复方鳖甲软肝片对心肌成纤维细胞增殖影响的研究

目的　观察复方鳖甲软肝片对心肌成纤维细胞 (CFs)增殖的影响。方法　采用培养的新生大鼠CFs,以MTT作为反映细胞增殖的指标 ,流式细胞仪分析细胞周期。结果　复方鳖甲软肝片能明显抑制CFs增殖 ,并将细胞周期阻抑在G1期 ,强度与氯沙坦相近。结论　复方鳖甲软肝片具有防治心肌纤维化的作用。     

经IFN-γ诱导的人IL-2基因修饰的人原代成纤维细胞体外细胞因子表达及某些免疫学特性的研究

成纤维细胞作为基因治疗载体细胞是肿瘤基因治疗的一项重要途径,但以往的研究仅仅将成纤维细胞作为载体而忽略了其自身的免疫学功能的发挥。本文采用本室构建的逆转录病毒载体将IL-2基因转入人原代成纤维细胞,再用IFN-7诱导。结果表明,IFN-7诱导后,IL-2基因修饰的成纤维细胞MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD40等分子表达具有一定程度的增高,并且表达IL-2、IL-1、IL-6等,由于这些免疫分子及细胞因子的表达与肿瘤抗原的递呈、效应细胞的激活密切相关,提示这种经IFN-7诱导后的IL-2基因修饰的成纤维细胞可能作为抗原递呈细胞而参与肿瘤抗原的递呈及效应细胞的激活。     

人牙龈成纤维细胞原代培养方法的比较研究

目的：建立和评价人牙龈成纤维细胞原代培养方法,并观察其生物学特性。方法：分别用组织块法、2种改良酶消组织块法培养人牙龈成纤维细胞（HGF）,用形态学、免疫荧光鉴定细胞来源。通过活细胞观察,MTT比色实验研究细胞体外生物特性。比较3种培养方法培养HGF的效果。结果：细胞抗波形丝蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性,符合人牙龈成纤维细胞的形态学特征和生物学特性。组织块法、改良酶消组织块法（翻瓶法）、改良酶消组织块法（盖玻片法）的细胞培养成功率分别为26.7%、54%、60%。组织块法和2种改良酶消组织块法间的成功率差异有显著性（P〈0.01）,2种改良酶消组织块法间的成功率差异无显著性（P〉0.05）。结论：本实验建立的细胞系为人牙龈成纤维细胞。2种改良酶消化组织块法可显著提高人牙龈成纤维细胞原代培养成功率。     

羟基喜树碱对人眼Tenon蒺s囊成纤维细胞的抑制作用

目的：研究羟基喜树碱（HCPT）对人眼Tenon＇s囊成纤维细胞（human Tenon＇s capsule fibroblasts,HTFs）的细胞周期、细胞毒性的影响,探讨其抗纤维化作用机制。方法：取本院眼库新鲜眼球（〈6h）的Tenon＇s囊组织,用组织块培养法进行成纤维细胞体外培养;流式细胞仪测定HCPT和丝裂霉素C（MMC）对HTFs细胞周期的影响;台盼蓝染色法鉴定HCPT和MMC对HTFs的抑制作用是否由药物的细胞毒性引起;RT-PCR检测HCPT、MMC作用24h后HTFs的Smad7 mRNA基因表达。结果：HTFs体外生长良好,可用于实验研究。不同浓度HCPT（0,0.25,1,4mg/L）作用后的HTFs细胞周期与对照组相比,G2期细胞百分数的组间差异均有统计学意义（P〈0.05）;不同浓度MMC（0,0.025,0.1,0.4mg/L）作用后的HTFs细胞周期与对照组相比,G1期细胞百分数的组间差异均有统计学意义（P〈0.05）。不同浓度HCPT和MMC作用后的HTFs活细胞率和空白对照组比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。4mg/LHCPT,0.4mg/LMMC作用HTFs24h后,Smad7 mRNA表达水平与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：HCPT将HTFs阻滞于G2期,MMC将HTFs阻滞于G1期;HCPT,MMC抑制HTFs的作用和药物的细胞毒性无关;HCPT抑制HTFs的增殖可能是通过上调Smad7mRNA的表达阻断TGF-茁信号通路实现的。     

苦参碱对兔眼小梁切除术后滤过泡瘢痕的影响

目的 研究苦参碱对青光眼滤过泡瘢痕形成是否有抑制作用.方法 选取40只新西兰大白兔,随机分为A、B、C、D四组,均行小梁切除术,巩膜瓣下分别放置1.0g·L-1苦参碱棉片、0.4g·L-1苦参碱棉片、0.2 mg · L-1丝裂霉素棉片、生理盐水棉片.于术前,术后1、3、7、14、28 d观察各组眼压、滤过泡、前房反应、并发症等,于术后1、3、7、14、28 d各组随机处死2只兔,摘出眼球分别做病理切片、免疫组织化学染色及Masson三色染色观察炎症细胞、成纤维细胞增殖情况及新生胶原纤维情况,选取术后7d的角膜行透射电镜,观察药物的毒性反应.结果 术后7、14、28 dA、B、C组与D组两两对比眼压值有明显差异(P＜0.05),A组与B组术后7、14、28 d两组眼压有明显差异(P＜0.05).术后7、14、28 dA、B、C三组成纤维细胞计数与D组比较有显著差异(P＜0.01),A、B组成纤维细胞计数比较差异有显著性(P＜0.05).结论 苦参碱能减少成纤维细胞的增殖,减少滤过泡瘢痕形成,对眼部组织无明显毒副作用.     

