线粒体ATP敏感钾通道对早产鼠高体积分数氧肺损伤的保护作用

目的探讨线粒体ATP敏感钾通道(mitoKATP)在早产鼠高体积分数氧(高氧)肺损伤中的保护作用。方法早产Wistar大鼠72只,随机分为对照组、高氧组和二氮嗪组。二氮嗪组在高氧暴露前30 min,按10 mg·kg-1腹腔注射二氮嗪,其余2组在相同时点腹腔注射等量9 g·L-1盐水,高氧组和二氮嗪组置于950 mL·L-1氧气中,对照组置于同一条件常压空气中。分别于空气或高氧暴露1 d、3 d、7 d时收集肺组织,HE染色观察其肺组织病理形态变化,原位末端标记法检测其肺组织细胞凋亡率,免疫组织化学法检测其肺组织Caspase-9和Omi/HtrA2的表达,激光共聚集显微镜下观察间接免疫荧光双染色Omi/HtrA2的胞内转位。结果与对照组比较,高氧组肺组织受损明显,形态改变,细胞凋亡率明显增加(P<0.01),Caspase-9、Omi/HtrA2表达增多(P<0.01),Omi/HtrA2胞内转位率明显增高(P<0.01)。与高氧组比较,二氮嗪组肺组织受损得到改善,细胞凋亡率减少(P<0.01),Caspase-9、Omi/HtrA2表达显著减少(Pa<0.01),Omi/HtrA2胞内转位率明显减少(P<0.01)。结论二氮嗪可能通过开放mi-toKATP减少Caspase-9和Omi/HtrA2的表达,减少Omi/HtrA2在细胞内的转位,从而减轻早产鼠高氧肺损伤。     

二氮嗪预处理对糖尿病大鼠心肌保护作用减弱机制的初步研究

目的探讨二氮嗪预处理（DPC）对糖尿病大鼠心肌保护作用减弱的机制。方法取糖尿病SD大鼠及非糖尿病SD大鼠48只,建立离体心脏Langendorff灌注模型,各分为4组（每组6只）：对照组（CON组）：全心灌流120 min。缺血再灌注组（I/R组）：在心脏平衡灌流30 min后,缺血30 min再灌注KH液1 h。DPC组：在心脏平衡灌流10 min后,给予含二氮嗪（100μmol/L）的KH液灌注5 min,再复灌不含二氮嗪的KH液5 min后,再给予含二氮嗪的KH液灌注5 min,再复灌不含二氮嗪的KH液5 min,然后缺血30 min,再灌注KH液1 h。二甲基亚砜组（DMSO组）：用DMSO代替二氮嗪,过程同DPC组。比较各组冠脉流出液中肌酸激酶（CK）、心肌组织丙二醛（MDA）、超氧化物岐化酶（SOD）、心肌组织一氧化氮（NO）、环磷酸鸟苷（cGMP）、一氧化氮合酶（NOS）的变化。结果①CK活性：非糖尿病大鼠中,再灌注后DPC组CK活性与I/R组比较明显降低（P〈0.01）,DMSO组与I/R组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;而糖尿病大鼠中,再灌注后DPC组与I/R组比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。②MDA、SOD含量：非糖尿病大鼠中,DPC组MDA含量明显低于I/R组（P〈0.01）、SOD含量明显高于I/R组（P〈0.01）。而在糖尿病大鼠中,DPC组与I/R组比较,MDA和SOD的含量差异无统计学意义（P〉0.05）。③心肌组织NO、cGMP及NOS含量：非糖尿病大鼠中,DPC组NO、cGMP及NOS含量与I/R组比较明显增加（P〈0.01）,DMSO组与I/R组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;而糖尿病大鼠中,DPC组与I/R组、DMSO组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 DPC对糖尿病大鼠心肌的保护作用减弱,其机制可能与糖尿病大鼠心肌NO-cGMP信号通路表达受抑制有关。     

二氮嗪对氧糖剥夺后PC12细胞凋亡及对Bcl-2蛋白的影响

目的探讨二氮嗪对氧糖剥夺(OGD)PC12细胞凋亡的保护作用及其机制。方法体外培养PC12细胞株,以OGD、二氮嗪、5-羟葵酸(5-HD)处理,分为A组(正常对照组),B组(氧糖剥夺组),C组(氧糖剥夺+二氮嗪组),D组(氧糖剥夺+二氮嗪组+5-HD组),采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞分析仪检测凋亡率,应用免疫荧光染色和Western blot检测Bcl-2蛋白表达水平,观察二氮嗪对氧糖剥夺PC12细胞凋亡的保护作用。结果氧糖剥夺后B,C,D组PC12细胞凋亡细胞数增加,C组与B、D组比较差异均有显著性(P<0.01)。B,C,D组Bcl-2蛋白表达增加,C组达到高峰。C组与A、B、D组比较差异均有显著性(P<0.01)。结论二氮嗪能抑制氧糖剥夺PC12细胞凋亡,这一作用机制可能是增加Bcl-2表达来实现其保护作用的。     

