Pathogenesis of Focal Cytoplasmic Necrosis of the Smooth Muscle Cells in Hypertensive Rat Arterial Media

Hypertensive rat arteries exhibited severe medial smooth muscle cell injury and necrosis. Electron microscopic observations showed the smooth muscle cells of these arteries exhibited characteristics of focal cytoplasmic necrosis forming new cytodemarcating membrane between the healthy cytoplasm and necrotic cytoplasm. When the focal necrotic cytoplasm disappeared from the injured smooth muscle cells, it left it with a moth-eaten leaf-like appearance (moth-eaten necrosis). At an advanced stage of injury, smooth muscle cells changed to islet-like cell bodies with newly formed basement membranes around them, and further islet-like cell bodies and cell debris disappeared leaving lamellar and reticular basement membranes.In hypertensive rats injected with nitroblue tetrazolium (NBT), formazan deposits were observed in the medial cells and nitrotyrosine, a biomarker of peroxynitrite, were immunohistochemically observed in the arterial media. Nick-end positive extranuclear small granular bodies, which might have derived from focal necrotic cytoplasm and nucleus, were detected in the arterial media using DNA nick-end labeling method. Based on electron microscopical and histochemical findings, we conjectured that the focal cytoplasmic necrosis of the smooth muscle cells in the arterial media depended on injury arising from mitochondria-derived oxidants.     

CD137-CD137配体对巨噬细胞基质金属蛋白酶9及血管平滑肌细胞钙化形成的影响

目的探讨CD137-CD137配体(CD137L)信号是否通过调控巨噬细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达影响血管平滑肌细胞(VSMC)钙化形成。方法采用巯基乙酸盐腹腔灌洗法获取C57BL/6J小鼠腹腔巨噬细胞(PM),采用组织块贴壁法取3~6代胸主动脉VSMC分为对照组、共培养组、CD137激动组和MMP-9抑制组(n=3)。对照组用重组CD137L蛋白干预VSMC,共培养组用PM和VSMC共培养,CD137激动组和MMP-9抑制组分别用重组CD137L蛋白和MMP-9抑制剂干预PM后,与VSMC共培养,再加入重组CD137蛋白(10μg/ml)干预。采用Western blot检测各组钙化相关的骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx-2)表达,微板法检测钙离子浓度和碱性磷酸酶(ALP)活性,Von Kossa和茜素红染色检测各组细胞钙化程度。结果CD137激动组VSMC中OPN和Runx-2蛋白表达、钙离子浓度及ALP活性明显高于共培养组(P<0.01),而MMP-9抑制组VSMC中OPN和Runx-2蛋白表达、钙离子浓度及ALP活性明显低于CD137激动组,差异有统计学意义[0.25±0.27 vs 2.12±0.34,0.30±0.32 vs 2.63±0.41,(1.92±0.09)mmol/g vs(4.99±0.37)mmol/g,(1.11±0.50)KU/g vs(2.63±0.04)KU/g,P<0.01]。共培养组VSMC中OPN和Runx-2蛋白表达、钙离子浓度及ALP活性与对照组比较,无统计学意义(P>0.05)。CD137激动组茜素红染色红色颗粒物质沉积和Von Kossa染色黑色颗粒物质沉积明显多于对照组和共培养组;MMP-9抑制组钙化程度显著降低;对照组和共培养组钙化程度则无明显差异。结论CD137-CD137L信号可能通过调控巨噬细胞MMP-9表达影响VSMC钙化形成。     

关节镜下臀肌挛缩松解术治疗髌股关节不稳定的疗效分析

目的 探讨关节镜下臀肌挛缩松解术对改善髌股关节不稳定的疗效。方法 选取了66例在2016年1月—2018年12月于同济大学附属第十人民医院行关节镜下臀肌挛缩松解术的患者,所选的研究对象术前必须伴有髌股关节不稳定的症状和相关影像学证据。并于术前术后评估患者的膝关节Lysholm功能评分,运用CT检查获取髌股关节相关指标并进行统计分析。结果 所有入组患者均获得了较好的临床效果,术前的髋关节活动弹响和异常姿势症状明显改善。此外,术后患者膝关节的疼痛也有显著的缓解,术前术后的Lysholm评分差异有统计学意义（P<0.05）。在膝关节CT影像学的对比中可以发现,髌骨倾斜角,髌股指数和髌骨外移度指标在术后明显减小（P<0.05）。平均的外侧髌股角术后明显增大(P<0.05)。结论 关节镜下臀肌挛缩松解术可以显著改善髌骨的外移和倾斜,从而增强髌股关节的稳定性。     

