加强药品零售企业监管必须注意抓好四个结合

随着修订后的<药品管理法>和新颁布的<行政许可法>的实施,我市药品零售企业迅速增加,到2004年9月底已从2002年的180家增至513家,达2.8倍.药品零售企业的迅速增加不仅大大增加了药品监督管理部门的日常监管工作量,而且增加了日常监管的难度.为解决点多面广、日常监管的频次难以到位及监管对象文化业务素质参差不齐,守法经营意识不强,存在趁监管空隙打擦边球的侥幸心理等问题,笔者以为在日常监管上要着重抓好以下四个结合.     

西达本胺增加慢性髓系白血病耐药株K562/ADM细胞对柔红霉素的敏感性

目的 观察西达本胺（CDM）能否影响人慢性髓系白血病耐药株K562/ADM细胞对柔红霉素（DNR）的敏感性,并探讨其可能的分子机制。方法 体外常规培养K562细胞和K562/ADM细胞,给予不同剂量CDM和（或）DNR处理48 h后,采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测CDM与DNR对K562和K562/ADM细胞的毒性作用,采用Chou-Talalay中效分析法对两药的联合效应进行评价,采用流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期和凋亡,采用Western blotting方法检测组蛋白2AX（H2AX）、γH2AX（Ser139）、共济失调毛细血管扩张征突变基因（ATM）、p-ATM（Ser1981）、乳腺癌易感蛋白l（BRCA1）和p-BRCA1（Ser1524）的蛋白表达水平。 结果 DNR可剂量依赖性地抑制K562/ADM细胞活力（P<0.05）,半数抑制浓度（IC50）为11.76 μmol/L,耐药倍数为18.09;CDM可协同增强DNR对K562/ADM细胞的抑制作用置信区间（CI）（CI<1）,反转倍数为8.11;与对照组相比,DNR组细胞增殖率显著降低（P<0.05）,G2/M期细胞比例和凋亡率明显升高（P<0.05）,而无毒剂量的CDM可协同增强DNR引起的细胞增殖抑制、G2/M期阻滞和细胞凋亡（P<0.05）;耐药株K562/ADM细胞中ATM和BRCA1蛋白表达水平显著高于其亲代K562细胞（P<0.05）;DNR可上调K562/ADM细胞中H2AX、ATM和BRCA1蛋白的磷酸化水平（P<0.05）;CDM与DNR联用可使γH2AX蛋白水平进一步升高,但p-ATM和p BRCA1蛋白水平的变化则相反（P<0.05）。 结论 CMD可反转K562/ADM细胞对DNR的耐药性,这可能与上调H2AX蛋白的磷酸化水平以及下调ATM和BRCA1蛋白的磷酸化水平有关。     

白藜芦醇对血清剥夺诱导大鼠皮层神经元自噬的影响

目的:研究白藜芦醇(RSV)对血清剥夺诱导大鼠神经元自噬的影响及分子机制。方法:将原代培养的大鼠皮层神经元分为对照组(control)、血清剥夺组(SD)、RSV处理组(RSV)和RSV联合组SIRT1抑制剂EX527处理组(RSV+EX 527),利用乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测细胞活性,免疫荧光染色检测沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)的表达变化、Western Blot检测自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达水平变化。结果:与正常对照组相比,血清剥夺引起细胞活性下降、SIRT1表达下降,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比例减少,Beclin1表达降低(P 0. 05);经过RSV处理后,细胞活性增加(P 0. 05),大鼠神经元SIRT1表达增加,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比例增加,Beclin1表达增加;使用EX 527处理后,RSV的神经保护作用受到抑制。结论:RSV通过激活SIRT1活性促进大鼠皮层神经元自噬。     