高血压病药物治疗新进展

对高血压病的药物治疗进行系统论述。就高血压患者应用降压药物的指征和理想抗高血压药物,抗高血压药物的分类以及目前应用情况以及抗高血压药物的选择进行探讨。对复合制剂尤其是我国多年来广泛应用的小复方制剂进行分析评价,最后在治疗展望中提出了高血压治疗的新概念,即高血压病不单纯是血流动力学的异常,而且是伴有多种物质代谢障碍的综合征。因此治疗不应局限于降低血压,还应兼顾受损靶器官的逆转,其他代谢障碍的纠正,不增加心血管病的危险因子和不降低生活质量。     

二氮嗪两种应用对豚鼠缺血再灌注心肌电生理特性的影响

目的：观察二氮嗪两种应用方式对缺血再灌注豚鼠心室乳头肌细胞电生理特性的影响。方法: 24只豚鼠随机分为对照组、实验组、预先给药组(各组8只)，取离体左室乳头肌标本。对照组37 ℃充氧台氏液平衡灌流80 min后，用4 ℃ St.Thommas液灌流停搏30 min，再行充氧台氏液复灌60 min。实验组除4 ℃ St.Thommas液含二氮嗪(100 μmol/L)外余步骤同对照组。预先给药组仅在平衡灌流60 min后改用二氮嗪(100 μmol/L)灌流10 min，冲洗10 min，余步骤同对照组。分别用玻璃微电极技术记录心室乳头肌细胞电生理特性的改变。结果: ⑴ 再灌注5 min、10 min实验组和预先给药组APD50、APD90均明显短于对照组(P<0.01，P<0.05)，而再灌注30 min又明显长于对照组(P<0.01，P<0.05)。⑵ 实验组和预先给药组再灌注30 min动作电位振幅(APA)、超射值(OS)、0期最大除极速度(Vmax) 恢复早于对照组，且复跳时间明显短于对照组(P<0.05)。⑶ 3组停搏后静息电位没有明显差异，预给药组停搏时间长于对照组(P<0.05)。结论: 含二氮嗪的St．Thomas停搏液对缺血再灌注豚鼠心室乳头肌细胞电生理特性的保护效果强于单纯的二氮嗪预先给药和传统的St．Thomas停搏液。     

二氮嗪恢复缺血预处理对老年大鼠心肌的保护作用

目的 探讨二氮嗪(DZ)对经缺血预适应(IPC)后的老年大鼠缺血再灌注(I/R)心肌的影响及可能机制.方法 取老年和青年Wistar大鼠,建立离体心脏Langendorff灌注模型,分7组(每组8只):青年对照组、青年I/R组、青年IPC组、老年对照组、老年I/R组、老年IPC组、老年DZ组.对照组全心灌流90 min.I/R组心脏灌流30 min后,缺血30 min,再复灌30 min.IPC组灌流10 min,经2次缺血5 min再灌注5 min后,缺血30 min,再复灌30 min.DZ组灌流10 min,给予含DZ(100 μmol/L)的K-H液灌注20 min,余同IPC组.比较各组复灌30 min后心排血量(CO)、左室发展压 (LVDP)、左室内压最大上升和下降速率 (±dp/dtmax) 的恢复率;检测缺血前及复灌30min后冠脉流出液中肌酸激酶 (CK) 活性及一氧化氮(NO)含量和心肌中丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD) 的含量.结果 青年大鼠中,IPC组与I/R组比较,CK生成明显减少,NO含量明显增加,MDA含量明显降低,SOD含量明显增加,CO、LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax恢复率明显增加(P＜0.01).而在老年大鼠中,IPC组与I/R组比较上述指标无明显统计学差异(P＞0.05),DZ组与I/R组比较有明显统计学差异 (P＜0.05或P＜0.01).结论 IPC对老年大鼠I/R心肌保护作用减弱,其机制可能与NO信号通路表达受抑制有关,DZ可恢复IPC对老年大鼠I/R心肌保护作用.     

线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪对大鼠缺血心肌细胞的保护作用

目的评价线粒体ATP敏感性钾通道(mitoKATP)开放剂二氮嗪对缺血损伤的心肌细胞超微结构和死亡率的影响。方法选用Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、心肌细胞损伤模型组(皮下注射异丙肾上腺素5mg/kg)和二氮嗪20mg/kg组。24h后处死动物,观察心肌细胞超微结构的改变。结果异丙肾上腺素皮下注射可以引起心肌细胞超微结构明显受损,预先给予二氮嗪口服可以减轻超微结构的损伤。二氮嗪10～100μmol/L可以降低缺血心肌细胞的死亡率,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论二氮嗪对缺血损伤的心肌细胞具有保护作用。     

