二氮嗪预处理对体内脏器的保护作用及机制研究进展

二氮嗪(Diazoxide),别名:降压嗪、氯甲苯噻嗪,由于其能有效的松弛动脉平滑肌,降低外周血管阻力而降低血压,临床主要用于抢救高血压危象、作为线粒体ATP敏感钾通道(mitoKATP通道)开放剂的二氮嗪,可以减轻心肌,脑,肝脏等器官的缺血再灌注损伤,起到重要的保护作用,本文对其研究新进展综述如下.     

二氮嗪抑制Aβ1-42对U251细胞存活率、线粒体膜电位和细胞内活性氧的影响

目的：探讨线粒体膜上ATP敏感的钾离子通道开放药物二氮嗪防治Aβ1-42细胞毒性作用及其分子学机制。方法：采用不同浓度的Aβ1-42和二氮嗪同时处理神经胶质瘤U251细胞24h，以四唑盐比色法测定细胞存活率；四氯四乙基苯并咪唑基羰花青碘化物（JC-1）检测线粒体膜电位；     

二氮嗪对深低温脑缺血再灌注大鼠脑组织NR1表达的影响

目的 探讨二氮嗪对深低温缺血再灌注大鼠的脑保护作用及其机制。方法 采用双侧颈总动脉阻断法制作深低温缺血再灌注大鼠模型,将306只SD大鼠随机分成3组：假手术组、二氮嗪组和模型组。分别在缺血1 h后再灌注2、6、12 h及1、2、3、7 d断头取脑,对脑组织行含水量检测,并采用免疫组织化学技术检测脑组织NR1表达情况。结果 假手术组脑组织含水量明显低于二氮嗪组和模型组,二氮嗪组低于模型组,模型组和二氮嗪组脑组织含水量在12 h开始升高、1d达高峰、3 d基本恢复正常,模型组和二氮嗪组NR1均在2 h开始升高、1 d达到高峰、7 d后基本达到正常水平,但二氮嗪组NR1表达水平在2、6、12 h及1、2 d明显低于模型组,且两组NR1表达水平均高于假手术组。结论 二氮嗪预处理对深低温缺血再灌注大鼠具有脑保护作用,其作用机制可能是通过下调脑组织NR1的表达来实现。     

二氮嗪对缺血再灌注致大鼠心肌细胞坏死和凋亡的影响

目的研究二氮嗪对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护效果。方法健康SD大鼠随机分为两组，实验组静脉注射二氮嗪12.5mg／kg进行预处理，对照组静脉注射相应量溶媒，10min后每组大鼠均行左侧开胸，结扎左前降支，造成局部心肌缺血2h，恢复再灌注2h后取心脏，测量心肌梗死面积大小及采用TUNEL法原位标记缺血区凋亡心肌细胞。结果与对照组相比，二氮嗪预处理组心肌梗死面积显著减小（P〈0．05），心肌细胞凋亡发生率明显降低（P〈0．05）。结论二氮嗪对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有较好的保护作用，能减少心肌细胞坏死和凋亡。     

