基于N-乙酰转移酶研究槲皮素对大鼠体内异烟肼代谢的影响

目的 基于N-乙酰转移酶(NAT)的表达及活性检测,研究槲皮素对大鼠体内异烟肼(INH)代谢及药动学特征影响.方法 雄性Wistar大鼠单独灌胃给予INH(60 mg/kg)或槲皮素(50 mg/kg)联合INH(60 mg/kg).分别于给药后不同时间收集血清,应用液质联用技术测定血清中INH及其代谢物乙酰异烟肼(A...     

HPLC法测定异烟肼注射液含量

目的 建立用HPLC法测定异烟肼注射液含量的方法 .方法 HPLC法,采用Hypersil BDS C18柱,以乙腈-0.075 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(体积比5:95)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,检测波长262 nm.结果 异烟肼在9.90～99.00 μg·mL-1浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率100.3%(RSD=1.0%).结论 本法操作简便,快速准确,重复性好,可作为本品质量控制方法 .     

异烟肼耐药与结核分支杆菌katG基因突变的研究

探讨异烟肼耐药结核分支杆菌ｋａｔＧ基因突变的关系。     

抗结核药物肝毒性反应的危险因素及其影响

背景:肝毒性反应是抗结核药物(下简称ATD)最严重的不良反应之一。虽然已有许多关于肝毒性反应危险因素的报道,但关于肝毒性反应严重程度的影响尚无系统研究。目的:评估肝毒性反应的危险因素(包括高龄、慢性肝病、酗酒或滥用药物或营养不良)对ATD所致肝毒性反应严重性的影响。设计:对1998年1月至2002年7月期间在结核科门诊接受异烟肼、利福平、吡嗪酰胺治疗的471例活动性结核病人进行前瞻性队列分析。根据ATD所致肝毒性反应危险因素的暴露情况评价肝毒性反应的发生率及其严重性。结果:危险因素暴露组ATD所致肝毒性反应(血清转氨酶>3倍的正常上限值)的发生率为18.2%(42/231例),而对照组为5.8%(14/240例),(OR=3.5;95%CI:1.9-6.7;P<0.001)。暴露组的严重肝毒性反应(血清转氨酶>10倍的正常上限值)发生率为6.9%(16/231),而对照组为0.4%(1/240)(OR=17.7;95%CI:2.3-135;P<0.001)。结论:肝毒性反应危险因素暴露组病人的ATD所致肝炎显著多见且较为严重。     

DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用

目的 探讨DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用.方法 采用抗酸杆菌涂片法、罗氏培养法、比例法药敏试验及DNA微阵列芯片法对海南地区的2069例疑似结核病患者痰标本进行检测,并对结核分枝杆菌检出率、耐药性及耐药基因突变特征进行分析.结果 DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌检出率为明显高于罗氏培养法和...     

难治性结核性胸腔积液中异烟肼浓度的检测和对比

目的检测难治性包裹性结核性胸腔积液中异烟肼的药物浓度。方法对口服异烟肼、异烟肼直接注入包裹性胸腔积液中,检测胸腔积液和血液中异烟肼的浓度。结果口服异烟肼后包裹性胸腔积液中异烟肼的浓度(0.29±0.34)远低于血液中异烟肼的浓度(3.04±1.75);异烟肼直接注入包裹性胸腔积液中异烟肼的浓度(1.62±0.95)远高于血液中异烟肼的浓度(0.25±0.17),以后随注药次数增加,胸腔积液内异烟肼浓度越来越高(3.97±0.94,8.11±2.4),血液中异烟肼浓度无显著增加(0.21±0.26,0.32±0.14)。结论异烟肼直接注入包裹性胸腔积液能明显提高胸腔积液内的药物浓度,是治疗难治性结核性胸腔积液的有效手段。     

应用寡核苷酸探针膜杂交方法快速检测耐异烟肼结核分支杆菌基因型

目的应用寡核苷酸探针膜反向斑点杂交技术快速检测结核分支杆菌对异烟肼(isoniazid,INH)耐药性.方法设计与合成用于检测结核分支杆菌耐INH基因katG、inhA的寡核苷酸探针,点于硝酸纤维素膜上,与结核分支杆菌临床分离株生物素标记的聚合酶链反应(PCR)产物进行反向斑点杂交,并与PCR-单链构象多态性(Polymerase chain reaction-Single stranded conformation polymorphism,PCR-SSCP)和PCR-直接测序(PCR-direct sequencing,PCR-DS)结果比较.结果 20株INH敏感株中,仅9株出现野生型探针K1阳性杂交,余11株中,10株K1b'杂交阳性,PCR-DS显示katG基因315位密码子AGC→ACC,1株K1c'杂交阳性,PCR-DS显示katG基因315位密码子AGC→AAC;15株出现野生型探针inh1阳性杂交,另5株Inha1探针杂交阳性,PCR-DS显示inhA基因-15位C→T突变.36株耐药株中,17株K1探针杂交阳性,18株K1b'杂交阳性,1株与所试探针不杂交,PCR-DS显示katG基因279位密码子GGC→GAC;11株与突变型Inha1探针阳性杂交,25株与野生型探针inh1杂交阳性.katG基因膜杂交突变检出率为 50 %,inhA基因膜杂交突变检出率为 30.56 %.结论寡核苷酸探针膜杂交技术可能成为检测部分结核分支杆菌耐异烟肼基因型简便、快速的方法.     

