负载重组人骨形态发生蛋白-2壳聚糖纳米微球的制备及异位成骨活性研究

目的 制备负载重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的壳聚糖纳米微球,并考察其成骨活性. 方法 应用离子交联法制备空白壳聚糖纳米微球和rhBMP-2壳聚糖纳米微球,应用透射电镜观察微球的形态,激光粒径分析仪测定其粒径的分布,检测其载药量、包封率及累积释药率.取24只SD大鼠,随机分为4组,每组6只.以无菌手术分别在大鼠左侧股部建立肌袋.A组大鼠肌袋内植入rhBMP-2壳聚糖纳米微球(含rhBMP-2 1 mg),B组大鼠肌袋内植入rhBMP-2 1 mg,C组大鼠肌袋内植入空白壳聚糖纳米微球,D组大鼠肌袋内不做任何处理.评估rhBMP-2壳聚糖纳米微球的成骨活性.结果离子交联法制备的壳聚糖纳米微球球形规整、分散均匀,微球平均粒径为230.0 nm,分布较集中,包封率为66.87％±4.58％,载药率为(33.44±2.29) μg/mg.A、B、C、D组的ALP活性平均分别为(1.94±0 35)、(1.48±0.56)、(0.20±0.07)及(0.18±0.06) kat/g,差异有统计学意义(F=42.959,P=0.000),A、B组明显高于C、D组,且A组高于B组.4组钙含量平均分别为(5.20±1.42)、(3.80±1.40)、(0.19±0.08)、(0.20±0.08)μg/mg,差异有统计学意义(F=39.242,P=0.000),A、B组明 显高于C、D组,且A组高于B组. 结论 离子交联法可成功制备出均一的rhBMP-2壳聚糖纳米微球,该微球具有良好的载药性能和缓释性能,且其骨诱导活性优于单纯rhBMP-2.     

静电纺丝壳聚糖-明胶复合纤维的制备和体外生物相容性评价

目的采用静电纺丝技术制备壳聚糖-明胶复合纤维,体外评价其生物相容性。方法采用扫描电镜(SEM)观察纤维支架的表面形貌,考察纺丝溶液浓度、黏度以及壳聚糖/明胶质量比对纤维直径和结构的影响。将人成纤维细胞接种在纤维支架表面,绘制细胞生长曲线,观察细胞在支架表面的形态。结果通过静电纺丝技术,制备的壳聚糖-明胶复合纤维均匀、光滑,无珠状结构,纤维平均直径为600 nm～1.6μm。随着纺丝溶液浓度和黏度增加,纤维平均直径增大;随着壳聚糖/明胶质量比增加,纤维直径也随之增大。成纤维细胞在复合纤维支架上生长良好,增殖快,并且保持较好的成纤维细胞形态。结论通过静电纺丝技术制备的壳聚糖-明胶复合纤维具有良好的生物相容性,有望作为皮肤组织工程的支架材料。     

壳聚糖宫颈抗菌膜治疗慢性宫颈炎效果观察

目的:观察壳聚糖宫颈抗菌膜治疗慢性宫颈炎的效果。方法:选取88例慢性宫颈炎患者为研究对象,按照随机数字表法将观察对象分为对照组与观察组各44例。对照组患者采取单纯的抗生素治疗,观察组患者在对照组基础上联合壳聚糖宫颈抗菌膜治疗。比较两组患者治疗前后的临床症状、临床疗效、不良反应发生率及复发率。结果:治疗后,观察组清洁度为I度人数占比为70.45%,显著高于对照组的40.91%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组的治疗总有效率为93.18%,高于对照组的72.73%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组的不良反应发生率为4.55%,与对照组的11.36%比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组复发率为4.55%,低于对照组的25.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:壳聚糖宫颈抗菌膜治疗慢性宫颈炎的临床效果显著,优于单纯抗生素治疗,能提高临床疗效,改善临床症状,降低复发率,且安全性较好。     

南方红豆杉水提物通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控HER2阳性胃癌移植瘤生长实验研究

目的：初步探讨南方红豆杉水提物抑制磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide-3 kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,PKB,又称AKT） /雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路上相关靶点蛋白调控裸鼠人类表皮生长因子受体2（HER2）阳性胃癌移植瘤生长及其机制。方法：建立荷瘤裸鼠模型,将80只BALB/c裸鼠接种人HER2阳性胃癌NCI-N87细胞株并随机分组给药及取瘤,采用Western blot法检测PI3K、pAKT、mTOR蛋白表达情况,实时荧光定量PCR法检测PI3K、AKT1、mTOR mRNA表达水平。结果 ：Western blot法检测PI3K、pAKT、mTOR蛋白,红豆杉中、低剂量组下调PI3K蛋白表达更显著[（0.9123±0.0480、1.1440±0.1663）比1.4160±0.0730,P<0.01],红豆杉各剂量联合赫赛汀后明显下调pAKT蛋白表达（P<0.05）,红豆杉组均明显下调mTOR蛋白表达（P<0.01）,联合赫赛汀后下调更显著。2、实时荧光定量PCR法检测PI3K、AKT1、mTOR mRNA,红豆杉低剂量组PI3K mRNA表达降低[（0.6906±0.0710）比（0.9018±0.0696）,P<0.05],红豆杉各剂量组联合赫赛汀后明显下调AKT1 mRNA表达,红豆杉中、低剂量组mTOR mRNA表达显著降低[（0.8183±0.0664、0.7917±0.0699）比（1.0004±0.1182）,P<0.05）]。结论：南方红豆杉水提物可部分下调PI3K、pAKT、mTOR蛋白及PI3K、AKT1、mTOR mRNA表达水平,联合赫赛汀可增强其抑制作用。     

