盐酸莫沙必利中有关物质的HPLC测定

建立了HPLC法测定盐酸莫沙必利中有关物质.采用ODS 3色谱柱,甲醇-0.01mol/L磷酸二氢铵缓冲液(pH 5.0)(70:30)为流动相,检测波长274nm.检测限1ng.     

小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关基因表达的影响

目的:研究不同浓度小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关酶酪氨酸酶(tyrosinase,TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(tyrosinase related protein-1,TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(tyrosinase related protein-2,TRP-2)mRNA表达的影响。方法:采用CCK8检测细胞活力,选取小柴胡汤低、中、高质量浓度分别为0.1,1,2.5 g·L-1用于实验,逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)法检测B16细胞中TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA的表达。结果:与正常组比较,随着浓度的增加,小柴胡汤水煎液能够显著下调细胞TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA的表达(P0.05,P0.01)。结论:小柴胡汤对黑素合成的抑制作用除了通过直接抑制TYR活性外,还可通过下调酪氨酸酶家族其他成员TRP-1,TRP-2的基因表达、蛋白合成3方面实现其抑制黑素生成的作用,提示小柴胡汤对黑素生成的抑制可通过对酶蛋白转录后调节途径来实现。     

胃镜下局部注射大蒜素对进展期胃癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨胃镜下大蒜素局部应用对进展期胃癌的影响及作用机制。方法 进展期胃癌患者80例,胃镜及病理均证实为腺癌,分为两组;大蒜素组40例,术前48 h胃镜下病变处局部注射大蒜素,对照组40例局部注射生理盐水;手术切除胃癌组织,采用美国Becton Dickinson公司产的FACS-420型流式细胞仪检测,观察胃癌组织周期（G0/G1期、S期、G2/M期）各时相百分比、细胞凋亡率、增殖指数（proliferation index,PI）,以及胃癌组织细胞凋亡相关基因（Fas、Bax、Bcl-2）蛋白表达。结果 大蒜素组与对照组细胞凋亡率（%）分别为9.60±1.52、2.20±0.58, G0/G1期（%）分别为72.12±8.35、69.56±5.15, G2/M期（%）分别为9.54±3.20、13.20±3.05,PI值分别为27.80±8.35、30.40±5.15;两组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）;大蒜素组可增加凋亡促进基因Bax基因蛋白、凋亡始动基因Fas基因蛋白的表达（P＜0.05,P＜0.01）,降低凋亡抑制基因Bcl-2基因蛋白的表达（P＜0.05）。结论 本项研究初步证明胃镜下局部注射大蒜素能够抑制进展期胃癌组织细胞生长、增殖,并促进胃癌细胞凋亡。     

Update on medication abortion

This article provides an overview of medication abortion in the United States 6 years after the approval of mifepristone (RU486; Mifeprex; Danco Laboratories, LLC, New York, NY) by the US Food and Drug Administration (FDA). The adoption of mifepristone is considered in the context of epidemiologic data on abortion, abortion access, and the safety of abortion. The risks of medication and aspiration abortion are discussed in the context of abortion-related mortality, recent experience with obstetric and gynecologic infection with Clostridium sordellii, and the limits of scientific knowledge on the incidence of this infection in women. Innovative protocols studied since FDA approval of mifepristone are presented, and implications for clinical practice are discussed.     

高糖环境对人肾小球系膜细胞表达结缔组织生长因子及其受体蛋白的影响

目的 探讨高糖环境对体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC)表达结缔组织生长因子(CTGF)及其受体--低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的影响以及相应的信号机制。方法 以体外培养的HMC为研究对象,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ABC ELISA)测定正常糖组(NG组)、高糖组(HG组)和甘露醇组(MG组)培养液中CTGF、人磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)及LPR的浓度变化,分别观察高糖环境对系膜细胞CTGF蛋白表达、丝裂素激活蛋白激酶(MAPKS)信号通路的活化以及CTGF受体LRP表达的影响。结果 HMC本身存在基础水平的CTGF蛋白表达,HG组培养1d后,CTGF蛋白表达升高,峰值出现在第3天,自第4天开始下降;而NG组、MG组的CTGF蛋白表达未随时间发生显著变化;高糖环境下HMC外信号调节激酶(ERK)出现动态活化：1h即开始检测到pERK升高,峰值出现在第8至24小时,于48h内降至基础水平,而NG组、MG组在各时点均未能检测到pERK表达;加入ERK活化特异抑制剂PD98059后发现高糖环境对HMC表达CTGF蛋白增加的影响被抵消;另外,高糖环境未影响LRP的表达。结论 高糖环境下HMC表达CTGF蛋白增加,但未增加CTGF受体LRP的表达,初步明确CTGF的高表达是通过磷酸化激活ERK实现的。     

