bFGF诱导兔眼视网膜下新生血管形成的实验研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导青紫兰兔视网膜下新生血管动物模型的方法及可行性。方法健康成年青紫兰兔40只，随机分为2组。第1组实验组兔眼视网膜下注入0．005％（wt／vol）bFGF50μl，第2组对照组兔眼视网膜下注入0．9％生理盐水50μl，对侧眼均作为空白对照，不行视网膜下注射。术后3d，1、2、3、4、6、8、12周分别行眼底检查、摄片、眼底荧光血管造影（FFA）和吲哚青绿血管造影（ICGA），并行眼球组织病理学检查。结果视网膜下注射后所有眼即见视网膜直径4～5PD的青灰色半球形隆起，实验组与对照组分别于注射后2周和1周后平伏。术后2～12周FFA造影可见实验眼于视网膜隆起处下方早期斑点状高荧光，后期荧光增强并融合扩大。ICGA显示FFA高荧光相应部位荧光染料积存。对照组眼FFA、ICGA造影检查均未见类似表现。病理检查结果显示：视网膜下注射bFGF后2～12周，实验眼视网膜感光细胞层下有新生血管形成。结论视网膜下注入bFGF能成功诱导青紫兰兔视网膜下新生血管形成。     

黄斑中心凹下脉络膜新生血管光动力疗法治疗后黄斑区对比敏感度变化

目的观察黄斑中心凹下脉络膜新生血管(CNV)光动力疗法(PDT)治疗前后对比敏感度(CS)的变化。方法回顾分析29例PDT治疗的患者32只眼治疗前以及治疗后2周、1、3、6个月、1年时视力、对比度视力、CS检查的临床资料。结果治疗后6个月时,视力稳定者占50%,提高者占40.9%,降低者占9.1%。平均高对比度视力均较治疗前有所提高。治疗后2周、3个月时,低频区CS与治疗前相比均有显著性差异(P=0.043、P=0.037)。6个月时,中频区间频率与治疗前比较有显著性差异(P=0.048),高频区间治疗前后均无改变。年龄以及光斑直径对CS无显著影响。结论PDT治疗黄斑中心凹下CNV短期内可改善患者的视力、对比度视力和CS,但是长期随访仍十分必要。     

玻璃体内注射雷珠单抗与康柏西普治疗特发性脉络膜新生血管的临床疗效对比

目的　对比分析玻璃体内注射雷珠单抗与康柏西普治疗特发性脉络膜新生血管（idiopathic choroidal neovascularization,ICNV）的临床疗效。方法　选取2016年1月至2018年6月我院收治的ICNV患者90例（90眼）,依据患者治疗情况分为雷珠单抗组及康柏西普组,每组患者各45例（45眼）。康柏西普组患者采取玻璃体内注射康柏西普0.05 mL进行治疗,雷珠单抗组采取玻璃体内注射雷珠单抗0.05 mL进行治疗。对两组患者治疗前及治疗3个月、6个月后最佳矫正视力、黄斑中心凹厚度以及治疗结束后不良反应发生率进行对比分析。结果　康柏西普组治疗前及治疗3个月、6个月后最佳矫正视力、黄斑中心凹厚度分别为0.34±0.10、0.60±0.25、0.80±0.20和（374.10±1.18）μm、（289.02±1.30）μm、（215.06±1.20）μm;雷珠单抗组分别为0.33±0.11、0.57±0.24、0.78±0.23和（373.55±1.15）μm、（288.97±1.23）μm、（215.11±1.17）μm。治疗前两组患者最佳矫正视力、黄斑中心凹厚度比较,差异均无统计学意义（均为P＞0.05）;治疗3个月、6个月后最佳矫正视力均高于治疗前,黄斑中心凹厚度均低于治疗前,差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。治疗不同时间后,康柏西普组患者最佳矫正视力、黄斑中心凹厚度与雷珠单抗组相差均不大（均为P＞0.05）。治疗结束后康柏西普组不良反应发生率为11.11%,雷珠单抗组为8.89%,两组不良反应发生率差异无统计学意义（χ²=0.274,P＞0.05）。结论　玻璃体内注射雷珠单抗与康柏西普治疗ICNV后,患者最佳矫正视力均提高,黄斑中心凹厚度变薄,且不良反应发生率降低。     

动脉粥样硬化斑块内新生血管与斑块稳定性的研究进展

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是引发心脑血管疾病的最重要的病理基础之一。传统观点认为AS斑块引起的动脉管腔狭窄是决定病情轻重的主要因素。最新研究表明,新生血管与AS斑块稳定性密切相关,AS斑块破裂而导致的急性冠脉综合征是引起重大心血管事件的主要原因之一。该文综述了AS斑块内血管新生与斑块稳定性的关联性,以及如何通过促进新生血管的成熟增强斑块稳定性。     

