低温等离子体促进人牙龈上皮细胞在钛表面的黏附

目的研究低温等离子体（NTAP）处理人牙龈上皮细胞（HGECs）后的生物学行为。方法将HGECs传代培养，待生长活性最佳的第3~5代细胞，消化重悬后经NTAP处理适当时间（0，10，20， 30，60 s）后，接种在钛盘表面，加入口腔角质细胞培养基（OKM），1%双抗、5%CO₂和37 °C孵箱条件下培养不同时间（4，12，24，48 h）贴壁生长，每组中各培养时间设置5个复孔。使用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）评估各组黏附细胞的数量；扫描电子显微镜（SEM）观察各组细胞在钛片表面的形态；实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测各组细胞层粘连蛋白α3（Laminin α3）、整合素蛋白β4（Integrin β4）和网蛋白（Plectin）黏附相关基因的表达情况以及Western blot观察各组细胞黏附相关蛋白表达的变化情况。结果在0~20 s内，随着NTAP作用时间的增加，细胞的黏附数量增加；但在20~60 s内，随着作用时间的增加，细胞的黏附数量逐渐减少：证明NTAP处理时间为20 s时最有利于HGECs在钛表面的黏附。CCK-8显示：在设定的培养时间下（20 s），随着培养时间延长，对照组和NTAP组细胞在钛表面的黏附数量增加。与对照组相比，在各培养时间点NTAP组细胞在钛表面的黏附数量更多（P<0.05）。SEM显示：NTAP组细胞在钛表面更明显地表现出不规则的多边形、突起与伪足较多及更大的细胞扩散面积。qRT-PCR显示：NTAP组细胞在钛表面的Lamininα3、Integrin β4和 Plectin黏附相关基因表达都高于对照组（P<0.05）。Western blot也证实：NTAP组细胞在钛表面上Laminin α3、Integrin β4和Plectin黏附相关蛋白的表达均高于对照组。结论HGECs受NTAP处理后，结果表明20 s的作用时间能最大程度增加细胞在钛表面的黏附数量和改变黏附形态，同时能够显著上调Laminin α3、Integrin β4和Plectin黏附相关基因和蛋白的表达，进而能促进HGECs对钛表面的生物封闭作用。     

牛初乳的免疫调节作用

目的验证牛初乳的免疫调节作用。方法根据卫生部保健食品功能学评价程序和检验方法的要求,对完达山牌牛初乳进行了迟发型变态反应、半数溶血值测定实验、碳廓清实验。结果①在迟发型变态反应中,高剂量组24h后的足跖肿胀度与普通奶粉对照组间差异有统计学意义(P0.01)。②在半数溶血值测定实验中,高剂量组与普通奶粉对照组的半数溶血值差异有统计学意义(P0.01)。③在碳廓清实验中,高、中剂量组的吞噬指数与普通奶粉对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论牛初乳能增强小鼠的细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞的吞噬功能,即具有免疫调节作用。     

不同方法和标本检测华氏巨球蛋白血症患者MYD88突变的初步探索

目的探索如何提高华氏巨球蛋白血症（WM）患者MYD88突变检测的阳性率和准确率。方法回顾性分析2017年6月至2021年6月上海交通大学医学院附属瑞金医院66例初诊WM患者MYD88突变检测结果，分析不同方法和标本检测MYD88突变的阳性率和准确率。结果66例WM患者中51例MYD88突变阳性，整体阳性率77％。根据检测方法分类：二代测序（NGS）和等位基因特异性PCR（AS-PCR）检测突变阳性率显著高于一代测序Sanger法（84％对71％对46％，P<0.05）。根据标本取材部位分类：淋巴结和骨髓标本检测突变阳性率显著高于外周血标本（79％对84％对52％，P<0.05）。NGS检测淋巴结、骨髓和外周血MYD88突变阳性率分别为86％、90％和67％。AS-PCR检测淋巴结、骨髓和外周血MYD88突变阳性率分别为78％、81％和53％。39例WM患者进行≥2次MYD88突变检测，以每例患者最终突变检测结果作为标准，判断不同方法和标本的准确率。淋巴结（18例）和骨髓（13例）NGS检测准确率显著高于外周血（4例）标本（100％对100％对75％，P<0.05）。淋巴结（15例）、骨髓（11例）和外周血（16例）AS-PCR检测准确率的差异无统计学意义（93％对91％对88％，P>0.05）。结论在检测WM患者MYD88突变情况方面，NGS或AS-PCR法优于Sanger法，淋巴结和骨髓标本优于外周血标本。     