吡那地尔及二氮嗪对长期低氧大鼠肺动脉平滑肌ＫＡＴＰ通道蛋白表达的影响

目的:研究慢性低氧对大鼠肺动脉平滑肌ATP敏感钾通道(KATP)蛋白表达的影响及KATP开放剂吡那地尔及二氮嗪的作用.方法:SD雄性大鼠35只随机分成对照组、低氧组、吡那地尔干预组[吡那地尔2.0 mg/(kg·d),ig]、二氮嗪干预组[二氮嗪1.5 ms/(ks·d),ig]、5-羟癸酸(5-HD) 二氮嗪干预组[5-HD 3.0 ms/(kg·d),ig;二氮嗪1.5 ms/(ks·d),ig],每组7只.将低氧组和各干预组大鼠放入常压低氧舱内[O2(10.0%±0.5%)],每周6天,每天6 h 4周后测定平均肺动脉压(mPAP)并采用Western-blot技术,分析各组肺动脉主干平滑肌KATP蛋白表达.结果:①慢性低氧组大鼠的mPAP显著高于正常对照组,吡那地尔干预组肺动脉压较低氧组显著下降.二氮嗪干预组加重慢性低氧所致的肺动脉压力升高,5.HD Z.氮嗪干预组的mPAP显著低于二氮嗪干预组,P均<0.05.②低氧组调节亚基磺酰脲受体2B(SUR2B)蛋白水平显著低于正常组,吡那地尔干预组SUR2B显著高于低氧组,二氮嗪干预组SUR2B蛋白水平显著低于低氧组,5-HD 二氮嗪干预组SUR2B显著高于二氮嗪于预组,与低氧组亦有显著统计学差异,P均<0.05.各组内向整流性孔区6.1(Kir6.1)蛋白没有显著差异(P<0.05).结论:慢性低氧抑制KATP通道蛋白的表达,而吡那地尔能提高表达,对慢性低氧所致的肺动脉高压和肺血管壁重构具有较好的预防和逆转作用;二氮嗪能加重低氧性肺动脉压升高,并抑制KATP通道蛋白的表达.     

二氮嗪预处理对培养成年大鼠心肌细胞模拟缺血/再灌注损伤的保护作用及其与剂量的关系

目的探讨二氮嗪预处理对培养大鼠心肌细胞模拟缺血/再灌注损伤的保护作用及其与剂量的关系.方法采用培养成年大鼠心肌细胞模拟缺血/再灌注损伤模型,观察不同浓度的二氮嗪预处理对心肌细胞缺血再灌注损伤后的细胞成活率和肌酸激酶(CK)释放的影响.结果二氮嗪预处理培养大鼠心肌细胞后,对模拟缺血/再灌注损伤要保护作用,能减少心肌细胞的损伤和死亡.在10～200mmol/L的浓度范围内,随着二氮嗪剂量的增加,其预处理心肌细胞的保护效应也相应增加.结论在50～200 mmol/L的浓度范围内,二氮嗪能剂量依赖地产生预处理心肌保护效应.     

二氮嗪对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的 探讨二氮嗪对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型的保护作用.方法 70只SD新生鼠随机分为假手术对照组(C组)、缺氧缺血组(HI组)、二氮嗪干预1组(HI之前用药)、干预2组(HI后用药)、干预3组(二氮嗪 5-HD组);HIBD后72h时取各组左脑皮层组织测定线粒体膜微黏度、磷酸腺苷含量,电镜下观察线粒体超微结构.结果 HIBD后左脑组织线粒体膜微黏度增加,HI组、干预1组、干预2组及干预3组与C组相比差异均有统计学意义(P<0.01),干预1组降低膜微黏度,与HI组、干预2组及干预3组相比,差异有统计学意义(P0.05).HIBD后脑组织ATP含量下降,HI组、干预1组、干预2组及干预3组与C组相比差异均有统计学意义(P<0.01),干预1组与HI组、干预2组及干预3组相比ATP含量增加,差异有统计学意义(P<0.05),干预2组及干预3组与HI组相比差异无统计学意义(P>0.05).HIBD后HI组、干预2组及干预3组ADP含量下降.HI组及干预3组与C组相比差异有统计学意义(P<0.05);干预1组ADP含量升高,与干预2组、干预3组及HI组相比差异均有统计学意义(P<0.05),但与C组相比差异无统计学意义.HIBD后AMP含量有所增高,HI组及干预3组与C组相比差异有统计学意义(P<0.05).干预1组和干预2组与C组相比差异无统计学意义.结论 HIBD前给予二氮嗪预处理能减少线粒体膜微黏度增加,保护线粒体结构完整性,减少能量的下降,且此作用可被5-HD所抵消,推测其保护作用可能与激活线粒体KATP通道有关.     