参力保与二氮嗪对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的比较参力保与二氮嗪对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法结扎兔冠状动脉左前降支(LAD)30 min,复灌120 min后复制家兔心肌缺血再灌注模型。40只家兔,随机分为5组,假手术组、模型组、参力保组、二氮嗪组、参力保+5-羟葵酸(5-HD)组。测定左室收缩压(LVSP)、左室舒张末期压(LVDEP)、缺血区面积、梗死区面积、血肌钙蛋白I(CTn I)活性。结果参力保与二氮嗪均升高LVSP、降低LVDEP,与模型组和参力保+5-HD组相比,有显著差异(P0.05);参力保与二氮嗪组显著降低血浆CTn I的活性,与模型组和参力保+5-HD组相比有显著差异(P0.01);并降低心肌梗死面积,与模型组和参力保+5-HD组相比有显著差异(P0.05);而参力保组与二氮嗪组上述所有指标比较差异无统计学意义(P0.05),参力保+5-HD组与模型组上述所有指标比较差异无显著性(P0.05)。结论参力保与二氮嗪对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用相似,其保护作用能被线粒体ATP敏感性钾通道阻滞剂5-HD所阻断,其机制可能与开放线粒体ATP敏感钾通道通道有关。     

二氮嗪对氯化锂-匹鲁卡品致痫大鼠海马神经元氧化应激损伤的保护作用

目的探讨线粒体ATP敏感性钾通道(mitoKATP)开放剂二氮嗪(DZ)能否减轻氯化锂-匹鲁卡品致痫大鼠海马神经元的氧化应激损伤。方法随机将成年雄性Wistar大鼠84只,分为对照组、癫痫组(PILO组)、DZ组(DZ组)、DZ+5-羟基癸酸(5-HD)组(DZ+5-HD组),后两组用氯化锂-匹鲁卡品制作癫痫持续状态模型之前,DZ组用DZ 5 mg/kg,DZ+5-HD组先用5-HD 8 mg/kg,再用DZ 5 mg/kg,皆腹腔内注射。观察各组大鼠行为学变化,癫痫发作后48 h,用多聚甲醛灌注取脑,石蜡包埋切片,HE和Nissl染色观察大鼠海马神经元的损伤情况。分别在致痫后24 h、48 h断头取脑,分离海马,检测海马中丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力。提取海马总DNA,检测海马DNA 8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量。结果与对照组比较,PILO组大鼠HE和Nissl染色显示海马CA1区和CA3区神经元损伤和丢失明显,海马中MDA的含量升高,SOD、GSH-Px的活力下降,海马DNA 8-OHdG的含量升高(P均<0.05);与PILO组及DZ+5-HD组比较,DZ组大鼠癫痫发作的潜伏期延长,神经元损伤和丢失明显减轻,癫痫发作急性期的死亡率降低,DZ能明显降低大鼠癫痫发作后海马中MDA的含量,提高SOD、GSH-Px的活力,降低海马DNA 8-OHdG的含量(P均<0.05)。DZ的作用能被5-HD阻断。结论 DZ可减轻大鼠癫痫发作后的氧化应激损伤,对癫痫发作具有神经保护作用。     

二氮嗪强化Celsior液可安全延长供心低温保存时限

目的 评价二氮嗪(Diazoxide,DE)强化Celsior液对移植鼠供心长时程(10 h)低温保存的有效性,并探讨其可能作用机制.方法 采用改良Heron法大鼠颈部异位心脏移植模型.SD近亲大鼠随机分为3组,(1)对照组:单纯Celsior液保存鼠心;(2)实验组:30umol/L DE+Celsior液保存鼠心;(3)拮抗组:100~enol/L 5-lid+30tnnol/LDE+C~ior液保存鼠心5h;前两组根据保存时间不同分为5、10h组.观察移植心脏复跳情况,并分别于复跳后5 trfin、l周、3个月时留取标本,检测心肌MDA含量、SOD活性、心肌pfl'p酶、TNF-a、F~/FasL、Caspase-3、AI等指标以及超微结构检查.结果 (1)相同保存时间,实验组与对照组比较,术后5 rrfin和l周各指标均有明显优越性;术后3个月时各指标亦较佳,心肌MDA含量低下、SOD和N且'.K+ATP 酶活性高及FasL、TNF-a基因表达低差异有统计学意义;(2)孓HD消除了实验组中添加DE的优势作用;(3)实验10 h组与对照5 h组比较,各指标均稍有优越性;(4)DE各组和Cetsior 5h组心肌超微结构保护相对较佳:肌纤维排列整齐,肌节清,线粒体肿胀不明显,嵴结构较为清楚;celsior 10h组心肌肌纤维疏松,部分区域肌丝肌节溶解,线粒体肿胀较明显,嵴模糊.结论 DE强化Celsior液长时程冷保存鼠供心可较国际公认4-6h延长至1Oh,仍安全有效.其主要原因可能与DE介导mito-KATrC开放,早期阶段抑制氧化应激引起的细胞凋亡、阻止细胞内钙超载、降低凋亡相关基因表达等对抗心肌缺血再灌注损伤的心肌保护作用有关.