对氨基水杨酸异烟肼片治疗结核性渗出性胸膜炎

为总结对氨基水杨酸异烟肼片取代常规抗痨方案2S(E)HRZ/4HR中的异烟肼,治疗结核性渗出性胸膜炎的疗效,把192例患者随机分为治疗组和对照组.治疗组100例,采用方案为2S(E)PaRZ/4PaR;对照组92例,采用常规方案进行抗痨治疗,配合常规抽胸水和激素的使用.结果,疗程结束后,胸水完全吸收治疗组为98%,对照组为83.7%,两组比较有显著性差异(P＜0.01);胸膜增厚情况治疗组为10%,对照组为25%,两组比较有显著性差异(P＜0.05);随访12个月的复发情况,治疗组为2%,对照组为5.4%,无显著性差异(P＞0.05);24个月的复发情况,治疗组为2%,对照组为13%,有显著性差异(P＜0.05);表明,对氨基水杨酸异烟肼片治疗结核性渗出性胸膜炎,胸水吸收快,胸膜增厚不明显,远期效果好,毒副反应并未增多,适合临床推广.     

UPLC-MS/MS测定人痰液中异烟肼、吡嗪酰胺和左氧氟沙星的浓度

目的建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时检测痰液中3种药物异烟肼(isoniazid,INH)、左氧氟沙星(levofloxacin,LFX)和吡嗪酰胺(pyrazinamide,PZA)浓度的方法,冒在为实现临床个体化用药提供帮助。方法痰液样品离心后经甲醇/乙腈蛋白沉淀法预处理后进样液质联用仪进行分析。实验采用的流动相A为含0.1%甲酸的水溶液,流动相B为含0.1%甲酸的乙腈;流速0.35mL·min^-1;采用ACQUITY UPLAC HSS T31.8μm column(2.1mm×100mm,Waters公司)分离;采用电喷零电离源,采用多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式对待测物进行正离子扫描检测。此外,本试验盲态收集5例患者的痰液,用该法进行定量分析。结果测得痰液中INH、PZA和LFX分别在48~6000 ng·mL^-1(r=0.9988)、480~60000 ng·mL^-1(r=0.9993)、120~15000 ng·mL^-1(r=0.9995)内表现出良好的线性关系。INH、PZA和LFX 3种药物的日内和日间精密度均低于15%,且3种药物的提取回收率均处于97.21%~107.80%之间。7例受试者体内均检测到药物INH,质量浓度分别为44.74、120.1、301.5、481、595.5、1220及1570 ng·mL^-1;PZA的质量浓度分别为104.2、6273.34和3185 ng·mL^-1;1例受试者检出LFX,质量浓度为199.86 ng·mL^-1。结论本试验建立了痰液中INH、PZA及LFX的检测方法,具有灵敏度高、测定结果准确、快速等诸多优点,可以应用于临床治疗药物的监测。     

耐异烟肼结核分枝杆菌临床分离株耐药相关基因突变研究

目的阐明结核分枝杆菌耐异烟肼临床分离株katG、inhA、ahpC、kasA及oxyR基因突变特点。方法对144株结核分枝杆菌临床分离株(耐异烟肼菌株101株;异烟肼敏感株43株)的katG、inhA、kasA、ahpC及oxyR基因进行DNA片断扩增及DNA序列分析,与GeneBank中结核分枝杆菌标准序列进行比较。结果(1)耐异烟肼菌株中未发现katG完全缺失,81株耐药株(80.2%)katG存在点突变、缺失或插入,其中16个突变位点未见报道;39株(38.6%)耐药株第315位点突变,低耐药菌株(1μg/ml)第315位点突变率显著高于高耐药菌株(10μg/ml;χ2=9.31,P<0.05);58株(57.4%)耐药株第463位点突变。23株(53.3%)敏感株第463位点突变。(2)5株(4.9%)耐药株inhA发生突变。敏感株inhA无突变。(3)3株(2.9%)耐药株ahpC发生突变。敏感株ahpC无突变。(4)17株(16.8%)耐药株kasA发生突变。敏感株中3株菌株Gly312Ser突变。(5)在全部菌株中未发现oxyR基因突变。(6)综合本项研究中各基因的突变情况,共有91株耐异烟肼菌株发生与异烟肼耐药相关的突变。结论本项研究进一步证实了结核分枝杆菌耐异烟肼与katG、inhA、ahpC及kasA基因突变之间的关系,并且提示还有其他机制参与异烟肼耐药。