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81.
应用聚合酶链反应(PCR)结合HpaⅡ限制性内切酶消化法(HpaⅡ-PCR)检测58例急性白血病(AL)患儿降钙素(CT)基因的甲基化状态。病例组待检细胞DNA经HpaⅡ消化后,再用两对CT基因特异性引物作PCR扩增,分别产生长度为566bp和1.4kb特异片段。急性淋巴细胞白血病阳性率71.4%(25/35),急性非淋巴细胞白血病78.2%(18/23)。敏感性达10-3。证明CT基因5′高度甲基化是白血病细胞克隆的特异标志。本课题受卫生部、四川省人民医院出国人员基金资助 相似文献
82.
转移是恶性肿瘤重要的生物学特征之一,其基因与分子调控机制是一个复杂的多步骤序贯过程。到目前为止总共发现7种肿瘤转移抑制基因:KA11、CD44、MAPK4、nm23-H、TIMPS、KISS1和BRMS1。转移抑制基因在体内直接抑制转移潜能,对于转移机制调节的研究具有重要意义。乳腺癌转移抑制基因(breast-cancer metastasis suppressor1,BRMS1)是2000年克隆的一种转移抑制基因。在几类肿瘤中具有抑制肿瘤转移的功能而不影响肿瘤发生,本就BRMS1的发现、结构、已进行的相关研究以及抑制肿瘤转移可能的机制做一综述。[第一段] 相似文献
83.
84.
瘦素(leptin)是从小鼠及人脂肪组织中分离并克隆出的肥胖基因蛋白,是由167个氨基酸组成的分泌性蛋白质类激素,具有降低食欲、减少能量摄入、增加机体活动、降低体重等作用.采用酶联免疫吸附测定(ELISA)和放射免疫法(RIA)检测瘦素,对肥胖和营养状态的预测及多囊卵巢综合征的诊断有一定意义. 相似文献
85.
目的:观察已转染双自杀基因的胃癌细胞和未转染双自杀基因的胃癌细胞在形态学及生长特性方面的差异性。
方法:实验于2005—03/2006—03在南方医科大学肿瘤研究所完成。质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK为南方医科大学珠江医院普外科保存。用感染复数为100时,将启动子融合基因腺病毒(Ad-KDR—CDglyTK)体外感染SCG7901细胞株。通过倒置荧光相差显微镜、光镜、透射电镜等技术观察转染基因的胃癌细胞的形态学变化。通过流式细胞仪检测细胞周期的变化.同时用四甲基偶氮唑盐方法进行生长曲线的测定。
结果:①腺病毒介导的KDR启动子驱动的双自杀基因对胃癌细胞体外培养的形态无明显影响。②已转基因的SCG7901细胞和未转基因的SCG7901细胞处于G1期,比率分别为(49.00&;#177;0.58)%,(51.02&;#177;0.91)%(t=1.862,P=1.12),处于S期比率分别为(16.20&;#177;0.36)%,(14.00&;#177;0.99)%(t=2.07,P=0.84),处于G2期比率分别为(34.60&;#177;0.96)%,(34.31&;#177;0.86)%(t=0.223,P=0.831)。(3)已转基因SCG7901细胞和未转基因SCG7901细胞具有类似的生长状态(F=0.042,P=0.838〉0.05)。
结论:已转染KDR启动子融合基因的胃癌细胞和未转染的胃癌细胞在形态及生长特性方面无显著性差异。 相似文献
86.
目的:探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因G196A住点多态性与抑郁症患者负性生活事件的相关性.方法:对85例抑郁症患者(抑郁症组)和158名健康人(对照组)进行BDNF基因G196A基因型检测和生活事件量表(life events scale,LES)评分,比较2组的结果,分析G196A位点多态性与负性生活事件的相关性.结果:抑郁症组的LES中总生活事件、负性生活事件、正性生活事件评分均高于对照组.抑郁症组G等位基因频率为70%(119/170)、A等位基因频率为30%(51/170);对照组相应为51.3%(162/316)、48.7%(154/316),2组比较差异有统计学意义(P<0.05).抑郁症组G等位基因频率与负性生活事件呈正相关(P<0.05,优势比为3.102,95%可信区间为1.118~8.609);A等位基因频率与负性生活事件呈负相关(P<0.05,优势比2.962,95%可信区间为1.038~8.451).结论:BDNF基因G196A位点G等位基因可能是抑郁症患者对负性生活事件敏感的遗传基础. 相似文献
87.
