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1.
《卫生研究》2019,(5)
目的快速纯化大鼠大脑皮质原代星形胶质细胞并进行传代培养。方法取新生2日龄SD大鼠大脑皮层,每2只为一组,将剥除软脑膜的大脑皮层剪碎,添加0. 25%胰蛋白酶-EDTA溶液500μL,37℃消化15 min,将细胞悬液接种于未用多聚赖氨酸处理过的培养瓶中,37℃、5%CO_2细胞培养箱中孵育15 min后,将细胞以5×10~6个/m L接种于L-多聚赖氨酸包被的T75培养瓶中。待细胞长满瓶底,200 r/min 37℃恒温摇18 h,加入1 m L 0. 25%胰蛋白酶,待大部分细胞悬浮后收集细胞。在倒置相差显微镜下对细胞进行形态学观察,胶质纤维酸性蛋白免疫荧光染色法进行星形胶质细胞纯度鉴定,并以MTS法测定传代后细胞增殖活力。结果星形胶质细胞纯度达到(97. 86±0. 91)%,细胞传代后生长情况及增殖活力良好。结论该方法可以高效获取原代及传代的大鼠大脑皮质星形胶质细胞。 相似文献
2.
《临床合理用药杂志》2009,(24):14-14
美国波士顿大学医学院的研究人员发现一种新的基因疗法,该方法或许可用来防止肺气肿进一步恶化。抗胰蛋白酶缺乏症是肺气肿一种常见的遗传形式,其发病原因是因为al抗胰蛋白酶基因发生突变引起。虽然已经开发出多种方法将DNA分子传递到活体细胞内,但这类方法受到特性的细胞类型的限制。该课题组的研究人员利用老鼠模型发现一种新的方法,可将治疗基因有选择性的传递到肺部70%的肺泡巨噬细胞AM中,AM是导致肺气肿的一种关键的细胞类型。 相似文献
3.
目的研究肾草酸钙结石形成对肾组织bikunin基因和间α胰蛋白酶抑制物(IαI)蛋白表达的影响,探讨bikunin在尿结石形成中的意义。方法诱导实验性大鼠肾草酸钙结石模型,收集结石大鼠、正常大鼠、临床肾结石和非结石患者每组各8例的肾组织标本。采用免疫组化、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和计算机图像分析技术分别检测所有大鼠和人肾组织中bikuninmRNA和IαI蛋白的表达水平。结果正常大鼠和非结石患者肾组织均存在bikuninmRNA和IαI蛋白的表达。肾草酸钙结石形成后,结石大鼠肾组织IαI蛋白的灰度值和bikuninmRNA的相对表达水平分别为198.43±15.17、0.70±0.14;肾结石患者肾组织IαI蛋白的灰度值和bikuninmRNA的相对表达水平分别为263.25±17.41、1.27±0.13,分别和对照组相比,均显著增加(P<0.05)。结论Bikunin作为构成IαI的轻链结构,在肾草酸钙结石形成后,bikuninmRNA的表达迅速增强,提示机体通过肾脏合成更多的bikunin来抑制肾草酸钙结石的形成。 相似文献
5.
D-氨基酸氧化酶(DAAO)是两步酶法催化头孢菌素C(CPC)生成7-氨基头孢霉烷酸(7-ACA)的重要酶之一。利用固定化DAAO催化CPC的转化液中,酮酸中间体随批次的增加逐渐减少,反应至第13批时,转化基本完全。当转化液pH由7.2升至7.6时,终止反应,转化率和收率分别达99.6%和93%。分次补加固定化DAAO,可连续转化132批。 相似文献
6.
7.
人尿胰蛋白酶抑制剂与激肽释放酶联产及纯化的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本文探讨了采用Polyerde-3吸附剂,从男性尿中提取HUTI-HUKN粗品,再依次经抑肽酶-琼脂糖4B亲和层析、胰蛋白酶-琼脂糖4B亲和层析,将HUTI和HUKN分离并纯化。每20升尿液得精品HUTI50mg,比活1,250u/mg;HUKN3mg,比活666u/mg。活性回收率分别为41%和50%。 相似文献
8.
朱浪潮 《中华腹部疾病杂志》2003,3(3):170-170
男,50岁,农民。以“发热、腹泻2天”之主诉于2002-08-072pm入院。病前2天不明原因晨起后浑身酸困无力,4h后症状加重,昏睡,感发热,测体温达40.5℃,在当地给青霉素、双黄连、病毒唑、退热剂等处理,病后8h体温降至38.5℃,精神好转,但出现黄色泡沫样腹泻,20~25次/d,1d前大便呈脓血样,有后重感,伴腹部隐痛,近1天大便20余次,体温波动于39℃~40℃,病后感恶心未吐。 相似文献
9.
κ-卡拉胶-魔芋多糖复配胶包埋的啤酒酵母细胞,经冻融处理后用于合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱(CDP-胆碱)。结果表明:250mL摇瓶中加入50mL反应液(葡萄糖400mol/L,CMP10mmol/L,磷酸碍碱50mmol/L,K2HPO4-KH2PO4缓冲液100mmol/L,MgSO410mmol/L,pH=8.0),固定化细胞1200g/L,34℃、150r/min下,反应4h后补加400mmol/L葡萄糖,反应8h可使60%以上的CMP转化为CDP-胆碱。反应液经灭菌和添加辅酶I(NAD^ )后,固定化细胞可连续使用4次,CDP-胆碱转化率维持在40%以上。 相似文献
10.
目的 :观察在腹部手术围手术期应用乌司他丁对肝、肾功能的保护作用。方法 :选取同期 40例腹部手术病人随机分为治疗组和对照组 ,治疗组在术前 1天、术中、术后 1~ 5d ,每天予以乌司他丁 2 0万U静脉输注 ;同期观察、对比两组病人手术前后血清Cr、BUN以及血清胆红素 (TBIL)、ALT、AST水平的变化。结果 :腹部手术创伤会对肝肾功能产生损害 ;治疗组术后 1~ 5d血清Cr、BUN水平与术前相比差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,而对照组术后血清Cr、BUN水平较术前明显升高 (P <0 0 5 ) ,与治疗组同期相比差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;治疗组与对照组术后血清ALT、AST、TBIL水平较术前均明显升高 ,但治疗组各指标升高的幅度均小于对照组 (P <0 0 5 ) ,且治疗组各指标恢复速度更快。结论 :乌司他丁对腹部手术围手术期的肝肾功能具有保护作用。 相似文献