高脂血症血瘀证患者血浆可溶性CD40配体水平及其临床意义

目的 观察高脂血症血瘀证患者体内血浆可溶性CD40配体（sCD40L）水平的变化及其与血瘀证证候积分、P-选择素、高敏C反应蛋白（hs-CRP）等之间的关系,了解血小板活化状态及炎症在高脂血症血瘀证病理生理过程中的作用,探讨血瘀证的致病机制。     

大鼠lipocalin 11蛋白非保守半胱氨酸双点突变体样品制备及理化性质表征

Lipocalin 11蛋白是新发现的一个lipocalin分泌型蛋白家族成员,与男性生殖密切相关。大鼠lipocalin 11(rLcn11)蛋白中4个半胱氨酸往往不能正确配对,为重组蛋白样品的制备带来困难。该研究通过序列比对和同源模建的方法获得rLcn11蛋白非保守半胱氨酸的位点,构建了rLcn11蛋白野生型与C59A/C156A突变体的表达系统和纯化方法。通过分子筛和圆二色谱分析rLcn11蛋白的聚集形态和结构特征,并用荧光滴定的方法研究了rLcn11蛋白与荧光探针ANS的结合能力。结果表明:(1)rLcn11蛋白非保守半胱氨酸残基的突变有利于减少蛋白的错误折叠和聚集,提高重组蛋白的产量;(2)rLcn11 C59A/C156A突变体的空间结构良好并能结合疏水性配体;(3)rLcn11蛋白Cys59、Cys156双点突变不显著地改变rLcn11蛋白的空间结构及其与配体的结合能力。该工作为rLcn11蛋白的空间结构解析和生理功能的研究奠定了基础。     

干燥综合征患者细胞因子途径、Jak-Stat信号途径以及神经激活受体配体途径相关基因表达的初步分析

目的分析干燥综合征患者的细胞因子途径、Jak—Star信号途径及神经激活受体配体途径相关基因的表达情况并分析意义。方法取3例干燥综合征患者及3例健康对照者的外周血单个核细胞,提取总RNA反转录至cDNA后,分别用Cy5及Cy3荧光标记干燥综合征组及对照组的cDNA样品,与寡核苷酸基因芯片杂交。采用图像分析软件提取芯片图像数据,以CyS／Cy3的比值（SAM软件）寻找差异表达基因,并进一步用分子功能注释软件（MAS系统）进行处理。结果干燥综合征患者细胞因子途径、Jak—Star信号途径及神经激活受体配体作用途径相关基因的差异表达有统计学意义（P〈0．05）。以上途径中基因PF4、GZMA表达下调,基因IL-2RA、IL-10表达上调。结论干燥综合征的发病可能是多基因调控异常所致,细胞因子途径、Jak—Stat信号途径及神经激活受体配体途径的差异表达基因可能为研究该病的发病机制及新的治疗靶向提供了重要依据。     

内毒素刺激对体外培养人牙龈成纤维细胞表达OPG和RANKL的影响

目的:检测内毒素(LPS)刺激后,体外培养人牙龈成纤维细胞(HGFs)表达骨保护素(OPG)和核因子-kB受体活化因子配体(RANKL)的变化,探讨其对牙槽骨吸收的影响.方法:组织块法培养正常HGFs并鉴定来源,以5 μg/ml LPS刺激第4 代细胞,在0、6、12、24、48 h各时间点用免疫细胞化学方法检测OPG...     

Toll样受体激动剂研究进展

Toll样受体(TLRs)在机体防御反应中的重要作用已经被多数人所认识,而通过TLRs激动剂来调节免疫反应以达到预防和治疗疾病的目的,则成为近几年新的研究热点.本文就TLRs激动剂的应用研究进展作一综述.     

Effects of myeloma cell lines on expressions of FAP and APRIL in bone marrow mesenchymal stem cells

目的 研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)与骨髓瘤细胞株共培养对成纤维细胞激活蛋白(FAP)、增殖诱导配体(APRIL)和B细胞激活因子(BAFF)表达的影响.方法 体外分离、培养BMSCs,并鉴定其成骨分化能力.实验分为BMSCs单独培养的阴性对照组(A组)、BMSCs与U266 细胞共培养组(B组)和BMSCs与RPMI8226细胞共培养组(C组).培养7d和12d后,采用RT-PCR方法检测BMSCs中FAP、APRIL和BAFF mRNA表达水平的变化.结果 三组BMSCs 形态相似,均具有成骨分化能力.与A组相比,B、C组培养7d后,APRIL、FAP mRNA表达降低(P＜0.05),而7d和12d后的BAFF mRNA表达无统计学差异(P＞0.05).结论 BMSCs与骨髓瘤细胞株U265或RPMI8226共培养后,改变FAP和APRIL表达,从而参与骨髓瘤的病理过程.     

GITRL在内毒素诱导的Kupffer细胞凋亡中的作用研究

目的:探讨糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子相关蛋白配体(GITRL)在脂多糖(LPS)诱导的Kupffer细胞(KCs)凋亡中的作用。方法:分离BALB/c小鼠的KCs,转染对照siR-NA或者GITRL siRNA 24 h后,分四组培养,分别为对照(Control)组:仅加入培养液;地塞米松(Dex)组:加入Dex10μmol/L;LPS组:加入LPS 1 mg/L;LPS+Dex组:加入LPS 1 mg/L和Dex 10μmol/L。24 h后用免疫细胞化学法检测GITRL蛋白的表达,应用Annexin V/PI双染标记和流式细胞术检测KCs的凋亡率。结果:LPS刺激增加了KCs GITRL的表达(P<0.05),然而地塞米松处理降低了LPS诱导的GITRL表达。LPS刺激诱导了KCs的凋亡,但是沉默GITRL基因或者地塞米松处理抑制了LPS诱导的凋亡(P<0.05)。结论:LPS可以诱导小鼠KCs的凋亡,其作用可能依赖于GITRL信号的转导。     

CXCL16基因多态性与C反应蛋白的相关性研究

目的探讨健康人群趋化因子CXC配体16(CXCL16)基因多态性与血清CXCL16、C反应蛋白(CRP)水平的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测204名健康体检者CXCL16基因A181V多态性,同时分别应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫比浊法检测血清CXCL16和高敏CRP(hs-CRP)水平,并进行统计学分析。结果 AA基因型血清hs-CRP水平明显高于GG、GA基因型(P=0.01);多元线性回归显示A等位基因是高hs-CRP水平的独立危险因素(OR=1.25,95%CI:1.08~2.59,P=0.021);以血清hs-CRP水平中位数(0.91 mg/L)为界定值分为2组,AA基因型和A等位基因频率在hs-CRP>0.91 mg/L组中显著升高(P=0.008,0.036);而血清CXCL16水平与其基因型间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CXCL16基因A181V位点基因多态性与血清hs-CRP水平相关,A等位基因可能参与机体炎症反应的发生、发展。