Apelin-13在改善自体动静脉内瘘血管狭窄中的机制

目的探讨内源性配体13(Apelin-13)在改善自体动静脉内瘘血管狭窄中的机制。方法将该院收治的30例自体动静脉内瘘血管狭窄患者纳入观察组,30例自体动静脉内瘘非血管狭窄患者纳入对照组,检测所有研究对象血清中Apelin-13、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、一氧化氮(NO)水平。在细胞水平,采用Apelin-13干扰序列(shApelin组)和无义序列(Scramb组)转染人脐静脉内皮细胞(HUVECS);采用AngⅡ、Apelin-13刺激HUVECS,并通过免疫印迹试验检测细胞中磷酸化内皮型一氧化氮合酶(peNOS)和非磷酸化内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达情况。同时检测细胞培养上清液中NO水平。结果观察组血清Apelin-13水平明显低于对照组,差异有统计学意义(t=13.23,P0.05);观察组血清中AngⅡ水平高于对照组,差异有统计学意义(t=10.45,P0.05)。观察组NO水平低于对照组,差异有统计学意义(t=9.83,P0.05)。shApelin组的Apelin-13、peNOS表达量低于Scramb组(t=19.82、83.28,P0.05),但两组eNOS表达量差异无统计学意义(t=1.52,P0.05)。shApelin组NO水平明显高于Scramb组,差异有统计学意义(t=10.37,P0.05)。免疫印迹试验结果显示,与未进行AngⅡ刺激的HUVECS对比,AngⅡ刺激后HUVECS的peNOS表达量降低(t=1.02,P0.05),而eNOS表达量差异无统计学意义(t=0.60,P0.05)。未进行AngⅡ刺激的HUVECS与AngⅡ刺激后的HUVECS细胞中NO的水平比较,差异有统计学意义(t=5.58,P0.05);AngⅡ刺激后的HUVECS中peNOS表达量与AngⅡ、Apelin-13同时刺激的HUVECS中peNOS表达量比较,差异有统计学意义(t=16.04,P0.05),但eNOS表达量差异无统计学意义(t=1.71,P0.05)。AngⅡ及Apelin-13同时刺激所培养细胞的上清液中NO水平低于AngⅡ刺激的NO水平(t=5.97,P0.05)。结论 Apelin-13、AngⅡ通过共同刺激和介导peNOS/NO的信号通路发挥调控作用,从而改善血管狭窄情况。     

卵巢浆液性腺癌肿瘤微环境中CD8~+TILs密度及PD-L1的表达与临床意义

目的:研究卵巢浆液性腺癌肿瘤微环境中CD8~+肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)密度及癌细胞程序性死亡配体-1(PD-L1)的表达情况与临床意义。方法:收集2004年7月至2010年12月于上海交通大学医学院附属仁济医院行肿瘤细胞减灭术的116例卵巢浆液性腺癌患者组织标本,免疫组化检测肿瘤组织CD8~+TILs密度及癌细胞PD-L1表达情况;Spearman相关性分析癌细胞PD-L1表达水平与癌巢及间质CD8~+TILs数目的关系;采用乘积极限法进行基于癌巢CD8~+TILs密度及肿瘤细胞PD-L1表达的单因素生存分析。结果:卵巢浆液性腺癌PD-L1高表达的比例为70.69%(82/116)。癌细胞PD-L1表达强度与癌巢内的CD8~+TILs数目呈显著负相关(P=0.024),而与间质内的CD8~+TILs数目无相关性(P=0.117)。癌巢CD8~+TILs高密度组患者的中位生存时间(64月)显著高于低密度组(43月),差异有统计学意义(P0.05);乘积极限法的亚组分析显示肿瘤微环境中癌细胞PD-L1低表达癌巢CD8~+TILs高密度组患者的预后较好。结论:卵巢浆液性腺癌肿瘤微环境中癌巢CD8~+TILs密度及癌细胞PD-L1表达水平与患者预后密切相关,重视肿瘤微环境的免疫分型有助于评估患者预后及筛选合适患者实施抗PD-1/PD-L1免疫治疗。     