胃癌相关基因GCRG213真核表达载体的构建及其对胃癌细胞成瘤性的影响

目的:研究胃癌相关基因GCRG213正义、反义转染对胃癌细胞MKN45成瘤性的影响。方法:采用半定量RT-PCR及Western免疫印迹法比较转染不同质粒的MKN45细胞中GCRG213在mRNA和蛋白质水平上的表达差异。选取稳定转染不同质粒的MKN45细胞,绘制细胞生长曲线,平板克隆形成实验、裸鼠移植瘤实验分析转染细胞成瘤性。结果:平板克隆形成实验显示转染了GCRG213正向克隆的MKN45细胞其细胞克隆形成数量高于转染空载体的细胞,而转染了GCRG213反向克隆的MKN45细胞其细胞克隆形成数量低于转染空载体的细胞。在裸鼠体内进行的转染细胞的成瘤性实验可见,转染了GCRG213正向克隆的MKN45细胞在裸鼠体内成瘤性高于转染空载体的细胞,而转染了GCRG213反向克隆的MKN45细胞在裸鼠体内成瘤性低于转染空载体的细胞。结论:胃癌相关基因GCRG213可促进肿瘤细胞的生长,促进肿瘤细胞的成瘤性,GCRG213反义转染可抑制肿瘤细胞的生长,抑制肿瘤细胞的成瘤性。     

液相色谱-质谱联用鉴定他克莫司的有关物质

采用液相色谱-质谱（LC-MS）联用技术研究他克莫司的有关物质。采用Agilent Eclipse Plus-C₁₈（150 mm × 4.6 mm,3.5 μm）色谱柱,以0.01%甲酸水溶液-乙腈-甲基叔丁基醚为流动相体系,对他克莫司及其强制降解试验样品中的有关物质进行梯度洗脱分离;电喷雾正离子化-四极杆-飞行时间串联质谱法（ESI-Q-TOF/MS）测定各有关物质的母离子及碎片离子的准确质荷比和元素组成,并解析鉴定有关物质的结构。在所建立的条件下,他克莫司与其有关物质分离良好,检测并鉴定出35个主要有关物质,其中2个分别为他克莫司的互变异构体Ⅰ和Ⅱ（他克莫司的有效成分）,3个为美国药典收载的已知杂质,其余30个为新鉴定的未知有关物质。研究结果可为他克莫司发酵生产过程的质量控制提供参考依据。     

不同病因心房颤动患者卒中危险的评估

目的 本研究旨在比较不同病因的房颤患者左心耳血栓前状态、血栓形成以及临床缺血性脑卒中发生率的异同.方法 持续性房颤患者140例,按是否存在动脉粥样硬化相关疾病,分为伴有动脉粥样硬化相关疾病组(AS组)和非动脉粥样硬化相关疾病组(NAS组),应用经胸超声和经食管超声(TEE)技术,比较两组患者心脏结构和功能改变,检测患者左心耳血流速度,观察是否存在重度自发声学显影(SEC)、血栓以及临床是否存在缺血性脑卒中.结果 与NAS组比较,AS组患者左心耳重度SEC(71.6％ vs 47.0％)、左心耳血栓(35.1％ vs16.7％)和缺血性脑卒中(19.8％ vs 9.9％)的发生率显著增加(P＜0.05);两组间左室收缩功能、左房内径和面积、左心耳面积和血流速度均差异无统计学意义(P＞0.05).结论 伴有动脉粥样硬化相关疾病的房颤患者左心耳血栓前状态、血栓形成以及临床缺血性脑卒中的发生率显著高于非动脉粥样硬化相关疾病的房颤患者,提示对此类患者的处理需要独特的策略,为房颤患者抗凝治疗的个体化研究提供了依据.     

H_2O_2对人鼻咽癌细胞系CNE-2Z生长和增殖的影响

目的观察H2O2对人鼻咽低分化鳞癌细胞系CNE-2Z细胞生长、增殖的影响,并探讨其可能机制。方法应用H2O2体外诱导培养CNE-2Z细胞,用生长曲线、MTT及平板克隆形成观察H2O2对肿瘤细胞生长、增殖的影响,以流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡,以W estern B lot分析诱导培养后细胞中EGR-1、P53、P16、Cyc lin D1的表达。结果生长曲线、MTT及平板克隆形成实验表明不同浓度H2O2对CNE-2Z细胞生长、增殖具有明显抑制作用;流式细胞仪检测发现H2O2诱导培养后细胞周期进程减慢(G1期阻滞)、凋亡增加;W estern B lot检测发现CNE-2Z细胞缺失EGR-1、P16表达,H2O2诱导培养后可见EGR-1短暂高表达,但无P16表达,且EGR-1表达与P53表达水平呈正相关(P<0.05);Cyc lin D1表达与EGR-1表达无明显相关性(P>0.05)。结论人鼻咽低分化鳞癌细胞系CNE-2Z中EGR-1表达缺失,H2O2体外诱导培养后可见其一过性高表达,且其表达水平与P53表达相一致,两者可能在H2O2所致的细胞生长抑制及凋亡中起作用。一定浓度的H2O2在体外实验中显示出对CNE-2Z细胞具有生长抑制作用,并能诱导细胞凋亡。     

导管相关性血流感染患者原因分析与预防控制

目的 探讨导管相关性血流感染的原因及对策.方法 选择2007年3月-2010年3月共450例多途径中心静脉置管病例,其中,发生导管相关性血流感染者10例.10例分别从留置导管中和其他外周血管采血并且剪下导管尖端培养,均培养出同种细菌,1例培养出白色念珠菌.结果 本组病例从发现后24 h内即明确诊断导管相关性血流感染的患者8例（占80%）,就诊后2-4 d内明确诊断者2例（占20%）.其中内科感染例数为7例,感染率为1 75%;外科感染例数为2例,感染率为6 67%;其他感染例数为1例,感染率为5%.结论 应提前预防控制导管相关性血流感染,从而缩短住院时间,节约医疗资源,减轻患者痛苦.