淋巴细胞恶性疾病HTLV-Ⅰ抗原及抗体的测定分析

本文以间接免疫萤光法测定96例淋巴细胞恶性患者血清中抗人T细胞白血病病毒Ⅰ型(HTLV—1)抗体。其中,80例急性淋巴细胞白血病;12例非何杰金氏淋巴瘤;4例慢性淋巴细胞白血病。发现一例成人抗HTLV—1抗体阳性,抗体滴度1:80,阳性率1.04％。並在培养细胞中检出HTLV—1抗原阳性细胞,前后两次阳性率分别为1.7～1.5％(P>0.05)。确诊病人已感染本病毒,提示HTLV—1已传入江西。认为测定HTLV—1抗原比抗体更重要,可用于早期确诊及游行病学调查。     

ANAE染色检测正常与照射后小鼠外周血和脾脏淋巴细胞亚群的变化

本实验建立了小鼠脾细胞酸性α醋酸茶酯酶(ANAE)细胞化学染色方法。并采用ANAE染色方法检测了经羊红细胞(SRBC)免疫后的C57BL/6小鼠外周血及脾脏淋巴细胞染色结果,并对ANAE~+细胞进行了颗粒分型。结果表明,外周血中ANAE~+细胞数为69.0±5.4％,其中斑点型占54.5±5.0％,分散型占14.5±4.6％。小鼠脾脏ANAE~+细胞为43.1±12.1％,其中斑点型占35.7±10.6％,分散型占7.4±2.9％。同时观察了小剂量γ射线照射对小鼠外周血及脾脏淋巴细胞ANAE染色的影响,结果在24.4mGy至122.0mGy剂量范围内未见淋巴细胞亚群有明显变化。     

细胞因子释放综合征的发病机制及诊断分级与处理方案

【摘要】 嵌合抗原受体T细胞治疗(CAR-T)作为近年来肿瘤治疗的新方法,在血液肿瘤中取得了令人惊喜的结 果。细胞因子释放综合征(CRS)是免疫治疗,尤其是C AR-T治疗的一种最常见不良反应,临床症状多样、发生率高,严 重者可造成多器官功能衰竭甚至危及患者生命。CRS的发病机制目前仍不清楚,其发生及严重程度与细胞因子如匂细 胞介素-6等升高、血管内皮激活相关。及早诊断及治疗CRS具有重要的临床意义。托珠单抗及糖皮质激素是目前控制 CRS的主要药物,合适时机应用是控制CRS的关键。     

阻断Kupffer细胞TIM-4诱导iTreg细胞的产生影响小鼠肝移植免疫耐受

目的 探讨阻断Kupffer细胞(Kupffer cells,KCs)T细胞免疫球蛋白黏蛋白4(T-cell immunoglobulin and mucin-domain-containing molecule 4,TIM-4)诱导小鼠原位肝移植术后iTreg细胞的产生及其相关机制.方法 建立小鼠原位肝移植急性排斥反应模型,分为sham组、control mAb组、TIM-4 mAb组.流式细胞仪检测KCs活化,Western blot检测肝脏TIM-4表达,TUNEL检测肝细胞凋亡指数(apoptotic index,AI).提取KCs,激光共聚焦检测KCs TIM-4表达,将KCs和提取的初始CD4+T细胞进行共培养,激光共聚焦检测Kupffer细胞TIM-4表达,分为control组、control mAb组以及TIM-4 mAb组;CFSE检测CD4+T细胞增殖,流式细胞仪检测CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞,ELISA检测IL-4、IL-6、IL-13水平,Western blot检测STAT6表达.建立小鼠移植模型,分为3组:iTreg组移植模型注入iTreg细胞(预先用TIM-4 mAb处理的TIM-4+ KCs与初始CD4+T细胞共培养所诱导),sham组和单纯肝移植组(LT)注入相应的PBS作为对照,检测各组AST、ALT、TBIL水平,HE染色评价肝组织排斥活动指数(rejective activity index,RAI),观察小鼠生存率.结果 肝移植术后24、48、72 h KCs的活化分别为15.9％、21.6％、28.3％,术后1、3、7 dTIM-4蛋白表达水平明显高于sham组(P＜0.05);control mAb组AI值(29.23 ±2.56)明显高于sham组和TIM-4 mAb组[(0.40±0.49),(11.04 ±2.28),P＜0.05].KCs与CD4+T细胞共培养后,control、control mAb以及TIM-4 mAb组CD4+T细胞的增殖率分另别为32.5％、31.6％、17.2％,CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞分化分别为12.4％、13.9％、28.1％,共培养上清液TIM-4 mAb组IL-4、IL-6、IL-13分泌水平明显低于control mAb (P＜0.05),且加入TIM-4 mAb明显降低了与TIM-4+ KCs共培养的CD4+T细胞p-STAT6蛋白表达(P＜0.05),外源性加入IL-4可明显增高CD4+T细胞p-STAT6蛋白的表达(P＜0.05).移植模型注入iTreg细胞,iTregz组肝功指标明显好转,与LT组比较差异有统计学意义(P＜0.05).肝组织病理学检查,iTreg组RAI平均得分为(3.97±0.67),明显低于LT组[(8.47±0.90),P＜0.05],且iTreg组小鼠平均存活时间延长.结论 阻断KCs TIM-4能够抑制初始CD4+T细胞IL-4/STAT6信号通路的激活,从而诱导更多iTreg细胞的生成,致使宿主对移植物产生免疫耐受.     

