低氧条件培养的PASMCs凋亡与p53表达变化

目的:观察低氧条件下离体培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的凋亡和p53表达的变化. 方法:采用组织块法原代培养大鼠PASMCs,应用Hoechst染色以及流式细胞术观察低氧对细胞凋亡的影响;采用免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察p53在低氧条件培养的PASMCs中的表达变化. 结果:正常条件下培养的PASMCs 和低氧条件下培养的PASMCs的凋亡变化不大,荧光显微镜下凋亡细胞计数后亦未见有统计学差异. p53在培养的大鼠PASMCs中有少量表达,低氧刺激可使其表达增高(P＜0.05). 结论:低氧未能诱导离体培养的PASMCs凋亡增加,但可以诱导p53在培养的大鼠PASMCs中的表达增加.     

瑞芬太尼对肝细胞缺氧复氧损伤保护作用的机制研究

目的 探讨瑞芬太尼对缺氧复氧的人肝细胞损伤的作用及其可能的作用机制.方法 将培养的人肝细胞分为5组,分别为正常对照(C)组、单纯缺氧复氧损伤(AR)组、瑞芬太尼(R)组、白屈菜红碱(CH)组和混合(R CH)组,n=6.C组正常培养,其余各组缺氧培养15 h,复氧5 h,然后收集细胞,进行:①肝细胞线粒体的丙二醛(MDA)含量测定;②用Annexin V/PI染色,于流式细胞仪下计数凋亡细胞的百分数;③提取RNA,以PKC mRNA为目的基因,进行RT-PCR,然后电泳,对条带的吸光值进行比较.结果 AR组的MDA含量明显高于C组,R组和CH组的MDA含量介于AR与C组之间(P＜0.05).AR组的肝细胞凋亡率明显高于C组,R组和CH组的肝细胞凋亡率介于AR与C组之间(P＜0.05).AR组的PKC mRNA转录量明显高于C组,R组和CH组的PKC mRNA转录量介于AR与C组之间(P＜0.05),R CH组的PKC mRNA转录量低于C组(P＜0.05).结论 瑞芬太尼对缺氧复氧的肝细胞具有保护作用,且可能与其抑制PKC mRNA的转录有关.     

纳洛酮治疗新生儿缺氧缺血性脑病的血清NSE动态变化与意义

目的 研究纳洛酮治疗新生儿缺氧缺血性脑病患儿血清神经元特异性烯醇酶(NSE)的动态变化及其临床意义.方法 将新生儿科住院的80例中重度新生儿缺氧缺血性脑病患儿随机分为常规治疗组和纳洛酮治疗组.纳洛酮治疗组在常规治疗基础上加用纳洛酮治疗,0.05～0.10mg/(kg·d),加入10%葡萄糖液30mL静滴,维持4～6h,疗程5～7 d.治疗前后分别检测血清NSE,同时以30例正常新生儿组作对照.治疗前、治疗1个疗程后和生后28 d各进行NBNA测定1次.结果 纳洛酮治疗组和常规治疗组治疗后血清NSE有显著下降,纳洛酮治疗组比常规治疗组下降更显著(P<0.05).纳洛酮治疗组NBNA评分明显好于常规治疗组(P<0.05).结论 纳洛酮治疗新生儿缺氧缺血性脑病具有十分重要价值,血清NSE是动态观察HIE治疗效果的一个指标.     

展望受体低氧预适应在原位肝移植中的应用

了解原位肝移植过程中无肝期门静脉淤血引起的肠道淤血性缺氧对肝完全缺血再灌注损伤的影响以及肠道缺氧低氧耐受的内源性保护机制。采用文献回顾的方法加以综述。对肝移植受体肠道黏膜屏障功能的保护可减轻移植肝脏再灌注损伤。受体低氧预适应可能为移植肝脏再灌注损伤的保护提供一条全新的途径。     

马齿苋乙醇提取物和水提取物对小鼠出血时间和耐缺氧存活时间的影响

[目的]探讨马齿苋乙醇提取物和水提取物对小鼠出血时间和耐缺氧作用的影响.[方法]采用小鼠断尾法测定小鼠的出血时间,应用常压耐缺氧法测定耐缺氧存活时间.[结果]马齿苋乙醇提取物和水提取物均延长小鼠出血时间;马齿苋乙醇提取物中、大剂量组和马齿苋水提取物大剂量组小鼠缺氧存活时间均明显延长.[结论]马齿苋乙醇提取物和水提取物均具有延长小鼠出血时间和耐缺氧存活时间的作用.     

