OPG/OCIF与骨代谢研究进展

骨保护素是最近几年发现的重要的生物活性物质，它的发现使骨代谢的研究取得了突破性进展。本文主要阐述骨保护素在骨代谢中的作用、作用机理及临床应用。     

同种异体移植肾组织中CD40/CD40L的表达及其意义

目的：探讨移植肾急性排斥（AR）时CD40及其配体（CD40L）表达的作用及临床意义。方法：采用SP免疫组织化学染色法对10例正常肾，12例无急性排斥（N-AR）及24例AR移植肾组织中CD40，CD40L表达进行观察，并结合肾间质中CD3，CD68细胞数进行分析，结果：AR组肾间质CD3，CD68细胞数较N-AR组和正常肾明显增高，与此相一致的是间质CD40^ ,CD40L^ 细胞数也较N-AR组明显增高，AR肾组织中CD40/CD40L表达分布不同，间质淋巴细胞以表达CD40为主，CD40L表达以肾实质细胞表达为主，结论：CD40/CD40L在AR移植肾组织中的原位表达及其分布特点可能与其参与AR的病理损伤机制有关。     

阿司匹林对2型糖尿病患者血清可溶性CD40配体水平的影响

目的观察2型糖尿病（T2DM）患者血清可溶性CD40配体（sCD40L）水平的变化，以及阿司匹林（ASP）对其水平的影响。方法T2DM患者55例按是否服用阿司匹林（ASP）分为DM不服用ASP（DMwithoutASP）组24例和DM服用ASP组（DMwithASP）31例，设对照组33例。采用ELISA法测定血清sCD40L水平。结果DM-ASP组较对照组的sCD40L水平升高（2．14±0．74VS1．89±1．07，P〉0．05），DM＋ASP组CD40L较DM组下降（1．19±0．76，P〈0．01），较对照组下降（P〈0．01）。结论DM患者血清sCD40L升高；服用ASP可降低DM患者sCD40L水平。     

Toll样受体与信号转导

Toll样受体是一组Ⅰ型跨膜受体 ,通过识别入侵病原微生物的配体 ,激发天然免疫应答 ,启动促炎症细胞因子和共刺激分子的表达。Toll样受体在信号转导中发挥重要作用 ,MyD88是信号转导通路中的关键蛋白。通过对Toll样受体的研究有助于进一步认识宿主的免疫反应。     

肿瘤坏死相关凋亡诱导配体对前列腺癌及膀胱癌细胞增殖、凋亡的作用

目的:研究重组并纯化的肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白对前列腺癌及膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:将不同浓度的TRAIL蛋白与培养的前列腺癌细胞(PC-3细胞)和膀胱癌细胞(5637细胞)共孵育24 h后,采用细胞增殖实验及流式细胞术检测肿瘤细胞的增殖及凋亡。结果:PC-3细胞株中,与未处理组比较,TRAIL蛋白浓度在20、40、80、160 ng·ml-1时细胞增殖率均有显著性差异;而在5637细胞株中,与未处理组比较,TRAIL蛋白浓度在5、10、20、40 ng·ml-1时细胞增殖率均有显著性差异。流式细胞实验结果也证实,随TRAIL蛋白浓度的增高,两种肿瘤细胞凋亡率增加。结论:重组并纯化TRAIL蛋白可通过抑制前列腺癌及膀胱癌细胞的增殖,诱导其凋亡而产生抗肿瘤的作用。     

激素治疗前后ITP患者血清CXCL10与MBL表达水平的变化研究

目的：研究原发免疫性血小板减少症（IT P ）患者血清中CXC趋化因子配体10（CXCL10）、甘露糖结合凝集素（MBL）的表达水平,探讨其在ITP发病中的临床意义。方法采用ELISA定量检测45例ITP患者激素治疗前后和20例健康者（对照组）血清CXCL10、MBL的水平。结果激素治疗前 ITP患者血清CXCL10表达水平明显高于对照组（t＝6．576,P＜0．05）,MBL水平明显低于对照组（t＝4．196,P＜0．05）;治疗后二者与治疗前比较差异有统计学意义（t＝7．399、7．714,P＜0．05）。激素治疗有效组CXCL10的表达水平与对照组比较差异无统计学意义（q＝0．871,P＞0．05）,而无效组的表达水平仍明显高于对照组和有效组（q＝8．933、8．914,P＜0．05）;激素治疗有效组MBL的表达水平与对照组比较差异无统计学意义（q＝0．966,P＞0．05）,而无效组的表达水平仍明显低于对照组和有效组（q＝3．342、2．965,P＜0．05）。结论 ITP患者不同时期血清中CXCL10、MBL的表达水平不同,提示其可能在ITP的发病及治疗过程中发挥一定的作用,有望在ITP的病情监测、预后判断及治疗方案的选择等方面提供依据。     