二氮嗪对黄疸大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的：研究二氮嗪对梗阻性黄疸肝脏的缺血再灌注损伤是否有保护作用。方法：采用胆总管结扎法制作梗阻性黄疸模型，雄性S—D大鼠60只，分5组：缺血再灌注损伤组（对照组），缺血30min和再灌注120min；GSH活性氧（清除剂）处理组，缺血再灌注前10min静脉注射GSH50mg／kg；二氮嗪预处理组（A、B、C）缺血再灌注前10min分别静脉注射1mg／kg、5mg／kg、10mg／kg。结果：与对照组相比，二氮嗪预处理各组血清中ALT、AST、LDH含量，细胞内MDA含量和SOD活性，肝细胞凋亡指数差异无显著性（P〉0．05），而GSH组与对照组相比，各组血清中ALT、AST、LDH含量，细胞内MDA含量和SOD活性，肝细胞凋亡指数差别具有显著性（P〈0．05）。结论：二氮嗪预处理对大鼠梗阻性黄疸肝脏缺血30min再灌注120min无保护作用，GSH预处理对大鼠梗阻性黄疸肝脏缺血再灌注损伤能／提供保护作用。     

二氮嗪和钾离子对正常小鼠离体胰岛细胞分泌功能的影响

目的：探讨二氮嗪（Ｄｉａｚｏｘｉｄｅ，Ｄｚ）对胰岛细胞分泌功能的影响。方法：用正常小鼠离体胰岛细胞为材料，观察其在三种不同介质作细胞外液的情况下，６种浓度葡萄糖诱导时的胰岛素分泌量。结果：当介质中含４．８ｍｍｏｌ／ＬＫ＋时（对照实验），胰岛素分泌曲线下面积为（１５．７０±０．８０）ｎｇ／细胞；介质中含有２５０μｍｏｌ／ＬＤｚ和４．８ｍｍｏｌ／ＬＫ＋时，面积为（４．９５±０．５４）ｎｇ／细胞（为对照实验的３１．５３％）；当介质中含有２５０μｍｏｌ／ＬＤｚ和３０ｍｍｏｌ／ＬＫ＋时，面积为（３１．５４±１．５４）ｎｇ／细胞（为对照实验的２００．８９％）。结论：在正常体液条件下，Ｄｚ可以直接抑制葡萄糖诱导的胰岛素分泌；当体液中Ｋ＋浓度提高到３０ｍｍｏｌ／Ｌ时，胰岛β细胞的分泌功能又得到恢复，且其分泌量比正常时明显增加     

线粒体ATP敏感性钾通道开放剂改善大鼠心脏冷保存

目的:探讨线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪 (DE)对离体大鼠心脏冷保存效果的影响及作用机制.方法:SD大鼠随机分成对照组、DE组、DE 5-HD组.利用Langendorff离体鼠心灌注法,各组心脏在4℃条件下分别保存3 h和8 h后,复灌60 min,观察各组大鼠血流动力学的恢复情况、冠脉流出液中心肌酶漏出量、心肌水含量的变化及心肌超微结构改变.结果:在Celsior心麻痹液中添加30 μmol/L的DE后,能明显改善冷保存3 h心脏的左心室发展压力的恢复,降低心肌酶(LDH、CK)在某些复灌时间点上的漏出,但对保存后左心室舒张末期压力的抬高和冠脉流量的恢复及心肌水肿程度无明显作用;而相同浓度的DE添加到Celsior心麻痹液中,可明显降低冷保存8 h心脏左心室舒张末期压力的抬高,改善左心室发展压力和冠脉流量的恢复,降低心肌酶(LDH、CK、GOT)的漏出,缓解心肌水肿,对心肌的超微结构也有较好的保护作用,其中30和45 μmol/L DE组对冷保存8 h心脏的保护作用优于15 μmol/L DE组,而3 0及45 μmol/L DE组之间并无显著性差异.DE的上述作用可被线粒体ATP敏感性钾通道的特异性阻断剂5-HD所取消.结论:DE可通过激活线粒体ATP敏感性钾通道显著改善离体大鼠心脏冷保存效果.