目的构建P^53与反义mdm2 cDNA序列真核表达载体,并探讨其在人黏液表皮样癌高转移细胞株Mc3细胞中的表达。方法应用分子克隆技术,将mdm2 cDNA序列反向插入到含有P^53基因序列pDOR—Neo中的P^53。基因序列下游,构成含有P^53基因与反义mdm2基因融合基因的逆转录病毒表达载体。经酶切分析鉴定后命名为pDOR—Neo—P^53-F mdm2并将重组载体通过脂质体转染Mc3细胞,通过G418筛选转染阳性细胞,并采用Westernblot方法检测P^53蛋白表达。结果酶切鉴定证实重组载体含有P^53与反义mdm2 cDNA片段,实验结果表明:转染后P^53蛋白(1.35±0.14)较对照组P^53蛋白(6.26±0.11)含量显著减低(P〈0.01),转染空载体P^53蛋白(6.24土0.12)与对照组比较无统计学差异(P〉0.05)。结论P^53与反义mdm2基因融合体真核表达载体构建成功,并表达野生型P^53蛋白和封闭mdm2基因,为今后进一步研究打下了基础。 相似文献
88.
聂飙 《中国组织工程研究与临床康复》2003,7(23):3252-3253
选择性增殖腺病毒已经发展成为一类抗肿瘤的基因治疗药物,增殖腺病毒现在成为基因治疗研究热点。增殖野生型腺病毒是第一个安全用于患者的药物,目标是达到最大的选择性和杀伤力,使其只在肿瘤中增殖。选择性增殖腺病毒作为生物治疗药物有几个优点:①增殖可溶解感染的肿瘤细胞,并扩散到邻近肿瘤细胞。②腺病毒溶解肿瘤细胞能释放肿瘤抗原,提呈给树突状细胞(DC)和T细胞进行识别,产生抗肿瘤免疫反应。③外源基因可以利用腺病毒本身的启动子和PolyA,有利于外源基因的插入。如果治疗基因和增殖病毒的优势都能达到的话,增殖病毒携带治疗基因的药物很可能将是临床最成功的基因治疗药物。 相似文献
89.
目的 :体外研究bcl- 2反义寡核苷酸对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响 ,旨在寻求提高肿瘤细胞放射敏感性的方法。方法 :(1)免疫组化、半定量RT -PCR法鉴定ASODN的有效性。 (2 )Giemsa染色、流式细胞术凋亡指数 (AI)、DNALadder检测细胞凋亡。结果 :(1)转染后 ,免疫组化结果示Bcl- 2蛋白表达降低 ;半定量RT -PCR结果显示bcl- 2mRNA表达较对照组明显减弱 (P <0 0 5 )。 (2 )转染后 ,Giemsa染色可见凋亡小体 ;流式细胞术结果显示转染后AI为 :6 6 0± 0 70 % ,明显高于对照组 1 79± 0 19% (P <0 0 5 ) ;DNALadder呈现具有凋亡特征的梯带。结论 :(1)本实验所设计的ASODN能有效地抑制bcl- 2基因的表达。 (2 )转染ASODN (bcl-2 )能够显著增加Hela细胞凋亡。进而有望通过转染ASODN提高肿瘤细胞的放射敏感性。 相似文献
90.
腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对血管内皮细胞的作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究腺病毒载体介导肝细胞生长因子(HGF)基因感染血管内皮细胞后在正常供氧、缺氧及缺氧后复氧的情况下细胞的凋亡情况。方法:将分离、培养的内皮细胞分为3组,分别给予M199(对照组)、HGF(HGF组)和HGF基因腺病毒载体(Ad-HGF组),分别在正常供氧、缺氧及缺氧后复氧3种情况下观察细胞的凋亡情况。结果:Ad-HGF组及HGF组细胞凋亡数均低于对照组(P〈0.01),Ad-HGF组与HGF组细胞凋亡数差异无显著性意义。结论:腺病毒载体介导HGF基因感染内皮细胞后能在缺氧情况下有效地阻止细胞凋亡。 相似文献