冠状病毒肺炎细胞因子风暴及免疫调控治疗

细胞因子风暴是一种失控的过度免疫应答,是冠状病毒肺炎的重要发病机制。病毒劫持机体的免疫系统,导致免疫调节的负反馈丧失、多种细胞因子异常升高,损害了肺泡弥散功能并造成多器官功能障碍。靶向冠状病毒细胞因子风暴的特异性治疗研究,如粒细胞集落刺激因子、托珠单抗、卡莫他特、血液净化治疗等已取得系列成果,其可能是缓解新型冠状病毒肺炎（COVID-19）疫情的有效手段。但COVID-19具有独特的病理特征,上述治疗的研究成果仍需进一步临床试验来验证。本文就冠状病毒肺炎细胞因子风暴及免疫调控治疗进展进行综述。     

载芦荟大黄素新型纳米微球体外抗胰腺癌细胞的实验研究

目的探讨新型的靶向性表皮生长因子受体(EGFR)壳聚糖芦荟大黄素纳米微球对人胰腺癌细胞SW1990细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)观察抗EGFR芦荟大黄素包埋的壳聚糖纳米微球在不同作用时间内对在体外培养的SW1990细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果芦荟大黄素能对胰腺癌细胞SW1990的增殖起到抑制作用(P0.05),抗EGFR芦荟大黄素包埋的壳聚糖纳米微球可明显增强芦荟大黄素对人胰腺癌细胞SW1990生长的抑制作用(P0.05),使细胞凋亡率升高达(40.56±1.24)%(P0.05),在G0/G1期阻滞细胞增殖(P0.05)。结论抗EGFR芦荟大黄素包埋的壳聚糖纳米微球对胰腺癌SW1990细胞增殖的抑制作用显著,可能为将来中药对胰腺癌的靶向性治疗提供新的研究方向。     

贝伐珠单抗联合化疗治疗转移性结直肠癌的疗效及对患者血清VEGF、MMP-9及COX-2表达的影响

目的探讨贝伐珠单抗联合化疗治疗转移性结直肠癌的疗效及对患者血清VEGF、MMP-9及COX-2表达的影响。方法选取我院自2014年1月～2016年1月收治的84例转移性结直肠癌患者作为观察对象,按照随机数字表法分为对照组与研究组,各42例。两组均行化疗治疗,研究组加用贝伐珠单抗治疗,对比两组近期疗效、血清VEGF、MMP-9及COX-2表达水平、毒副反应发生率。结果研究组治疗总有效率为52.38%,高于对照组的30.95%(P0.05);治疗后,研究组血清VEGF、MMP-9、COX-2水平均低于对照组(P0.05);两组化疗相关毒副反应发生率差异不明显(P0.05)。结论贝伐珠单抗联合化疗治疗转移性结直肠癌可提高疗效,抑制肿瘤进展,降低VEGF、MMP-9、COX-2水平。     

壳聚糖-明胶-果胶仿生网络膜对间充质干细胞增殖和矿化的影响

目的：探讨采用壳聚糖、明胶和果胶制备的仿生网络膜对间充质干细胞（MSCs）增殖和矿化的影响,评价其用于构建组织工程骨的可行性。方法：采用仿生学方法,将壳聚糖、明胶和果胶按照一定比例制作成新型仿生网络膜。实验分为对照组（MSCs+常规培养基）、材料组（MSCs+网络膜+常规培养基）和材料+成骨诱导培养基（OS）组（MSCs+网络膜+OS培养基）。倒置相差显微镜下观察细胞形态表现,扫描电镜（SEM）观察细胞生长及细胞外基质分泌情况,MTT法检测细胞增殖情况（MSCs分为阴性对照组和材料组,分别以空白培养液和含材料的培养液培养）,茜素红染色检测细胞中钙无机物表达情况,实时聚合酶链反应（Real time-PCR）测定细胞中骨钙素（OC） mRNA和骨桥蛋白（OPN） mRNA表达水平。结果：网络膜材料呈半透明薄膜状,倒置相差显微镜下MSCs为短梭形,细胞成簇状聚集生长。SEM下观察,细胞培养第7天可见梭形细胞;培养第14天时细胞数量增多,以伪足状突起锚定于材料表面;培养第21天时,细胞聚集并分泌大量细胞外基质。材料组细胞增殖水平与阴性对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。茜素红染色,网络膜上细胞被染成橘红色。Real time-PCR法,材料组和材料+OS组MSCs中OC mRNA在接种后第7和14天时表达水平较低,第21天时其表达水平明显升高,达到峰值;OPN mRNA在第7天明显表达,第14天时表达水平达峰值,第21天略有下降;与对照组比较,不同时间点材料组和材料+OS组细胞中OC mRNA和OPN mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,而材料组与材料+OS组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：壳聚糖-明胶-果胶仿生网络膜具有良好的生物相容性,MSC在其表面可正常生长和增殖,在不加诱导剂的情况下可以诱导MSCs表达矿化相关的基因和蛋白。     

化疗联合曲妥珠单抗治疗HER-2阳性早期乳腺癌患者的疗效及免疫功能分析

目的 分析HER-2 阳性早期乳腺癌患者采取化疗联合曲妥珠单抗治疗的疗效,评价对于免疫功能的影响.方法 筛选我院收治的126例HER-2 阳性早期乳腺癌患者作为研究主体实施分析,采取随机数字表法均分为试验组和对照组,各63例.对照组接受化疗治疗,试验组接受化疗联合曲妥珠单抗治疗,对比治疗效果.结果 相比较对照组治疗情况...