儿童功能性消化不良与血清脑-肠肽水平的关系

目的基于脑-肠轴水平探究儿童功能性消化不良（functional dyspepsia，FD）与降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide，CGRP）、摄食抑制因子（nesfatin-1）及生长激素释放肽（ghrelin）等脑-肠肽水平的关系。方法回顾性选取2019年11月至2020年12月就诊于中国医科大学附属盛京医院FD患儿38例纳入FD组，另选取健康儿童34例纳入健康对照组。采集两组患儿的血清标本，应用酶联免疫吸附测定法分别测定两组儿童CGRP、ghrelin及nesfatin-1的血清水平并进行比较。同时对FD患儿FD症状进行评分，采用Spearman秩相关分析症状评分与脑-肠肽血清水平的相关性。结果FD组患儿血清nesfatin-1和CGRP水平均高于健康对照组（P<0.05）；两组血清ghrelin水平差异无统计学意义（P>0.05）。nesfatin-1血清水平与早饱症状评分呈正相关（r_s =0.553，P<0.001），与FD总评分未见明显相关性（r_s =0.191，P=0.250）；CGRP血清水平与腹痛症状评分呈正相关（r_s =0.479，P=0.002），与嗳气症状评分呈正相关（r_s =0.619，P<0.001），与FD总评分呈正相关（r_s =0.541，P<0.001）。结论CGRP及nesfatin-1在FD的病理生理过程中可能发挥重要作用。     

速效抗晕胶囊各组分毒性相互作用研究

目的 观察速效抗晕胶囊的3种组份硫酸右旋苯丙胺、茶苯海明和干姜提取物的毒性相互作用类型,评价药物的安全性.方法 用综合计算法评价速效抗晕胶囊3种原料硫酸右旋苯丙胺、茶苯海明和干姜提取物灌胃的小鼠急性半致死剂量(LD50),测试硫酸右旋苯丙胺、茶苯海明和干姜提取物两两及三者按组方比例联用的小鼠急性毒性LD50,用Finney法评价药物联用毒性相互作用的类型.结果 灌胃给药后ICR小鼠的硫酸右旋苯丙胺、茶苯海明及干姜提取物LD50分别为154.0、627.6 mg/kg及大于24 g/kg,硫酸右旋苯丙胺-茶苯海明、硫酸右旋苯丙胺-干姜提取物、茶苯海明-干姜提取物、硫酸右旋苯丙胺-茶苯海明-干姜提取物按组方比例联用的LD50分别为529.9、1834.0、110.4、1043.3 mg/kg;Finney法评价上述组合联用后毒性相互作用的Q值分别为0.93、0.87、1.10、0.88,速效抗晕胶囊3组份的4种组合毒性相互作用类型均为相加作用.结论 组成速效抗晕胶囊的硫酸右旋苯丙胺、茶苯海明和干姜提取物的毒性相互作用的类型为毒性相加作用,无协同增加药效的毒性现象.     

术前CEA、CA19-9和CA50的表达水平与结直肠癌临床病理特点的相关性研究--附1 340例病例分析

目的分析手术前血清CEA、CA19-9和CA50在结直肠癌患者中的表达情况,研究其在不同肿瘤临床分期中的表达差异,及其与临床病理学特点的相关性。方法回顾分析2000年1月~2004年9月于肿瘤医院接受治疗的结直肠肿瘤病例1340例,术前采用放射免疫法测定血清CEA、CA19-9和CA50水平,术后综合术前影像学检查、术中探查结果和术后组织病理学检测进行临床分期,应用SPSS12.0统计软件进行相关性分析。结果在1340例患者中,有59例为外院手术后复发或者转移的患者,另外的1281例患者均为初治病例。其中结直肠癌患者1327例。CEA、CA19-9和CA50检测阳性率分别为25.9%、22.3%和22.8%,同手术性质(根治性/姑息性)和脉管侵犯等临床病理指标相关。CEA、CA19-9和CA50在不同肿瘤分期中表达差异显著,主要在D期患者和复发转移患者中出现高阳性率。CEA在粘液腺癌和腺癌组织中表达差异显著。三个指标的表达和患者性别无关。结论CEA、CA19-9及CA50和肿瘤的临床分期密切相关,其阳性表达提示合并淋巴结或者脏器转移可能,是预后不良指标。     

