miR-29b介导的TGF-β/Smad信号通路对大鼠肝纤维化进程的影响

目的:初步研究微小RNA-29b(mi R-29b)介导的TGF-β/Smad信号通路在肝星状细胞(HSC)活化中的作用及其对大鼠肝纤维化进程的影响。方法:构建肝纤维化大鼠模型并分离其HSC,同时通过体外获取并鉴定正常大鼠HSC。运用RT-qPCR和Western blot检测以上获取细胞中mi R-29b、TGF-β/Smad信号通路相关蛋白和肝纤维化标志蛋白的变化水平,并通过双萤光素酶报告基因检测系统鉴定mi R-29b对TGF-β1的直接靶向结合情况。结果:随着HSC活化加深,mi R-29b的表达量逐渐减少(P 0. 01),而HSC活性标志物I型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的表达量逐渐增加(P 0. 01)。在TGF-β/Smad信号通路中,Smad2/3/4的表达显著增加,而Smad7的表达明显下降(P 0. 01)。双萤光素酶报告基因检测结果显示,mi R-29b可直接结合于TGF-β1 3’UTR的"UCUCUCCGU"序列,表明TGF-β1为mi R-29b的一个下游靶基因。结论:mi R-29b可参与抑制HSC的活化和迁移,进而抑制肝纤维化进程,而其生物学功能可能是通过直接靶向抑制TGF-β1进而调控TGF-β/Smad信号通路实现的。     

抗兔μ链和抗兔γ链血清的制备及初步应用

用常规生化方法提取正常兔血清中的IgM,用吸附法制备抗兔μ链血清。免疫电泳证明所制备的抗兔μ链血清与兔全血清仅有一条沉淀线,与兔IgG、IgA没有交叉反应。与抗兔μ链结合的兔血清成份有抗体活性,对2-巯基乙醇敏感;分子排阻层析证明,分子量与入骨髓瘤IgM相同。同时制备了抗兔Υ链血清。应用这二种血清检测经福氏2a志贺氏免疫兔的血清抗体证明它们分别对IgM、IgG有特异性,可用于观察免疫后特异IgM、lgG抗体产生的动态规律。     

伤寒减毒活疫苗Ty21a免疫前后小鼠肠细胞差异表达的基因

以基因表达谱芯片对Ty2 1a免疫前后小鼠肠细胞 (包括肠粘膜上皮细胞和肠上皮间淋巴细胞 )基因表达的差异性进行研究比较。将 490条经抑制消减杂交法筛选出的与小鼠Ty2 1a免疫相关的cDNA制备成表达谱芯片 ;利用免疫前后小鼠肠细胞的mRNA通过逆转录方法 ,将Cy3和Cy5两种荧光分别标记到两种组织的cDNA上 ,制备成cDNA探针 ,并与表达谱芯片进行杂交及扫描 ,单点重复 2次实验 ,通过计算机数据处理判定基因是否在上述两种细胞群中有表达差异。筛选出差异表达基因共 98条 ,其中 92条为表达上调基因 ,6条为表达降低基因。提示 ,基因表达谱芯片技术是高通量进行基因表达模式研究的方法 ,可同时定量研究大量的基因表达水平 ,从而鉴定可能参与免疫的基因。     

聚乙二醇干扰素α-2a治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的疗效和安全性

目的 探讨聚乙二醇α-2a干扰素（PEG INFα-2a）治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的疗效和安全性。方法 按随机对照原则选择80例HBV DNA、HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者，按1：1随机分配进入PEG INFa-2a组和IFNα-2a组。结果 治疗6个月时，PEG INFα-2a组HBeAg血清转换率（45．7％）高于IFNα-2a组（35．1％），但P〉0．05。停药6个月后，持续的HBeAg血清转换率分别为48．6％和37．8％，P〉0．05。停药6个月后，持续的HBVDNA阴转率分别为62．9％和45．9％，P〉0．05。治疗后，两组的丙氨酸转氨酶（ALT）复常率差异无显著性，为62．9％和45．9％，停药后6个月，两组的联合应答率分别为57．1％和40．5％。PEG INFα-2a组有3例患者HBsAg阴转，而IFNα-2a组仅有1例患者HBsAg阴转。两组有相似的不良反应，不良反应间差异无统计学意义，两组治疗过程中均未发生重要的不良事件。结论PEG INFα-2a治疗HBeAg阳性的慢性乙型肝炎疗效优于普通干扰素IFN-2a，耐受性和安全性好。     

阴道镜下高频电灼术联合α-2a干扰素凝膏治疗尖锐湿疣疗效分析

目的探讨阴道镜下高频电灼术联合重组人干扰素α-2a治疗尖锐湿疣（CA）的效果。方法将165例CA分为3组，A组应用阴道镜下高频电灼术联合重组人干扰素α-2a；B组单纯采用阴道镜下高频电灼治疗；C组应用NS-FII型多功能光谱治疗仪联合肌注重组人干扰素α-2a。结果治疗后3-6个月A、B、C组复发率分别为0％、4．4％、65．4％：半年后人乳头瘤病毒（HPV）转阴率分别为93．5％、85．4％、43．8％，A组明显优于B组，B组明显优于C组，3组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论阴道镜下高频电灼术联合重组人干扰素α-2a治疗CA可明显降低CA复发率和提高HPV转阴率。     