不同照射方式下核黄素-A波紫外线兔巩膜胶原交联术对兔巩膜成纤维细胞生物力学特性的影响

目的　研究不同照射方式下核黄素-A波紫外线兔巩膜胶原交联术对兔巩膜成纤维细胞生物力学特性的影响。方法　取健康新西兰大白兔24只，随机将兔平均分为A、B两组，每组选取左眼为实验眼，右眼为对照眼。麻醉后暴露左眼鼻上方巩膜。在该处巩膜滴加5-磷酸核黄素5 min后，用波长为370 nm的紫外线灯照射。A组的照射时间为30 min，能量密度为3.0 mW·cm^-2；B组的照射时间为9 min，能量密度为10.0 mW·cm^-2。照射期间，每2 min滴加1次5-磷酸核黄素溶液，以保持巩膜的湿润。术后60 d，处死实验兔，培养实验眼交联部位及对照眼相应部位的巩膜成纤维细胞，用细胞微管吸吮实验检测巩膜成纤维细胞的杨氏模量、表观黏性。结果　A、B两组实验眼巩膜细胞的杨氏模量、表观黏性均较各自对照眼显著增强，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）；而A、B两组实验眼间、及对照眼间巩膜细胞的杨氏模量、表观黏性差异无统计学意义（均为P＞0.05）。以上结果表明，交联术后巩膜细胞的黏弹性发生了明显的变化，黏弹性显著升高。而两种照射方式之间巩膜细胞的黏弹性无显著差异。结论　两种不同的照射方式，均能使巩膜成纤维细胞的生物力学性能发生显著增强，而两种照射方式之间并未见明显的差别。     

K-115增强自噬调控TGF-β1诱导的人Tenon囊成纤维细胞活化

目的:研究K-115对人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)增殖和迁移的影响,并探讨其相关作用机制,为青光眼术后抗瘢痕治疗提供新思路。方法:选取2018-09/2019-09于河北省人民医院行青光眼手术患者的Tenon囊组织,采用组织块法进行HTFs原代培养,应用转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HTFs模拟青光眼滤过性手术后的细胞活化模型,并采用K-115处理细胞。将细胞分为4组：对照组采用溶剂二甲基亚砜(DMSO)处理;TGF-β1组采用10μg/L TGF-β1处理24h; TGF-β1+5 K-115组采用5μmol/L K-115预处理2h后加入10μg/L TGF-β1处理24h; TGF-β1+10 K-115组采用10μmol/L K-115预处理2h后加入10μg/L TGF-β1处理24h。通过细胞增殖实验观察细胞的增殖能力;划痕试验检测细胞的迁移能力;透射电子显微镜观察细胞内自噬小体的形成;Hoechst 33342/PI染色观察细胞凋亡情况。结果:细胞增殖实验结果提示K-115可以抑制TGF-β1诱导的HTFs增殖;划痕试验提示K-115可以抑制TGF-β1诱...     

粉防己碱和氯丙嗪对人胚肺成纤维细胞胶原和透明质酸合成的影响(英文)

目的：研究粉防己碱(Tet)和氯丙嗪(Chl)对人胚肺成纤维细胞胶原与透明质酸(HA)合成的影响,为应用钙拮抗剂防治器官纤维化提供依据.方法:采用[~3H]脯氨酸掺入和放射免疫法分别测定胶原与HA合成.结果:Tet 5—80 μmol L~(-1)和Chl 10—40 μmol L~(-1)均以浓度依赖方式抑制胶原与HA合成.Tet 5—20μmol L~(-1))对细胞无明显毒性却显著抑制胶原与HA合成(P<0.01).结论:Tet在低浓度(5—20μmol L~(-1))时对细胞无明显毒性作用而显著抑制成纤维细胞胶原与HA合成,可望成为治疗器官纤维化的有效药物.     

肝细胞生长因子对心肌成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的通过体外培养的新生大鼠心肌成纤维细胞研究肝细胞生长因子(HGF)对结缔组织生长因子表达(CTGF)的影响。方法差速贴壁法分离新生SD大鼠心肌成纤维细胞(CFs)及免疫组化法对其进行鉴定,选AngⅡ(10~(-6)mol/L)作诱导浓度,与HGF100ng/ml孵育48h,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定CFsCTGFmRNA的表达,WesternBlot法测定CTGF蛋白的表达。结果肝细胞生长因子能够在mRNA及蛋白水平上大部分抑制AngⅡ对CTGF表达的诱导。结论初步证实在心肌纤维化的过程中,HGF与CTGF是一对拮抗生长因子,HGF可能通过抑制CTGF表达的途径逆转心肌纤维化。