培养大鼠皮层神经元缺氧损伤与蛋白激酶活化关系的研究

目的检测神经元缺氧后膜性PKA(蛋白激酶A)和PKC(蛋白激酶C)活性变化,以及它们的特异性抑制剂对神经元凋亡率的影响.方法建立培养的神经元"缺血"模型,然后用不同浓度的特异性PKA抑制剂Rp-cAMP和特异性PKC抑制剂Calphostin C预孵育培养神经元再进行"缺血"实验,用放射酶分析法测定神经元缺氧后的膜性蛋白激酶活性,各组缺氧神经元的凋亡百分率由TUNEL荧光试剂盒测定.结果随着神经元缺氧时间的延长,神经元膜性PKA和PKC活性均增加;随着Calphostin C浓度的增加,细胞凋亡率显著增加;相反随着Rp-cAMP浓度的增加,细胞凋亡百分率显著减少.结论①PKA和PKC信号转导通路均参与了缺氧神经元损伤;②缺氧后培养神经元PKA和PKC对凋亡的调控功能相反,提示在培养的缺氧神经元中PKA和PKC信号转导属于单相控制系统,可能二者在细胞中的比例决定着缺氧神经元的存亡.     

饮红茶对大鼠慢性缺氧性肺动脉高压的影响

慢性缺氧过程中，饮红茶的大鼠（HT组）平均肺动脉压（Ppa）为2.50±0.20kPa，肺血管阻力（PVR）为2824.80±658.69kPa·s~(-1)／L，均显著低于缺氧对照组（Ppa为2.97±0.25kPa，PVR为3763.46±529.62kPa·s~(-1)／L），而HT组肺血管对急性缺氧的反应性（22.50±6.16％）则显著强于缺氧对照组（10.65±3.80％）。结果表明，长期饮红茶可防止大鼠慢性缺氧性肺动脉高压的形成。     

植入脑源性神经营养因子载体细胞对幼鼠缺氧缺血性脑损伤后记忆的影响

目的 探讨脑内移植脑源性神经营养因子细胞对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后记忆功能的影响。方法 7d龄新生大鼠左侧颈总动脉结扎联合低氧吸入法制成缺氧缺血性脑损伤模型。损伤后即刻行左侧皮层内植入构建的稳定表达和分泌脑源性神经营养因子的大鼠面肌细胞,观察植入6w后大鼠记忆功能的变化。结果 脑源性神经营养因子载体细胞脑内移植6w后移植组动物主动回避反应习得和维持能力、一次被动回避反应的保持能力均显著提高。结论 脑源性神经营养因子载体细胞脑内移植可显著增强新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后记忆能力的恢复和发展。     

还原型谷胱甘肽对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤LDH、MDA的影响

目的研究乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤后乳酸脱氧酶(LDH)及丙二醛(MDA)的变化及还原型谷胱甘肽(GSH)对其影响。方法乳鼠心肌细胞随机分为5组:A组为正常对照组;B组为A/R组(缺氧2h,复氧1h);C、D、E组为GSH处理组,即首先加入GSH,分别使其终浓度为40、80、160mg.L-1,然后进行A/R,于复氧后测定各组培养液中LDH水平及细胞内MDA含量和细胞活性。结果与正常对照组相比,A/R组LDH、MDA水平均显著升高(P<0.01),细胞活性显著降低(P<0.01)。与单纯A/R组比,D、E组上述变化均明显减轻(P<0.01)。结论GSH对乳鼠心肌细胞A/R损伤具有保护作用,并具有浓度依赖性。     

The antiapoptotic effect of insulin against anoxia/reoxygenation injury in cultured cardiomyocyte of neonatal rat

Objective： To study protective effect of insulin against cardiomyocyte apoptosis in anoxia/reoxygenation （A/R） injury of neonatal rat. Methods： The model of A/R injury was finished through receiving anoxia for 2h and reoxygenation for 4h in cultured cardiomyocytes of neonatal rat. The cardiomyocytes were divided randomly into 3 groups： control group （CON）, anoxia/reoxygenation group （A/R） and insulin-treated group （INS）. At the end of reoxygenation of 4 hours, activities of lactate dehydrogenase （LDH）, contents of malondiaidehyde （MDA）, were assessed through spectrophotometric procedures, myocyte apoptosis were detected through TUNEL and DNA Ladder. Results： MDA, LDH, and Apoptosis Index were significantly decreased in INS group compared with A/R group （P〈0.01）. Conclusion： Insulin has a protective effect against A/R injury in cultured cardiomyocyte of neonatal rat; the protective mechanism may contribute to antiapoptosis of insulin.