视网膜母细胞瘤Rb50细胞株VEGFR-3表达的研究

目的:研究视网膜母细胞瘤细胞株VEGFR-3的表达,探讨视网膜母细胞瘤自身增殖的机制.方法:选择Rb50细胞株,通过S-P免疫组化法、RT-PCR法及PCR产物琼脂糖凝胶电泳等方法,研究Rb50细胞株VEGFR-3的表达情况.结果:S-P免疫组化法呈阳性结果,表明Rb50细胞株有VEGFR-3的表达,RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳表明Rb50细胞株有较高水平VEGFR-3 mRNA的存在.结论:视网膜母细胞瘤细胞株有VEGFR-3的表达,表明VEGFR信息通路对视网膜母细胞瘤生长、浸润的影响,除了与促进肿瘤血管及淋巴管新生,改善肿瘤组织微环境相关外,还与促进肿瘤细胞自身增殖有关.     

等辐射法分析结肠镜麻醉中丙泊酚与依托咪酯的药物相互作用

目的采用等辐射分析法研究结肠镜麻醉中靶控输注（TCI）丙泊酚与依托咪酯两药之间的相互作用。方法选择门诊待做无痛结肠镜检查患者158例,随机分成丙泊酚组（P组）、依托咪酯组（E组）、丙泊酚一依托咪酯复合组（C组）3组,采用序贯法确定各组病例数。麻醉诱导前各组以序贯方式静脉TCI丙泊酚、依托咪酯及两药复合药物。病人睫毛反射消失时即开始结肠镜检查,测定P、E、C组半数血浆有效浓度值（EC50）,采用等辐射分析法分析二者之间的相互作用。结果P组EC50值为4．15ug/mL,其95％可信区间为3．5—4．8ug／mL;E组EC50值为400ng/mL,其95％可信区间为370—425ng／mL;丙泊酚复合依托咪酯靶控输注麻醉用于结肠镜检查,其EC50分别降为1．28／220,其EC50比值总和为0．86,位于95％CI左侧,P〈0．05。结论经等辐射分析法证实,丙泊酚与依托咪酯在结肠镜TCI麻醉时麻醉效应呈协同作用。     

三白草不同药用部位不同提取物的急性毒性研究

目的探讨三白草提取物对小鼠急性毒性,评价其安全性。方法采用健康昆明种小鼠,灌胃给药三白草不同药用部位不同提取物,三白草地上部分和根茎的95%乙醇提取物给药剂量范围分别为40.00～12.66 g/kg和4.50～1.42 g/kg,观察小鼠的活动和毒性反应,采用改良寇氏法测定半数致死量（LD50）;采用组织切片法观察小鼠的病变部位。结果三白草95%乙醇提取部位为三白草主要毒性部位,而挥发油和水提物基本没有毒性;三白草地上部分和根茎部分95%乙醇提取物的小鼠LD50分别为17.15 g/kg和3.15 g/kg;病变部位为肝细胞轻度变性,而肾脏、胸腺及大脑等其他脏器各组均未见明显病变。结论三白草95%乙醇提取物具有一定的毒性,临床应用时应予以重视。     

健脾补土法组方含药血清对体外嗅鞘细胞低氧/复氧损伤模型P65、P50及磷酸化IκBα表达的影响

目的：探讨健脾补土法组方含药血清对体外嗅鞘细胞低氧/复氧损伤模型核因子KB（nuclear factor-kappa B,NF-KB）的亚单位P65、P50及NF-KB抑制蛋白（P-IκBα）表达的影响。方法将原代培养的嗅鞘细胞分为5组：正常血清对照组、正常血清+低氧组、低氧+依达拉奉含药血清组、低氧+健脾补土法组方含药血清组、正常血清+低氧+NF-KB抑制剂/抗氧化剂（PDTC,50μmol/L）组,采用微需氧袋低氧/复氧的方法诱导嗅鞘细胞形成脑缺血再灌注损伤样模型,用Western blot法检测嗅鞘细胞胞浆P65、P50、P-IκBα和胞核P65、P50的含量。结果与正常血清对照组比较,正常血清+低氧组胞浆和胞核P65、P50,胞浆P-IκBα表达均显著升高,差异有统计学意义（P<0.01）;与正常血清+低氧组比较,低氧+依达拉奉组、低氧+健脾补土组、正常血清+低氧+PDTC组、低氧+健脾补土+PDTC组胞浆和胞核P65、P50,胞浆P-IκBα表达均降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论健脾补土法组方能通过抑制嗅鞘细胞缺氧/复氧损伤后P65、P50、P-IκBα的过度表达,对NF-κB通路的活化具有抑制作用。