miR-29和ZO-1在大鼠血神经屏障中的作用研究

目的:观察重组组织型纤溶酶原激活剂(rt PA)通过miR-29对大鼠外周神经闭锁小带蛋白-1(ZO-1表达水平的影响。方法:健康雌性SD大鼠随机分为对照组(Control)、rt PA组(rt PA)和无催化活性rt PAi组(rt PAi)。3组大鼠分别在坐骨神经旁注射生理盐水、rt PA和rt PAi,2 h后利用real time RT-PCR、Western Blot及免疫荧光方法检测坐骨神经内ZO-1的mRNA和蛋白表达水平变化,并采用real time RT-PCR方法检测坐骨神经miR-29的表达水平。结果:与对照组相比,rt PA组大鼠坐骨神经周围注射rt PA后,ZO-1的mRNA表达下降(P 0. 05),Western Blot发现ZO-1蛋白表达水平下降(P 0. 05),免疫荧光检测同样发现ZO-1表达减少;无催化活性的rt PAi处理大鼠坐骨神经后,神经束膜内ZO-1的mRNA及蛋白水平同样明显下降(P 0. 05);与对照组相比,rt PA和rt PAi处理2 h后大鼠坐骨神经内miR-29表达均明显增高(P 0. 05)。结论:rt PA通过减少神经束膜中ZO-1表达水平,增加神经束膜通透性,其作用不依赖于其对凝血酶原复合物的催化功能,可能通过增加miR-29表达下调ZO-1蛋白表达水平。     

PAPD4基因缺失影响小鼠的运动功能

目的研究PAPD4基因敲除对小鼠行为和生理状态的影响。方法按性别、基因型将小鼠分为雄性对照、雄性全敲、雌性对照和雌性全敲。开放场、水迷宫、血糖检测、血压检测、T迷宫、糖水偏好和强迫游泳。结果雌性敲除鼠在开放场中的运动速度(P0.05)和总运动距离(P0.001)显著少于雌性对照。雌、雄敲除鼠在水迷宫中的运动速度低于同性对照,且雌性小鼠在第6次和第9次训练的运动速度存在显著低于对照(P_60.05,P_90.05);雄性小鼠在第4次和第9次训练的运动速度存在显著低于对照(P_40.01,P_90.05)。此外,雄性敲除鼠的基线血糖水平显著低于雄性对照(P0.05);禁食16 h,其血糖水平显著高于对照(P0.05),且禁食前后的血糖改变量显著低于对照(P0.01)。结论 PAPD4基因缺失可能影响小鼠的运动功能,并影响雄性小鼠的血糖水平。     

抑郁症患者中升高的前列腺素E1与抑郁样行为相关

目的研究在抑郁症(MDD)患者队列外周血及慢性不可预知温和型应激(CUMS)小鼠模型大脑组织中前列腺素E1(PGE1)浓度及其代谢通路上的关键基因(PLA2、PTGS1、PTGS2和PTGES)表达量的改变,以明确PGE1的改变与MDD疾病间的关系。方法用高效液相色谱(HPLC)检测受试者外周血浆和CUMS小鼠脑组织中PGE1和PGE2的浓度;用RT-qPCR检测PLA2、PTGS1、PTGS2和PTGES的mRNA表达水平。结果在MDD患者中,血浆PGE1浓度和PTGS1的表达水平均显著上升(P0.05)。这一结果在CUMS小鼠外周血和大脑杏仁核组织中得到了有效验证。结论 PGE1在MDD中的上升,可能与前列腺素合成通路的功能亢进有关。     

巨噬细胞亚型与疾病的关系及EGCG对巨噬细胞影响的研究进展

作为一种形态和功能独特的白细胞亚群,巨噬细胞在机体免疫反应中发挥重要作用。巨噬细胞可分为M1型与M2型,前者促进炎症反应并抑制肿瘤细胞增殖,后者促进其增殖和组织修复。表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG)是绿茶中茶多酚的主要组成部分之一,它能够减少氧化应激和组织损伤,降低肿瘤和心血管疾病等的风险。研究发现EGCG对巨噬细胞有着广泛的影响。文章就巨噬细胞不同亚型与疾病关系以及EGCG通过影响巨噬细胞以治疗疾病的研究进展作一综述。     

E3泛素连接酶β-TrCP1在肿瘤中的研究进展

β-转录重复包含蛋白1(β-transducin repeat containing protein 1,β-TrCP1)是一种E3泛素连接酶的底物识别亚基,能特异性识别泛素化底物,在细胞增殖、信号转导以及细胞周期进程中发挥重要作用。β-TrCP1蛋白表达异常或功能失调常使泛素化修饰异常,影响多种肿瘤的发生、发展。该文现对β-TrCP1在恶性肿瘤中的作用及相关分子机制进行综述。