AAV-hVEGF165及AAV-TGFβ1转染兔椎间盘纤维环细胞的实验研究

目的探讨应用hVEGF165与TGFβ1基因逆转椎间盘退变的可行性。方法用分子克隆技术，从pcDNA3（＋）-AAV-hVEGF165获得AAV-hVEGF165cDNA，并克隆至AAV包装质粒pSNAV上，构建成pSNAV-hVEGF165的AAV重组质粒。经酶切及测序鉴定后，用脂质体介导pSNAV-hVEG165转染HEK293细胞和血管内皮细胞。荧光免疫组化方法检测hVEGF165蛋白，并用MTT法测定hVEGF165对血管内皮细胞增殖的影响。由本元正阳公司对pSNAV-hVEGF165进行AAV-hVEGF165包装。AAV-hVEGF165与AAV-TGFβ1联合转染退变的椎间盘纤维环细胞，Western blot检测hVEGF165与TGFβ1的表达以及纤维环细胞Ⅰ型胶原表达量的变化。结果经酶切鉴定及基因测序证实AAV包装质粒pSNAV-hVEGF165构建完成，荧光免疫组化显示hVEGF165蛋白表达，MTT法显示hVEGF165蛋白对血管内皮细胞增殖有促进作用。本元正阳公司包装出具有生物学功能的AAV-hVEGF165与AAV-hVEGF165构建成功。Western blot显示hVEGF165与TGFβ1在纤维环细胞中表达，AAV-hVEGF165与AAV-TGFβ1双基因联合转染的纤维环细胞Ⅰ型胶原表达量较hVEGF165与TGFβ1基因各自单独转染的细胞Ⅰ型胶原表达量明显增多。结论hVEGF165在体外能够协同TGFβ1促进退变纤维环细胞Ⅰ型胶原表达增加。     

结核分支杆菌rpoB基因突变与耐利福平的临床应用

目的：研究结核分支杆菌耐利福平（RFP）分离株rpoB基因突变情况并评价其应用价值。方法：采用聚合酶链反应一单链构象多态性（PCR—SSCP）方法对355株结核分支杆菌临床分离株（其中敏感株109株，耐RFP或含耐RFP株246株）rpoB基因进行检测，并对其中17株耐药株用双氧末端终止法进行测序分析。结果：以结核分支杆菌H37RV为对照，109株药物敏感株的rpoB基因均无突变，特异性100％；246株耐药株中，225株rpoB基因SSCP图谱异常，其敏感性91．5％。17株耐药株（其中SSCP异常11株，正常6株）PCR扩增产物经测序证实，11株在531位密码子TCG-TTG，4株在526位密码子CAC-TAC，1株在516位密码子GAC—GTC，1株未改变。结论：rpoB基因突变是耐RFP结核分支杆菌耐药性的主要分子机制；其最常见的突变位点是531位色氨酸和526位组氨酸，应用PCR—SSCP技术可快速检测结核分支杆菌对RFP的耐药性。     

哈尔滨市1996～2004年流行性脑脊髓炎流行分析

哈尔滨市自1984年开始应用A群流脑多糖体疫苗普种后,流行性脑脊髓膜炎（流脑）发病呈逐年下降趋势,进入20世纪90年代,发病率平均在1/10万以下,呈现出高度散发,未出现周期性流行.为了有效地控制流脑的流行,进一步做好流脑防治工作,现将哈尔滨市1996～2004年流脑流行情况分析报告如下.     

罕见的囊性A型胸腺瘤1例

病人男,56岁。体检时发现前上纵隔肿瘤10d。病人无咳嗽、咳痰、咯血、呼吸困难及胸痛等症状。查体:气管居中,胸廓无畸形,胸骨无压痛。胸部CT检查示“前上纵隔囊性肿块,大小约11cm×6cm×3cm,性质待查”。B超检查“肝、胆、胰、脾未见明显占位”。2004年12月,入院后5d在全麻下行“前上纵隔肿块切除术”,术中见肿瘤约11cm×6cm×3cm大小,呈囊性,肿瘤与左纵隔胸膜有轻度粘连,分离胸膜,完整切除肿瘤,切除标本送病理检查。病理检查:囊性肿物,11cm×6cm×3cm大小,表面灰白、灰黄、灰褐色,切面可见3个大小不等的囊,分别为5.5cm×3.2cm、4.5cm×3.…     

博来霉素A5病灶内注射治疗血管瘤样病变

目的探讨博来霉素A5病灶内注射治疗血管瘤样病变的方法和疗效.方法自1997年7月至2004年9月用博来霉素A5局部用药治疗血管瘤样病变患者28例,其中体表病变21例,口腔和咽喉部位病变7例,每3周1次.结果儿童17例真性毛细血管瘤注射2～3次后病灶完全消失,1例海绵状血管瘤注射3次后缩小70%;7例成人口腔和咽喉部位病变注射3次后病灶都完全消失,3例成人体表海绵状血管瘤注射3次后病灶都缩小60%～70%.结论博来霉素A5病灶内注射是治疗血管瘤样病变安全、有效的方法.     

金双岐治疗迟发型母乳性黄疸效果观察

目的观察金双岐治疗迟发性型母乳性黄疸的效果。方法随机将62例确诊为迟发型母乳性黄疸的患儿分为治疗组和对照组,对照组仅停用母乳,治疗组在基础上加口服金双岐。结果治疗组显效21例(65.62%),有效9例(28.12%),好转2例(6.25%);对照组显效10例(33.33%),有效14例(46.67%),好转6例(20.00%),治疗组显效率明显高于对照组(χ2=6.46,P<0.05);患儿治愈天数显著缩短(t=7.77,P<0.01)。结论金双岐可治疗迟发型母乳性黄疸。     

中药疣毒清口服治愈3例巨大型尖锐湿疣

巨大型尖锐湿疣又称Buschke-Lowenstein巨型尖锐湿疣,是一种发生于生殖器部位的尖锐湿疣,由许多生长迅速的尖锐湿疣聚合而成,因为经常发现有鳞癌合并发生,有人认为这实质上是一种疣状癌。由于它体型巨大,现有的各种局部处理方法,包括激光、冷冻、药物腐蚀等均无法将其去除,手术     

鸡抗内毒素卵黄抗体IgY的制备

目的：研究分别应用内毒素（LPS）、类脂A(LipidA)和大肠杆菌突变株15免疫鸡后其蛋黄中抗内毒素抗体IgY的产量、纯度、效价并筛选最佳免疫抗原。方法：分别应用内毒素（LPS）、类脂A(LipidA)和大肠杆菌J5突变株作为抗原免疫25周龄Leghom鸡，水溶法（WD）提取蛋黄中抗体IgY，双紫外光测定抗体含量，SDS-PSGE电泳检测抗体纯度，细胞酶联染色和ELISA检测抗体特异性、效价及筛选最佳免疫抗原。结果：3种抗内毒素IgY含量和效价分别为14.4mg/ml和1：12 800（J5）、10.61mg/ml和1：12 800（LPS）、9.26mg/ml和1：3200（LipidA），抗体纯度均为95％左右。结论：大肠杆菌突变株J5和内毒素（LPS）为最佳免疫抗原，免疫鸡后其蛋黄中抗内毒素抗体IgY的产量和效价最高。