支气管热成形术对难治性哮喘患者肺功能、血嗜酸性粒细胞数及HRCT下管腔面积的影响

目的评估支气管热成形术（bronchial thermoplasty, BT）对难治性哮喘（refractory asthma, RA）患者肺功能、血嗜酸性粒细胞(eosinophil, E)改变率和高分辨率CT(high resolution CT, HRCT)下管腔面积(lumen area, LA)的影响。方法入选同济大学附属第十人民医院26例RA患者,其中8例行BT治疗,18例行吸入激素和支气管扩张剂传统治疗,收集其临床资料,血常规,肺功能和HRCT下左右上叶尖段、左上叶固有段、左右下叶基底段和左右下叶后基底段支气管开口处支气管LA,比较两组的差异,分析小支气管LA改善率与肺功能改善率和术后嗜酸性粒细胞的相关性。结果与对照组比较,BT组FEV1/FVC(-0.188±0.123 vs -0.038±0.096)、FEV1(-0.263±0.146 vs -0.061±0.185)和FEV1%(-0.254±0.163 vs -0.050±0.169)负值明显减少,差异具有统计学意义（P均＜0.05）;BT组患者段支气管LA(0.008±0.157 vs 0.121±0.149)、小支气管LA(0.022±0.265 vs 0.176±0.311)、总支气管LA(0.015±0.224 vs 0.153±0.254)明显扩大,差异有统计学意义（P均＜0.05）;小支气管管腔面积改善率与术后血嗜酸性粒细胞值和百分比有负相关趋势,但差异无统计学意义（r=-0.108,P=0.798;r=-0.065,P=0.878）。结论BT能够延缓RA患者的肺功能下降速度,明显扩张支气管LA,小支气管LA改善值与肺功能和嗜酸性粒细胞无相关性。     

趋化因子CXCL12可能参与白细胞介素17A对小鼠肺成纤维细胞的活化

目的: 研究IL-17A促进小鼠肺成纤维细胞活化及趋化因子CXCL12在其中的作用。方法: 以雄性BALB/c小鼠为研究对象,小鼠腹腔注射重组小鼠IL-17A后取小鼠肺组织。采用实时逆转录PCR和蛋白质印迹法检测小鼠肺组织α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白表达,采用免疫组织化学法和实时逆转录PCR法测定肺组织中趋化因子CXCL12的表达。分离培养正常小鼠原代肺成纤维细胞,采用免疫荧光染色法和光学显微镜观察鉴定原代肺成纤维细胞。将分离的肺成纤维细胞与不同浓度的重组小鼠IL-17A共培养后收集细胞及上清液,采用实时逆转录PCR法测定细胞中α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白和CXCL12的mRNA水平,采用ELISA法测定培养上清液中Ⅰ型胶原蛋白和CXCL12蛋白水平。结果: 与对照组比较,重组小鼠IL-17A处理后小鼠肺组织中α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白水平均升高（均P < 0.01）。与不同浓度的重组小鼠IL-17A共培养后,小鼠肺成纤维细胞表达α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白和CXCL12的mRNA明显增加（均P < 0.01）,其培养基上清液中Ⅰ型胶原蛋白、CXCL12的浓度也明显升高（均P < 0.01）,且呈剂量依赖性。结论: IL-17A能促进肺成纤维细胞的活化并转化为肌成纤维细胞,分泌Ⅰ型胶原蛋白明显增加,促进细胞外基质的沉积,从而导致肺纤维化的发生和发展,而活化的成纤维细胞分泌的趋化因子CXCL12可能参与了这个过程。     