栓子携带的血管内皮细胞生长因子165在血栓闭塞性脉管炎中的研究

目的观察栓子携带的编码人血管内皮细胞生长因子165（vascular endothelial grow factor,VEGF165）的腺病毒（adenovirus,Ad-）载体对大鼠血栓闭塞性脉管炎下肢的生血管效应。方法用SD雄性大鼠72只,均分为6组,分别为正常组、造模组、栓子组、常规治疗组（Ad-VEGF165肌肉注射）,栓子携带Ad-VEGF165组,Ad-VEGF165组,应用月桂酸制作大鼠血栓闭塞性脉管炎动物模型后,股动脉内注入栓子携带的Ad-VEGF165,免疫组化检测基因导入后在缺血肌肉引起的效应。结果给药后栓子携带质粒治疗组及常规治疗组分别与对照组进行对比,CD34标记的微血管密度（Microvessel Density,MVD）和平滑肌肌动蛋白a（smooth muscle actin,a-SMA）阳性血管数量与肌肉数比均存在明显差异（F=8.21、6.06,F=20.66、15.04,P〈0.O5）,给药后1周栓子携带质粒治疗组与常规治疗组之间无显著性差异,但给药后14d栓子携带质粒治疗组及常规治疗组有统计学意义（F=6.00、6.92,P〈0.05）。结论Ad-VEGF能促进缺血肢体血管新生,而栓子携带的Ad-VEGF165生血管效应更为显著。     

两种缺氧模型对小鼠骨髓间充质干细胞中基质金属蛋白酶表达及其对促血管形成能力的影响

目的　观察物理和化学缺氧模型中小鼠骨髓间充质干细胞（ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗ-ｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ,ＢＭＳＣｓ）中基质金属蛋白酶１３（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ-１３,ＭＭＰ-１３）的表达及其对猴脉络膜-视网膜内皮细胞ＲＦ／６Ａ管腔形成能力的影响。方法　取Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠骨髓,培养鉴定ＢＭＳＣｓ。采用三气培养箱模拟物理缺氧及氯化钴（ＣｏＣｌ２）诱导化学缺氧。物理缺氧６ｈ、１２ｈ、２４ｈ和４８ｈ后检测ＭＭＰ-１３表达。选表达最高的处理时间,检测不同浓度ＣｏＣｌ２（０μｍｏｌ·Ｌ－１、１００μｍｏｌ·Ｌ－１、２００μｍｏｌ·Ｌ－１、３００μｍｏｌ·Ｌ－１及４００μｍｏｌ·Ｌ－１）处理后ＭＭＰ-１３表达。检测缺氧后ＢＭＳＣｓ中缺氧诱导因子-１α（ｈｙｐｏｘｉａ-ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｆａｃｔｏｒ-１α,ＨＩＦ-１α）表达及ＢＭＳＣｓ增殖能力,观察其条件培养基诱导的ＲＦ／６Ａ管腔形成情况。结果　细胞经鉴定符合ＢＭＳＣｓ特征。物理缺氧２４ｈ后,ＭＭＰ-１３蛋白表达量达高峰（３．１６±０．２４）,较常氧组（１．００±０．１２）增加３倍（Ｐ＜０．０１）。１００μｍｏｌ·Ｌ－１和２００μｍｏｌ·Ｌ－１ＣｏＣｌ２组（１．６０±０．０９、１．６４±０．２４）中ＭＭＰ-１３表达较常氧组（１．００±０．２０）均增加（均为Ｐ＜０．０５）,而３００μｍｏｌ·Ｌ－１和４００μｍｏｌ·Ｌ－１ＣｏＣｌ２组中ＭＭＰ-１３表达与常氧组相同或稍低。三气培养箱构建的和ＣｏＣｌ２诱导的缺氧环境下培养２４ｈ后,ＢＭＳＣｓ中ＨＩＦ-１α蛋白表达较常氧组（１．００±０．２３）明显增加,相对表达量分别为３．４０±０．２６和３．１２±０．１３（均为Ｐ＜０．０１）,而两种缺氧模型间无明显差异。在培养２４ｈ时,物理缺氧组（１．５３±０．０４）和化学缺氧组（１．３１±０．１４）均较常氧组（１．０４±０．１０）细胞增殖能力增强（均为Ｐ＜０．０５）,且物理缺氧促增殖效果更明显。三气培养箱模拟的物理缺氧组、ＣｏＣｌ２诱导的化学缺氧组和常氧组ＲＦ／６Ａ管腔形成总长度分别为（５５０６±３８０）μｍ、（５１０９±５５８）μｍ和（３１２０±３００）μｍ,三气培养箱模拟的物理缺氧组和ＣｏＣｌ２诱导的化学缺氧组较常氧组均明显增加（均为Ｐ＜０．０１）,而两种缺氧模型之间差异则无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论　ＣｏＣｌ２和三气培养箱均可建立缺氧模型,促进ＢＭＳＣｓ表达ＭＭＰ-１３,提高其促血管形成能力,提示缺氧可能调控ＢＭＳＣｓ表达ＭＭＰｓ进而影响新生血管发生发展。     

