抗人DR4、DR5单克隆抗体诱导神经胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的：探讨抗死亡受体DR4、DR5单克隆抗体（mAb）FMU1．4、FMU1．5对3株神经胶质瘤细胞株U343（敏感株）、U138（部分敏感株）、U373（耐受株）的杀伤作用及机制。方法：采用流式细胞术、RT—PCR、免疫细胞化学法、MTT比色法、电泳、DNA倍体分析和Westem blot等方法。结果：DR5在U343高表达；DR4在U373低表达。U343对FMU1．5敏感并呈剂量依赖性、对FMU1．4部分敏感；U138对FMU1．5部分敏感，对FMU1．4耐受；U373对两种抗体耐受。结论：FMU1．4、FMU1．5能不同程度地诱导三株细胞凋亡，其机制与DR4、0115、细胞色素C和FLIP的表达有关。     

氧化苦参碱对小鼠急性肝损伤早期肝细胞凋亡的作用

以往研究表明[1 ] ,小鼠腹腔注射脂多糖 (L PS) +D-氨基半乳糖 (Gal N )后肝组织出现严重出血、坏死 ,氧化苦参碱 (oxy-matrine,OM) 5 0 mg/ kg腹腔注射预保护能明显减轻上述病理损害。为了探讨 OM对肝损伤早期肝细胞凋亡的影响 ,本实验从血清学、形态学和免疫组化等方面进行如下研究。1　材料和方法1.1　药品和试剂　 L PS由本校基础医学部微生物学教研室馈赠 ;Gal N购自重庆医科大学化学教研室 ;氧化苦参碱 ,为宁夏制药厂产品 ;纯化抗鼠 TNFα- Ig G EL ISA试剂盒购自深圳晶美生物公司 ;Fas及其配体 (Fas L )免疫组化试剂盒购…     

细胞因子对人脐静脉内皮细胞表达CD40和CD40L的影响

ＣＤ40 ＣＤ40Ｌ是一对互补的跨膜糖蛋白 ,在机体免疫应答中起重要作用 ,近年来的研究表明这一对配体 -受体参与了ＡＳ的发生和发展[1] 。ＡＳ的形成与发展过程中可有多种细胞因子参与和合成多种细胞因子。本文研究细胞因子γ干扰素 (ＩＦＮ γ)、肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ)、白介素 6(ＩＬ 6)和白介素 1(ＩＬ 1)对人脐静脉内皮细胞表达ＣＤ40及ＣＤ40Ｌ的影响 ,以期揭示ＣＤ40 ＣＤ40Ｌ在ＡＳ发生中的作用地位。1　材料和方法1.1　材料　ＩＦＮ γ、ＴＮＦ、ＩＬ 6、ＩＬ 1、ＣＤ40和ＣＤ40Ｌ单抗购自Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ公司 ,鼠ＩｇＧＰＥ…     

HSP70与FasL在子宫内膜异位症中的表达

目的 :探讨热休克蛋白 70 (HSP70 )和Fas配体 (FasL)在子宫内膜异位症(EM)发病中的作用。方法 :采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化物酶染色法 (S P法 )检测子宫内膜异位症 5 6例的异位内膜与在位内膜 (30例 )中HSP70和FasL蛋白的表达 ,并以正常子宫内膜为对照 (2 5例 )。结果 :异位内膜组织中HSP70与FasL均呈高表达 ,与正常内膜组差异有高度显著性 (P <0 .0 1) ,而且二者失去在正常内膜组织中表达的周期性变化。但在卵巢子宫内膜异位症 (OEM)与子宫腺肌症 (AM)的表达差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :异位内膜组织中HSP70和FasL蛋白均过度表达 ,可能在EM的发病中起重要作用     

TRAIL基因原核表达载体的构建、表达与抗体制备

目的:获取抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抗体.方法:利用PCR技术和基因重组技术将TRAIL基因构建于原核表达载体pPreTMH-Tb中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌DH-5α中获得表达,并将TRAIL蛋白免疫家兔,通过Dot blot及Western blot检测抗TRAIL抗体的产生.结果:成功构建TRAIL基因原核表达载体,并在大肠杆菌DH-5α中获得表达,TRAIL蛋白表达量占菌体蛋白质总量的11.8%,Dot blot及Western blot检测证实获得了抗TRAIL抗体.结论:成功制备抗TRAIL抗体,这为TRAIL在真核细胞水平研究奠定了实验基础.     

