医学数字资源长期保存系统监控策略研究

分析医学数字资源长期保存领域的相关标准和研究现状,归纳医学数字对象变化的影响因素,提出医学数字资源长期保存系统的监控策略,主要包括监控数据摄入过程、存档过程、访问过程及系统运行环境4个方面。     

改良保存液处理自体血对糖尿病小鼠伤口成纤维细胞的影响

目的评价经改良保存液处理的自体血对糖尿病小鼠伤口成纤维细胞的影响,并初步探讨其机制。方法诱导建立糖尿病模型小鼠40只,随机分为献血组和实验组,每组20只。实验组小鼠于伤口模型建立后,剔除死亡小鼠3只,将剩余小鼠随机分为标准组(n=6)、改良组(n=6)和供皮组(n=5),标准组和改良组于术后第1、2和3天分别回输在不同保存液中贮存7 d的自体血,用透明膜示踪法记录并计算伤口愈合面积百分比、RT-qPCR检测伤口组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA表达量。供皮组于伤后3 d收集创面和边缘的全层皮肤,将皮肤成纤维细胞分离培养后,随机分为四组:细胞标准组(S组)和标准+siRNA-HIF-1α组(S+siRNA组)、细胞改良组(M组)、改良+siRNA-HIF-1α组(M+siRNA组),在细胞灌流培养系统中使用不同方法保存的自体血灌注培养。细胞计数KIT-8(CCK-8)、EdU、Transwell、流式细胞仪评价成纤维细胞细胞存活、增殖和迁移能力及其细胞周期分布;Western blot测定各组成纤维细胞中HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白相对含量。结果与标准组比较,改良组小鼠术后伤口愈合面积和HIF-1αmRNA相对表达量明显升高(P<0.05)。与S组比较,M组的细胞存活力增强,增殖细胞及迁移细胞数量明显升高,而S+siRNA组的细胞存活力减弱,增殖细胞及迁移细胞数量明显下降(P<0.05);与M组比较,M+siRNA组细胞存活力、增殖细胞及迁移细胞数量明显降低(P<0.05)。与S组比较,S+siRNA组HIF-1α、VEGF和MMP-2蛋白相对含量明显降低,而M组蛋白相对含量明显增高(P<0.05);与M组比较,M+siRNA组HIF-1α、VEGF和MMP-2蛋白相对含量明显降低(P<0.05)。结论改良处理自体血可增强糖尿病小鼠成纤维细胞的存活、增殖和迁移能力,可能参与伤口的愈合。     

医学数字资源长期保存标准体系研究

针对医学数字资源构建长期保存标准体系,结合研究现状,设计体系框架,为具有长期保存价值的医学数字资源提供保存标准,以期指导后续保存系统应用实践。     

UW液与HTK液灌注保存大鼠离断骨骼肌效果比较

目的 比较UW液与HTK液,挑选出更适合保存离断肢体的灌注液体。 方法 选取健康成年Wistar大鼠(雌性)40只(体质量250～300g),随机分为4组,UW液灌注组、HTK液灌注组、0.9%氯化钠注射液灌注组、不灌注对照组,每组10只,共形成80只离断肢体模型。0.9%氯化钠注射液灌注组、HTK液灌注组、UW液灌注组均以12 ml/h速度自股动脉灌注对应灌注液1 h。所有离断肢体模型自离断后均放置在4℃的冰箱内保存24 h。在离断6 h、12 h、18 h、24 h时取肌肉组织行伊红-苏木素染色、磷钨酸苏木素染色观察骨骼肌病理变化,并用Image-pro plus软件统计HE染色细胞面积比例。 结果 各时间点,3个灌注组较不灌注组骨骼肌组织病理变化轻微,其中UW液组病理变化最轻。细胞面积比例各组间均有统计学差异(P＜ 0.05),各时间点不灌注组的细胞面积比例为43.93%±12.16%(6 h)、38.41%±6.54%(12 h)、35.27%±7.75%(18 h)、36.24%±7.09%(24 h),均为最低,6～12 h 0.9%氯化钠注射液组细胞面积比例最大(6 h为92.54%±3.26%,12 h为59.35%±4.64%),18～24 h UW液组细胞面积比例最大(18 h为51.95%±10.35%,24 h为47.56%±7.04%)。 结论 对大鼠离断肢体进行一次性灌注,24 h内UW液的灌注保存效果最好。     

角膜保存方法现状及进展

角膜内皮细胞(corneal endothelial cell, CEC) 是保证角膜正常生理功能的基础,角膜移植术后患者的视力恢复与角膜内皮细胞的活性有很大关系,保持供体角膜正常的自净状态和角膜内皮细胞的功能状态具有重要的临床意义.国内外目前有多种经典的角膜保存方法,明显延长了角膜保存的时间,提高了供体角膜的质量.本文将就供体角膜的保存方法的现状及其进展进行综述.     