应用血啉甲醚的光动力学疗法治疗实验性虹膜新生血管

目的观察以国产血啉甲醚(HMME)为光敏剂,应用光动力学疗法(PDT)封闭实验性虹膜新生血管(INV)的疗效和并发症。方法应用氩离子激光封闭猴眼全部视网膜分枝静脉的方法建立INV模型。静脉注射HMME(5 mg/kg),用514 nm的氩绿激光照射,设定能量密度分别为107.46、143.28、275.22 J/cm23组,行虹膜彩像、虹膜荧光造影(IFA)、虹膜吲哚青绿造影(IICGA)及光镜和电镜观察疗效。结果PDT治疗后48 h,治疗区INV基本闭塞;ICGA显示基质层血管有不同程度的闭塞。PDT后3周,治疗区域新生血管仍闭塞,虹膜基质血管重新开放;非治疗区新生血管退行。光镜显示中能量组虹膜基质轻度萎缩,高能量组虹膜可见大量色素增殖。治疗组均未发生眼压升高。结论以HMME为光敏剂的PDT在一定时期内可有效封闭实验性虹膜新生血管,减少新生血管性青光眼的发生,但对虹膜基质有一定损伤。     

经瞳孔温热疗法治疗中心性渗出性脉络膜视网膜炎

目的 观察经瞳孔温热疗法(transpupillary thermotherapy,TTT)对中心性渗出性脉络膜视网膜炎(central exudative chorioretinopathy,CEC)的治疗效果。 方法 使用Iris 810 nm 半导体激光对29例CEC患者进行TTT治疗，采用1.2、2.0及3.0 mm光斑，能量80～300 mW，照射时间60 s。随访4～40周，通过视力、直接检眼镜检查、荧光素眼底血管造影(fundus fluorescein angiography,FFA)及吲哚青绿血管造影(indocyanine green angiography,ICGA)观察治疗效果。 结果 治疗后视力提高者8例，占28%；无变化者19例，占65％；视力下降者2例，占7%。12例患者症状有程度不同的改善，眼底检查病变减轻者10例。20例复查眼底血管造影的患者中，12例脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)明显消退、渗漏减轻。 结论 TTT对CEC有较好的治疗效果。 (中华眼底病杂志, 2002, 18: 184-186)     

利用基因芯片技术对大鼠角膜新生血管基因表达谱的研究

目的 运用基因芯片技术研究大鼠角膜新生血管的基因表达谱。方法40只SD大鼠在实验眼角膜缝线后第4d和第12d处死。用有5705条基因的Oligo芯片检测角膜组织的基因表达谱。结果缝线后第4d，5705条基因中，差异表达基因为57条，其中上调29条，下调28条（ratio〉4或〈0．25）。上调明显的基因有SCYA2、S100A9、MMP-3、TIMP-1、ILIR2等；下调明显的基因有GALE、GATM和GALDl等。缝线后第12d，差异表达基因为38条，其中上调34条，下调4条。上调明显的基因有MMP-3、MMP-12、MMP-13、TIMP-1、SCYA2、S100A9等。下调明显的基因有ALDH1A1等。第4d和第12d上调的基因明显多于下调的基因。结论角膜新生血管的形成是许多不同因子共同调控的结果。     

氪激光诱导的大鼠脉络膜新生血管模型研究

目的 探讨氪激光创建棕色挪威(brown norway,BN)大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)模型的可行性,为明确CNV的发生机制及防治研究奠定基础。方法 雄性BN大鼠33只(66只眼),取每只鼠一只眼作为实验眼,另一只眼为对照眼。用氪激光(波长为647nm)对大鼠实验眼视网膜进行光凝,激光功率、光凝斑直径和曝光时间分别为360mW、50μm及0．05s,每只眼10个光凝斑点。于光凝后3、7、14、21、28及56d行荧光素眼底血管造影(fundus fluorescein angiography,FFA)和吲哚青绿血管造影(indocyanine green angiography,ICGA)检查后处死动物,摘除眼球制作标本,进行组织病理学及电镜观察。结果 光凝后7d出现CNV,21d达高峰,造模成功率为76．0％,FFA检查显示典型圆盘状荧光渗漏,ICGA检查可见CNV充盈,光镜和电镜下均可见视网膜下CNV形成。CNV厚度自光凝后7—21d逐渐增加,之后CNV厚度变化不显著。结论 氪激光损伤可以创建BN大鼠脉络膜新生血管模型,成模时间短,持续时间长,成模率高。