人类非小细胞肺癌Fas配体基因转录水平的表达及其临床意义

在肿瘤免疫中人们过去认为ＦａｓＬ Ｆａｓ途径是细胞毒Ｔ淋巴细胞 (ｃｙｔｏｔｏｘｉｃＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ,ＣＴＬ)杀伤肿瘤的重要机制之一 ,但最近研究发现人类的某些肿瘤细胞表达Ｆａｓ配体 (ＦａｓＬ)。我们曾报道国人非小细胞肺癌 (ｎｏｎ ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ)细胞表面ＦａｓＬ蛋白特异性表达[1] ,为进一步研究 ,我们用ＲＴ ＰＣＲ方法检测了 32例手术切除的ＮＳＣＬＣ样本中ＦａｓＬ基因在转录水平的表达情况 ,现报告如下。1　材料与方法1.1　材料　标本取自我科及重庆医科大学第一附属医院胸外科…     

转染CD40配体的卵巢癌细胞株OVHM抗卵巢癌肝转移机制的研究

Objective To examine the in vivo anti-metastatic effect of enhanced expression of CD40L cDNA in murinc ovarian cancer OVUM cells (CD4OL-OVHM) injected into the spleen on liver metastasis in mice. Methods OVUM cells were inoculated into the spleen of 6 ～ 8 week-old female B6C3F1 (C57BL/6N × C3H/He) mice. The established liver metastasis was identified by histopathology (HE staining). OVUM cells, DNA-pMKITneo-OVHM cells or CD40L-OVHM cells were inoculated into the spleen of female B6C3F1 mice and the expressions of CD11c in splenic cells were detected by flow cytometry. The specific cytotoxicity of splenic cells was detected by MTT assay, and the serum cytokines of IFN-γ, TNF-α, IL-12, IL4 and IL-10 of the mice were measured by enzyme linked immunoabsorbent assay. The liver metastases and the survival time of the mice were also recorded. Results The mouse models with liver metastasis by injecting tumor cells into the spleen of mice were established. The expression of CD11c and the specific killing rote in CD40L-OVHM cells group was significantly higher than that in the OVHM cells group and DNA-pMKITneo-OVHM cells group. The expressions of IFN-γ, TNF-α and IL-12 in the CD40L-OVHM cells group were much more increased than OVHM cells group and DNA-pMKITneo-OVHM cells group, but the expressions of IL-4 and IL-10 in the CD40L-OVHM cells group were decreased significantly (P < 0.05). The average weights of livers and spleens of mice in CD40L-OVHM cells group were significantly lower than those of DNA-pMKITneo-OVHM cells group and OVHM cells group. The survival time of mice in CD40L-OVHM cells group was also significantly longer than that in the OVHM cells group and DNA-pMKITneo-OVHM cells group (P < 0.05). Conclusion The data directly demonstrate that the expression of CD40L in ovarian cancer cells (CD40L-OVHM) can enhance the proliferation and differentiation of dendritic cells in the spleen and induce specific cytotoxic effect of T cells in the spleen, and may regulate the immune function of peripheral blood cells and the immune balance between Thl cells and Th2 cells, which maybe the possible mechanism induced by CD40L in mice inhibiting the development of liver metastasis.     

神经亲免素配体(NILs)的研究进展

介绍神经亲免素配体在设计、合成、构效关系以及促神经生长和神经保护研究方面的一些进展.     

铁蛋白受体放射配体结合分析法

本文采用差速离心法制备胎盘微绒毛膜，用125I－Hunter试剂联接标记铁蛋白，在国内首次建立了胎盘微绒毛膜铁蛋白受体放射配体分析法，并进行了最适反应条件及铁蛋白受体的特性研究。所标记的125I一铁蛋白放化纯达95％以上，且免疫活性和生物活性均较好。用放射配体受体分析测定了11例正常足月孕妇胎盘微绒毛膜铁蛋白受体数为（3．534土1．105）×1012位点／毫克膜蛋白，亲和力常数Ka为（2．203土0．622）×107mol-1．L。实验条件为：膜蛋白160ug，125I互铁蛋白与游离铁蛋白分离的PEG浓度为12％。对铁蛋白受体特性研究表明：铁蛋白受体与铁蛋白结合具有高度特异性、可饱和性和中度亲和力。