SHP-1和JAK1基因在初治急性白血病患者中的表达

目的：探讨SHP-1和JAK1基因在初治急性白血病（AL）细胞的转录表达及其与初治AL患者化疗效果的关系。方法：采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测60例初治AL患者骨髓单个核细胞及20例健康人外周血单个核细胞中SHP-1和JAK1 mRNA的表达。结果：60例初治AL患者SHP-1和JAK1的mRNA表达阳性率分别为30%，100%；初治AL患者SHP-1 mRNA表达水平明显低于正常对照组（P<0.001），JAK1 mRNA表达水平较正常对照组略增高，但差异无统计学意义（P=0.180）,初治AL患者SHP-1 mRNA阳性组的诱导化疗完全缓解（CR）率为88.9%，阴性患者组CR率为54.8%，差异有统计学意义（P=0.005）。SHP-1与JAK1 mRNA表达呈负相关（P=0.046）。结论：SHP-1可能是白血病潜在的抑制基因，可望作为判断初治急性白血病患者疗效和预后的指标。     

Bronchiolar expression of aquaporin-3 (AQP3) in rat lung and its dynamics in pulmonary oedema

Aquaporins (AQPs) are water channel proteins that permit osmotically driven water movement. To determine their dynamics in pulmonary oedema, we examined the expression of mRNA and protein for AQP1, AQP3, AQP4, and AQP5 in the lungs of normal and thiourea-treated rats. In the thiourea group, lung water content increased significantly (vs. controls) with the peak at around 4 h. Semi-quantitative RT-PCR showed that AQP3 mRNA in the thiourea group rose significantly, peaking at around 4–8 h. The expression of AQP1, AQP4, AQP5, ENaC and CFTR mRNA each decreased significantly some time after the peak in lung water content. Immunoblot analysis showed that glycosylated AQP3 protein was increased 4–10 h after treatment. Expression of the other AQP proteins was not significantly altered, except for that of AQP4. Immunohistochemical examination revealed that AQP1 was expressed in endothelia, AQP3 in the basal cells of the large airways and in cuboidal cells in the bronchioles, AQP4 in the basolateral membrane of airway cells and AQP5 in type-I pneumocytes. Our results suggest that AQP3 is expressed not only in large airways, but also in bronchioles, and is related to water movement in pulmonary oedema.     

Macrophage mannose receptor in chronic sinus disease

BACKGROUND: The role of infectious agents in the onset and maintenance of chronic sinus disease is still not fully understood. Macrophage mannose receptor (MMR), an innate pattern recognizing receptor, capable of phagocytosis of invaders and signal transduction for proinflammatory mechanisms, might be of importance in immune interactions in chronic sinus disease. OBJECTIVE: We examined the MMR in sinonasal airway mucosa to evaluate its possible role in chronic rhinosinusitis (CS) and nasal polyposis (NPs). METHODS: Surgical samples from patients with sinonasal disease were investigated with real-time RT-PCR for quantification of MMR mRNA expression, and the presence and location of MMR-positive cells was analysed by immunohistochemistry. RESULTS: Quantification of MMR mRNA showed a statistically significant higher expression in NPs compared to CS without NP and controls. Immunohistochemistry revealed expression of MMR in all tissue samples; however, in NP we found an enhanced positive cellular staining including cell aggregates. CONCLUSIONS: We could demonstrate for the first time that the expression of MMR is significantly upregulated in NP compared to patients with CS without NP or turbinate tissue of controls. Macrophages expressing MMR, accumulated in cell aggregates in NPs, play a possible key role in pathogen-macrophage interaction in NP disease.     

实时荧光RT-PCR法和NASBA方法在呼吸道多病原检测中的应用评价

目的 评价实时荧光RT-PCR和核酸依赖性序列扩增法（NASBA）两种方法在呼吸道多病原检测中的应用价值。方法 收集北京地区急性呼吸道感染病例标本140份,分别采用实时荧光RT-PCR方法和NASBA方法对样本进行平行检测并对两种方法的病原检出限、重复性、检测一致性及检测时间等指标进行比较。结果 两种检测方法批内重复CV值均<5%,重复性较好;实时荧光RT-PCR方法对脊灰毒株核酸和H1N1病毒核酸最低检出限分别为5.62 CCID50 /0.1 ml（107 倍稀释）和10³倍稀释度,NASBA方法最低检出限分别为56.2 CCID50 /0.1 ml（106 倍稀释）和10²倍稀释。实时荧光RT-PCR灵敏度略优于NASBA方法。针对两种方法共同检测呼吸道病原体种类,实时荧光RT-PCR和NASBA方法检测阳性率分别为89.28%（125/140）、70%（98/140）。两种方法对甲型H1N1病毒、肠道病毒及新型冠状病毒的检测结果一致性达100%,对甲型流感病毒、甲型H3N2、副流感病毒1-4型的检测结果基本一致, Kappa 值范围为0.81~1;对冠状病毒229E/HKU1/OC43/NL63、鼻病毒、呼吸道合胞病毒和乙型流感病毒的检测结果一致性较好, Kappa 值范围为0.61~0.80;对人偏肺病毒的检测结果一致性差, Kappa 值仅为0.55。实时荧光RT-PCR方法检测时间为90 min,NASBA方法仅需40 min即可完成。 结论 实时荧光RT-PCR方法灵敏度较高,适合对大批量临床样本进行筛查;NASBA方法检测时间短,不易污染,适用于时限性强但对灵敏度要求不太高的应用场景,如临床上重症呼吸道感染者的快速检测。建议根据不同需求和应用场景,选择合适的检测方法和产品。     