供肝灌洗液中透明质酸含量与肝脏冷保存损伤及术后成活率的关系

目的 :观察冷保存后供肝灌洗液中透明质酸 (Hyaluronic Acid,HA)水平与肝功能及成活率的关系。方法 :行 2 3例猪原位肝移植术 ,供肝植入前 ,用 4℃乳酸林格氏液经门静脉内灌洗肝脏 ,测量灌洗液中的HA含量。同时 ,分别于术后 2小时、2 4小时及 72小时取血测肝功能 (AL T及 L DH ) ,取其中最高值 (即峰值 )。结果 :以 HA值为 40 0μg/ L作为界限 ,把实验猪分为两组 ,结果发现血清 AL T及 L DH峰值在两组间无显著差异 ,而 2 4小时及 2成活率也没有显著差异。结论 :供肝灌液洗中 HA含量与术后早期肝功能和成活率无关。即测量灌洗液中的 HA含量不能预测供肝功能和术后成活情况     

普通冰箱4 ℃短期保存小鼠骨髓单个核细胞的研究

目的：建立小鼠骨髓单个核细胞短期保存简便有效的方法。方法：采用密度梯度离心法获得小鼠骨髓单个核细胞,DMEM培养液为小鼠骨髓单个核细胞冷藏营养液,直接置骨髓单个核细胞于4℃冰箱中保存,分别在当天至60h选择性观察细胞形态,测其细胞回收率、活力及细胞周期。结果：小鼠骨髓单个核细胞置4℃冰箱保存2d,活细胞率达80%以上;细胞回收率达70%以上;细胞周期与对照组相比无明显差别。结论：4℃冰箱能在2d内保存小鼠骨髓单个核细胞,是一种简便易行的短期保存方法。     

HSP90依赖的Akt线粒体转位参与IGF-1对低温保存心脏的保护作用

目的:观察胰岛素样生长因子1(IGF-1)是否可对抗低温保存诱导的心肌损伤,并探讨其可能的机制。方法:观察SD大鼠心脏低温保存9h后,再灌注期左心室发展压(LVDP)和细胞凋亡指数的变化。Westernblotting法检测蛋白激酶B(Akt)蛋白表达。结果:(1)Celsior保存液中加入10nmol/LIGF-1可促进低温保存9h后心脏收缩功能的恢复、减少心肌细胞凋亡的发生、抑制线粒体渗透性转换孔开放。(2)IGF-1可上调心脏Akt蛋白磷酸化水平。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002不仅可降低IGF-1诱导的Akt磷酸化水平,且可逆转IGF-1促进低温保存心脏心功能的恢复和抗凋亡作用。(3)抑制热休克蛋白90(HSP90)可降低IGF-1诱导的Akt磷酸化和线粒体转位,阻断IGF-1的心肌保护作用。结论:IGF-1可明显减少低温保存心脏心肌细胞凋亡的发生,促进再灌注期心功能的恢复,其机制可能与HSP90依赖性Akt的激活和线粒体转位有关。     

不同灌注压和解痉剂对体外灌流兔肾的影响

目的:观察不同灌注压和解痉剂对体外灌流肾脏灌流量的影响,为建立体外灌流保存肾脏模型作技术准备。方法:(1)12只健康成年新西兰白兔肾脏,分为3级,分别在60mmHg、100mmHg、120mmHg3个灌注压下,观察离体肾脏的灌流量;(2)12只健康成年新西兰白兔肾脏,分为3组,分别在生理盐水、654-2、酚妥拉明作用下,用筛选的最佳灌注压(100mmHg)灌流,观察不同解痉药物对肾脏灌流量及肾功能的影响。结果:(1)100mmHg组灌流量保持稳定,灌流8h时,灌流量显著高于60mmHg组及120mmHg组;(2)酚妥拉明组灌流量于灌流1、5、10h显著高于654-2组和对照组,且尿量无明显减少、肾静脉流出液钾浓度上升值和钠浓度下降值无明显变化。结论:(1)兔肾体外灌流,100mmHg的灌注压较为适宜;(2)654-2特别是酚妥拉明可增加灌流量、改善肾功能。     

不同保存液对离体大鼠心脏保存效果的研究

目的:研究在冷缺血期3种液体对鼠心脏保存的效果。方法:将24只大鼠随机分为3组,每组8只。3组离体鼠心脏分别用Histidine-tryptophan-ketoglurate(HTK)液,UniversityofWisconsin(UW)液及St.ThomasⅡ(ST)液灌注停跳,并4℃冷冻保存6h。利用离体鼠心非循环式Langendorff灌流功能测定模型,测定左心室舒张期末压(LVEDP)、左心室发展压(LVDP)、左心室压力变化率(dp/dtmax,dp/dtmin)、冠脉流出量(CF),留取冠脉流出液检测心肌酶漏出量,并检测心肌线粒体三磷酸腺苷(ATP),取心肌标本测干湿比。结果:HTK组保存的心肌左心室功能恢复明显优于UW组(P＜0.05),UW组明显优于ST组(P＜0.05),LVEDP恢复HTK组和ST组无显著差异(P＞0.05),但均较UW组恢复好(P＜0.05)。保存后心肌ATP测定值HTK组高于UW组(P＜0.05),UW组高于ST组(P＜0.05)。3组心肌标本测干湿比结果无显著差异(P＞0.05)。结论:HTK液保存心肌效果最好,含有高钾的保存液对冠脉有损害。