WBC)、嗜中性粒细胞计数(NEUT)、嗜中性粒细胞百分比(NEUT％)极显著高于群居阶段(P＜0.01);单笼阶段的单核细胞计数(MONO)、单核细胞百分比(MONO％)极显著低于群居阶段(P＜0.01);单笼阶段的淋巴细胞百分比(LYMPH％)显著低于群居阶段(P＜0.05).血液生化中,单笼阶段的总胆红素(TBIL)极显著低于群居阶段(P＜0.01);单笼阶段的天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)显著高于群居阶段(P＜0.05).单笼阶段的尿常规中的蛋白质阳性率高于群居阶段,组间相比差异显著(P＜0.05).其余指标组间相比无统计学差异.结论 食蟹猴更适合群居饲养,如果长期单笼饲养,可能对其体质量及血液学和尿常规中某些指标产生较大影响.     

大蒜素体外抗猴甲型轮状病毒的研究

目的  研究大蒜素体外抗猴甲型轮状病毒（SA11）的作用。方法  通过病毒滴度测定来确定大蒜素能否抗SA11以及最佳浓度。结果  大蒜素对MA104细胞的最大无毒浓度为100 mg/ml,病毒滴度测定可以得出,50 mg/ml的大蒜素可以抑制SA11感染的MA104细胞出现细胞病变效应（CPE）。结论  一定浓度的大蒜素在体外有抗SA11的作用。

     

知了猴不能吃太多

知了猴实名金蝉,金蝉素有“唐僧肉”的美誉,食用和药用价值非常高,还可以益精壮阳,具有极高的药膳营养价值。金蝉的药膳营养价值非常高,有研究表明：刚出土的知了猴含蛋白质58．58％,是瘦牛肉的3．5倍,瘦猪肉的4．3倍,羊肉的3.8倍,鸡肉牛肉的3倍,鲤鱼的4倍,鸡蛋的6倍。而金蝉脂肪含量只有10．23％,是难得的高蛋白低脂天然无公害高级营养品。     

急性SIVmac感染猴模型评价中药1号体内抗病毒效果

采用ＳＩＶｍａｃ感染剂量（１～１０ＭＩＤ５０）和先给药后感染方式，中药Ⅰ号能１００％保护动物不发生活动性ＳＩＶ感染，表现在感染治疗后从血浆分离病毒阴性，无可检出的抗体，ＰＣＲ检测ＰＢＭＣＳＩＶｍａｃＤＮＡ阴性，但巢式—ＰＣＲ检测２／３猴阳性。对照组３／４猴建立了真正感染，病毒分离阳性，抗体上升。中ＳＩＶｍａｃ感染剂量（１０～１００ＭＩＤ５０和先感染后给药方式，中药Ⅰ号未能抑制感染后２周的血浆病毒水平，但与对照组比较明显降低感染２周后的血浆病毒水平。表明中药Ⅰ号有抗猴体内病毒的作用。本模型亦可应用于中药方剂猴体内抗病毒的效果评价。