c-kit在血液病中的表达

目的 :探讨原癌基因c -kit在血液病中表达的情况。方法 :用Ficoll分离液分离 ,收集骨髓单个核细胞。c -kit的表达采用RT -PCR法。结果 :在不同血液病中c -kit的表达情况不一 ,在急性髓细胞性白血病 (AML)为 5 7.8% ,急性淋巴细胞性白血病 (ALL)为 8.3 % ,骨髓增生异常综合征 (MDS)为 40 %。结论 :c -kit主要在AML中表达 ,提示c -kit表达是粒细胞的一个特异性标志。     

人类巨细胞病毒感染对人胚肺细胞HOXB1,HOXB5,HOXB6及HOXB9基因表达的影响

目的 :研究人胚肺 (HEL)细胞HOXB1,HOXB5 ,HOXB6及HOXB9基因的表达状态及人类巨细胞病毒(HCMV)感染对上述基因表达的影响。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术。结果 :①HEL细胞表达HOXB5和HOXB6 ,但不表达HOXB1和HOXB9;②HCMV感染后 ,HEL细胞HOXB6基因的表达上调 ,且被HCMV诱导表达HOXB9T ,而HOXB5基因的表达无明显改变 ,HOXB1基因仍旧不表达 ;③全反式维甲酸 (ATRA)能上调HCMV感染后HOXB9基因的表达 ,但对HCMV感染晚期HOXB6基因的表达有抑制作用。结论 :HCMV能诱导HOXB6和HOXB9基因表达异常 ,这可能在先天性HCMV感染导致胚胎发育畸形中起重要作用     

2020年宁夏新冠疫情期间SARS-CoV-2与常见发热呼吸道病原流行特征比较分析

目的 了解2020年宁夏新冠疫情期间SARS-CoV-2与常见6种发热呼吸道病原的检出情况、流行规律和感染特点,为新冠疫情常态化防控提供理论依据。方法 应用Real time RT-PCR技术对2020年1月20日至2020年2月16日期间宁夏疾病预防控制中心收检的COVID-19筛查样本进行SARS-CoV-2和Flu等常见发热呼吸道病原进行定性检测,并收集各病原阳性患者人口学特征资料。结果 529例COVID-19筛查样本中,SARS-CoV-2阳性检出率为13.23%（70/529）。对COVID-19筛查样本中180份符合条件的FRS病例样本进行6种其他呼吸道病毒病原检测,阳性检出率为12.78%（23/180）,其中检出率较高的病原为Flu和HRSV,阳性率分别为5.00%和2.78%。各时间段内SARS-CoV-2阳性检出率存在两个较为明显的峰值,其他呼吸道病毒总阳性检出率稳中有降。SARS-CoV-2阳性检出率男性和女性差异无统计学意义,41~ 60岁组及60岁以上组阳性率较高,分别为25.00%和24.39%,阳性病例在宁夏五市均有分布,银川市最多;其他呼吸道病原男性检出率显著高于女性,41~ 60岁组阳性率最高,其次为0~20岁组,阳性率分别为33.33%和12.20%,阳性主要集中于银川与中卫两市。结论 在常态下防控新冠疫情的背景下,应加强呼吸道传播病原快速筛查体系的建设以达到精准防控传染病的迫切需求。     

人急性白血病淋巴细胞HSP70及 HSP70 mRNA的表达研究

目的：检测急性白血病病人血淋巴细胞热休克蛋白70（HSP70）及其mRNA的表达。方法：ELISA法检测HSP70,RT－PCR法检测HSP70 mRNA。结果：化疗前急性白血病病人淋巴细胞HSP70及mRNA明显低于正常人;而化疗后,急性白血病病人淋巴细胞HSP70及mRNA明显高于正常人（P＜0．01）,结论：HSP70与急性白血病癌细胞关系密切,对癌细胞起保护作用。