氯化锂增加获得性耐药人肺癌细胞系H460R对TRAIL的敏感性

目的:通过人工诱导建立肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)获得性耐药的肺癌细胞系,氯化锂联合rhTRAIL作用细胞,以期了解氯化锂增敏TRAIL的现象及机制。方法:通过低剂量rhTRAIL诱导人肺大细胞癌细胞系H460,建立TRAIL耐药细胞株H460R并鉴定,应用MTT和流式细胞术分析氯化锂和rhTRAIL联合给药后亲本株与耐药株细胞增殖和凋亡差异,应用RT-PCR和Western blot检测死亡受体表达。结果:rhTRAIL处理亲本株H460和耐药株H460R后细胞存活率存在显著差异(P<0.01),IC50分别为59.2ng/ml和294.8ng/ml。60ng/ml rhTRAIL处理耐药株及亲本株后平均细胞凋亡比例存在显著差异(10.5%vs 19.4%,P<0.01),耐药株表现出显著的TRAIL耐受现象。但联合20mmol/L氯化锂后,MTT及流式细胞术检测耐药株细胞增殖及凋亡发现H460R对rhTRAIL的敏感性显著增加。进一步研究发现死亡受体DR4和DR5的mRNA及蛋白水平升高,这可能是药物增敏的机制之一。结论:氯化锂能够增加获得性耐药细胞系H460R对TRAIL的敏感性,死亡受体表达增加是可能的增敏机制之一。     

结核分枝杆菌甲硫氨酰tRNA合成酶与底物及其类似物的结合比较

目的 建立重组结核分枝杆菌甲硫氨酰tRNA合成酶(MetRS)的制备方法,分析底物及其类似物与重组蛋白的结合能力。方法 将结核分枝杆菌MetRS(MtMetRS)基因置于不同启动子调控之下。通过表达筛选选择重组蛋白大量制备的条件,使用分子筛制备重组蛋白,并验证其分子量。使用Thermal Shift Assay比较MetRS底物及其类似物与重组结核分枝杆菌MetRS的结合能力。结果 通过不同重组质粒的表达筛选,确定重组蛋白制备方法。Thermal Shift Assay分析提示甲硫基腺苷酸(methionyl-adenylate,MetAde)与焦磷酸同时存在时可以提高重组蛋白的热稳定性。结论 成功制备出具有天然活性的重组MtMetRS蛋白;应以甲硫基腺苷酸和焦磷酸分子结构为方向,设计、筛选结核分枝杆菌MetRS抑制剂。     

系统性红斑狼疮患者外周血白细胞糖皮质激素受体结合量测定的临床意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞糖皮质激素受体(GCR)结合量的变化及其临床意义。方法应用放射配体结合法测定白细胞GCR结合量。结果61例SLE患者应用糖皮质激素(GC)治疗前白细胞GCR结合量为(4156±1408)位点/细胞,显著低于正常对照组(5072±1312)位点/细胞(t=3.506,P=0.01)。3个以上重要器官或系统受损者白细胞GCR结合量显著减低(t=3.262,P=0.002)。SLE患者治疗前白细胞GCR水平与SLE病情活动指数呈负相关(r=-0.487,F=18.372,P=0.001)。白细胞GCR结合量较低的患者应用GC的疗效较差,副反应较多见。结论SLE患者白细胞GCR结合量显著减低,这种变化与SLE患者病情活动性、重要系统器官受损情况以及GC的疗效和副反应等有一定相关性。     

维甲酸、三氧化二砷诱导NB4细胞TRAIL基因表达的研究

目的：研究全反式维甲酸(ATRA)或三氧化二砷(As2O3)诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)NB4细胞肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因的表达及其治疗APL的机制。方法：采用RT—PCR检测TRAIL基因表达的变化。结果：10^-6mol／L的ATRA作用6h或10^-6mol／L的As2O3作用12h，即可诱导TRAIL基因表达。结论：ATRA或As2O3能诱导NB4细胞TRAIL基因表达，TRAIL基因可能以类似“旁分泌”的作用方式杀伤NB4细胞。诱导TRAIL基因介导的细胞凋亡可能是ATRA或As2O3治疗APL的机制之一。