曲格列酮对绒癌JEG-3细胞凋亡的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)及配体曲格列酮(TGZ)对绒癌JEG-3细胞系凋亡的作用。方法通过Hoechst 33258染色和透射电镜观察PPARγ激动配体TGZ作用后细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡的改变。结果 Hoechst染色及透射电镜观察到典型的凋亡细胞形态,流式细胞仪检测结果显示,细胞经不同浓度TGZ处理后凋亡率明显增加,与对照比较差异有统计学意义(P<0.05),且呈剂量依赖性关系。结论 PPARγ激动配体TGZ可诱导绒癌JEG-3细胞发生凋亡,为今后进一步研究PPARγ及配体在绒癌治疗中可能的临床应用提供了理论依据和实验基础。     

急性冠状动脉综合征全血CD40L和CD64检测分析

目的 分析急性冠状动脉综合征患者全血CD40L和CD64检测结果.方法 分别应用流式细胞术技术对30例AMI组,30例UAP组及20例健康对照组的全血CD40L和CD64及其T淋巴细胞亚群检测.结果 CD40L,CD64在AMI组,UAP组与健康对照组比较中明显高于健康对照组,而T淋巴细胞亚群变化不显著.AMI组CD40L,CD64明显高于UAP组,而UAP组明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 全血CD40L和CD64量的升高可能与急性冠状动脉综合征的发生有关,可能是动脉粥样硬化斑块不稳定的敏感标志.     

小分子肽对成骨前体细胞MC3T3-E1骨保护素和核转录因子κB受体活化因子配体表达的影响

背景：体内实验显示，小分子肽能明显增加去卵巢大鼠的骨钙含量，使其骨密度增加，能很好地预防骨质疏松。同时体外实验显示，小分子肽能促进小鼠成骨细胞和成骨前体细胞MC3T3-E1增殖、分化、矿化，并且可能是通过抑制核转录因子 p50和p65的表达来起作用。而小分子肽对骨保护素/核转录因子κB受体活化因子配体的影响尚不明确。 目的：观察小分子肽对MC3T3-E1在增殖、分化、矿化过程中骨保护素和RANKL表达的影响。 方法：以体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液为空白对照组，50，100 mg/L质量浓度小分子肽作用小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1，分别于作用3，6，12，18，24，30 d后，收集细胞提取蛋白，Western Blot检测骨保护素和核转录因子κB受体活化因子配体蛋白的表达。 结果与结论：50，100 mg/L小分子肽作用MC3T3-E1后能明显促进作用骨保护素的表达(P < 0.01)，而对核转录因子κB受体活化因子配体无明显影响。小分子肽作用后MC3T3-E1中骨保护素/核转录因子κB受体活化因子配体的比值要明显高于空白对照组(P < 0.01)。因此，认为小分子肽可以通过增加骨保护素的表达来影响骨保护素/核转录因子κB受体活化因子配体系统，间接地抑制破骨细胞的数量和功能。     

罗格列酮通过抑制RANKL及p-ERK活化抑制类风湿关节炎破骨细胞的分化及功能

目的:探讨罗格列酮(RSG)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)介导的破骨细胞(Oc)分化及功能的影响及其可能机制。方法:活动期RA患者滑膜体外分离培养FLS,与健康人外周血单核细胞(MNC)共培养,不同浓度RSG(0、5、10和15μmol/L)干预,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定Oc并计数;甲苯胺蓝染色和图像分析系统计算骨吸收陷窝面积;Real-time PCR检测共培养体系RANKL和OPG的mRNA表达,Western blot检测RANKL、OPG、p-ERK、p-p38和p-JNK的蛋白含量。结果:与不加RSG组比较,15μmol/L RSG干预后Oc的数量明显减少(P0.01),骨吸收陷窝面积也减少(P0.05);共培养体系RANKL的mRNA及蛋白表达明显降低,OPG的mRNA及蛋白表达明显升高(P0.01);p-ERK的蛋白含量明显降低(P0.05),p-p38及p-JNK的蛋白含量则不受影响。结论:RSG通过抑制RANKL及p-ERK活化影响RA关节微环境中组织细胞与免疫细胞的相互作用,从而抑制Oc分化及骨吸收功能。