男性CHD患者血清T和LP（a）测定的临床价值

目的：探讨血清睾酮（T）和脂蛋白（a）[Lipoprotein（a）,LP（a）]测定对男性冠心病患者的诊疗价值。方法：对102例疑似冠心病（CHD）的男性患者进行冠状动脉造影检查,根据造影结果分为（CHD）病组和非（CHD）组,分别采用放射免疫分析和免疫透射比浊法进行血清T和LP（a）的测定,并对结果进行分析。结果：男性CHD患者血清T水平明显低于非CHD组（P〈0.01）,而血清LP（a）水平则显著高于非CHD组,两者之间呈负相关。结论：检测血清T和LP（a）对男性CHD患者的辅助诊断、疗效观察和预后判断具有重要价值。     

载脂蛋白(a)5'调控区(TTTTA)n基因多态性与冠心病及其血清脂质的关系

目的:研究载脂蛋白(a)五核苷酸重复序列(PNR)基因多态性在湖北地区汉族人群冠心病(CHD)患者中的分布特点,进一步探讨其与血脂水平的关系。方法:采用聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析了153例健康人及88例冠心病患者的apo(a)PNR基因型,并测定其血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、ApoAⅠ、ApoB及脂蛋白(a)的浓度进行分析。结果:CHD患者LP(a)、TC、TG、LDL-C水平明显高于对照组,HDL-C水平明显低于对照组(P<0.01);ApoAⅠ、ApoB两组间无显著差异;CHD组apo(a)PNR(TTTTA)_5/8基因型频率(0.181)和(TTTTA)₅等位基因频率(0.107)分别显著高于对照组(P＜0.05);(TTTTA)_5/8基因型者血清LP(a)水平高于(TTTTA)_8/8、(TTTTA)_8/9基因型者。结论:apo(a)PNR(TTTTA)₅等位基因可能是湖北地区汉族人群冠心病的危险因子之一。     

微小RNA-23b-3p通过靶向TGFBR3促进人心房肌成纤维细胞纤维化相关基因表达

目的:探究微小RNA-23b-3p(mi R-23b-3p)对人心房肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达的作用及其可能作用靶基因。方法:分离并体外培养房颤患者心耳中原代心房肌成纤维细胞,并用细胞免疫荧光染色实验鉴定;双萤光素酶报告基因实验检测mi R-23b-3p与潜在靶基因转化生长因子β受体3(TGFBR3) 3'端非翻译区(3'-UTR)的结合作用; CCK-8、Ed U染色及Transwell实验检测细胞活力、增殖及迁移能力,RT-qPCR和Western blot法检测TGFBR3及纤维化相关基因的m RNA和蛋白表达。结果:在人心房肌成纤维细胞中过表达mi R-23b-3p不影响细胞的活力、增殖及迁移能力,但可显著增强细胞中纤维化相关基因COL1A1、COL3A1和ACTA2的表达(P 0. 05或P 0. 01)。双萤光素酶报告基因实验显示mi R-23b-3p与TGFBR3 3'-UTR有结合作用。RT-qPCR和Western blot结果证实mi R-23b-3p可在转录水平抑制TGFBR3表达。过表达mi R-23b-3p和沉默TGFBR3均能显著促进人心房肌成纤维细胞中Smad3激活和纤维化相关基因表达(P 0. 05或P 0. 01)。结论:TGFBR3是mi R-23b-3p的作用靶基因,并介导mi R-23b-3p促进心房肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达。     

C5a在介导肺泡上皮细胞凋亡以及在ALI中所扮演的角色

心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭被定义为急性肺损伤 /急性呼吸窘迫综合征(acutelunginjury/acuterespiratorydistresssyndrome, ALI/ARDS), 主要的病因有脓毒症、多发性创伤、误吸和休克等。ALI和ARDS具有性质相同但程度不同的病理生理改变, 严重的ALI被定义为ARDS。在对ARDS早期死亡病人的形态学研究中, 观察到Ⅰ型肺泡上皮细胞 (AE1 )存在凋亡现象。后继的研究中, 在内毒素 (LPS)诱导的小鼠ALI模型, 注射caspase抑制剂可以明显减少凋亡的AEC细胞, 并可显著降低小鼠死亡率 [1]。在小…     

人脑颞叶组织中类固醇5a－还原酶同功酶活性分布研究

本文采用酶放射分析法对新鲜人脑颞叶组织中５ａ－还原酶同功酶的活性分布进行研究。结果显示：（１）在颞叶脑组织中，５ａ－还原酶１和５ａ－还原酶２主要分布在灰质，其酶活性（５ａ－还原酶１，３３．６±４．５ｐｍｏｌ·ｈ_（－１）／ｍｇ蛋白，ｎ＝１２；５ａ－还原酶２，１３．８±２．９ｐｍｏｌ·ｈ_（－１）／ｍｇ蛋白，ｎ＝１１）明显高于分布在白质中的酶活性（５ａ－还原酶１，１４．７±２．０ｐｍｏｌ·ｈ_（－１）／ｍｇ蛋白，ｎ＝１２，Ｐ＜０．００１；５ａ－还原酶２，５．２±０．９ｐｍｏｌ·ｈ_（－１）／ｍｇ蛋白，ｎ＝１１，Ｐ＜０，０１）；（２）在灰质中，５ａ－还原酶活性主要来自于５ａ－还原酶１，其酶活性（３４．９±２．５ｐｍｏｌ·ｈ_（－１）／ｍｇ蛋白，ｎ＝３２）明显高于５ａ－还原酶２（１５．０±２．３ｐｍｏｌ·ｒ_（－１）／ｍｇ蛋白，ｎ＝１８，（Ｐ＜０．００１）；（３）５ａ－还原酶１和５ａ－还原酶２的活性在男女性之间差异不显著，且与年龄无相关关系。