肾元颗粒对db/db糖尿病肾病小鼠血管钙化的改善作用及其机制

目的：通过高磷诱导db/db糖尿病肾病（DN）小鼠血管钙化,探讨肾元颗粒对db/db DN小鼠血管钙化的改善作用及其可能机制。方法：将20只SPF级db/db小鼠随机分为模型组和肾元颗粒组（n=10）,同系背景野生型（WT）小鼠作为空白组（n=10）。给药12周后,取各组小鼠血清、肾脏和胸主动脉组织。ELISA法检测各组小鼠血清FGF23水平,HE和von Kossa法检测各组小鼠胸主动脉病理形态表现以及钙盐沉积情况,实时荧光定量PCR （Real-time PCR）法检测各组小鼠肾脏组织中KlothomRNA和胸主动脉组织中Pit-1、Runx2及SM22α mRNA表达水平,Western blotting法检测各组小鼠肾脏组织中Klotho蛋白和胸主动脉组织中Pit-1、Runx2及SM22α蛋白表达水平,免疫组织化学法检测各组小鼠胸主动脉组织中Pit-1蛋白表达水平,免疫荧光法检测各组小鼠胸主动脉组织中SM22α和Runx2蛋白表达水平。结果：与空白组比较,模型组小鼠血清FGF23水平明显升高（P<0.05）,肾脏组织中Klotho mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,胸主动脉组织中Pit-1和Runx2 mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,SM22α mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,胸主动脉组织中Pit-1和Runx2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,SM22α蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与模型组比较,肾元颗粒组小鼠血清FGF23水平降低（P<0.05）,肾脏组织中Klotho mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,胸主动脉组织中Pit-1和Runx2 mRNA及蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,胸主动脉组织中SM22α mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。结论：肾元颗粒可通过上调小鼠肾脏组织中Klotho蛋白表达水平,减少Pit-1表达水平,抑制FGF23/Pit-1信号通路,调节血管平滑肌细胞（VSMC）的表型转化,达到血管保护作用。     

从腰夹脊穴论治中风后平衡功能障碍针刺思路探析

平衡功能障碍是中风后常见后遗症,增加了患者跌倒的风险及患者的病痛和负担,延缓了康复的进程,影响功能的恢复。针刺治疗是治疗中风后平衡功能障碍的重要方法,临床多以脏腑辨证和经络辨证为基础,多采用头皮针、体针、芒针等方法,虽取得一定疗效,但仍存在相应的局限性,缺乏现代学理论依据;本文从经络辨证和现代医学核心肌群理论出发,选取处于腰部核心肌群的夹脊穴,既可以通督脉、调摄膀胱经之背俞穴,入络脑室,从而达到整体治疗、调整阴阳的目的,又可以松解神经,进而缓解肌痉挛,降低肌张力,提高平衡功能。最后提出以针刺腰部夹脊穴治疗中风后平衡功能障碍,期待在临床治疗中取得更好的效果。     

超声引导下后路腰方肌阻滞与腹横肌平面阻滞应用于小儿下腹部手术后镇痛的效果及安全性比较

目的 探讨后路腰方肌（QL2）阻滞与腹横肌平面（TAP）阻滞在小儿下腹部腹腔镜手术后镇痛的效果及安全性。方法 选择2018年6月～2019年6月本院择期全麻下腹部腹腔镜手术患儿56例,年龄1～7岁,ASAⅠ或Ⅱ级,随机分为QL2组和TAP组,每组各28例。两组神经阻滞均于全身麻醉后、手术前在超声引导下完成。术后24 h内密切随访。FLACC量表评估术后疼痛程度;记录术后24 h内予补救性镇痛患儿累积数量、平均动脉压和心率;评估并记录神经阻滞相关不良反应。结果 QL2组患儿手术后1 h、2 h、4 h、6 h、12 h FLACC评分均低于TAP组（均P＜0.05）;QL2组手术后24 h内需要补救性镇痛患儿累积数量低于TAP组（P=0.014）;QL2组患儿手术后1 h、2 h、4 h、6 h、12 h、24 h平均动脉压和心率均低于TAP组（均P＜0.05）。QL2组术后有4例（14.3%）出现暂时性股四头肌无力,TAP组患儿未发现股四头肌无力;QL2组2例、TAP组1例出现单侧穿刺部位血肿。结论 超声引导下QL2阻滞应用于小儿下腹部腹腔镜手术后镇痛的效果优于TAP阻滞,但存在发生暂时性股四头肌无力的风险。