严重烧伤大鼠精氨酸治疗的实验研究

为探讨精氨酸在严重烧伤治疗中的意义,采用大鼠30%TBSAⅢ度烧伤模型,观察并分析了严重烧伤大鼠外周血 Th/Ts 比值的变化及精氨酸对该变化的调节作用和对大鼠存活率的影响。结果表明:①严重烧伤后第3天起即有 Th/Ts 比值的下降,第10天下降最为明显。②精氨酸能防止烧伤后 Th/Ts 比值下降,这种作用在伤后第5天起就比较显著。③精氨酸能提高伤后动物的存活率。提示严重烧伤后补充精氨酸是增强机体免疫力和抗感染能力,提高存活率的有效的治疗手段。     

脑胶质瘤免疫治疗进展

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性脑肿瘤类型,也是最具破坏性的肿瘤之一。经手术治疗、放射治疗及化学药物治疗等综合治疗后,其生存期仍然很短。近年来癌症免疫治疗方法在治疗实体肿瘤中取得巨大成功,然而在脑胶质瘤治疗中的应用尚不普遍。本文就脑胶质瘤的免疫治疗以及研究进展进行综述。     

γ射线诱发培养淋巴细胞TCR基因突变的剂量-效应关系

目的　探讨γ射线诱发培养淋巴细胞T细胞受体 (TCR)基因突变的剂量 效应关系。方法　以不同剂量 (0～ 4 0Gy)的γ射线照射新鲜分离的健康成人外周血淋巴细胞 ,植物血凝素脉冲式刺激 2h后 ,用白细胞介素- 2培养 7d ,用单克隆抗体直接免疫荧光标记流式细胞术检测TCR基因突变频率 (TCRMF)。应用SAS统计软件包编写的程序进行辐射剂量 效应曲线的拟合和筛选。结果　培养 7d后 ,TCRMF (10 -4)随照射剂量D (Gy)的增加而增高 ,最佳拟合曲线为二次多项式模型 ,其方程式可描述为 :TCRMF =2 . 74+ 6. 0 5D + 7 60D2 (F =3 62. 3 7 16,P <0 . 0 1,经校正的R2 =0 . 9999)。结论　TCR基因突变作为一种有潜力的生物剂量计可能用于近期辐射照射生物剂量的估算。     

利用神经网络集成预测MHC-Ⅰ类分子结合肽

目的：利用神经网络集成（NNE）预测MHC-Ⅰ类分子结合肽。 方法： 基于HLA-A*0201编码的MHC-Ⅰ类分子结合肽数据库（含有628个9聚物）及其结合能力分类，利用NNE分别对具有无、低、中和高4类亲合性的结合肽进行分类预测；同时还进一步利用T细胞真实表位集（含50个表位）评估了NNE的预测性能。 结果： 集成数为12的NNE对上述分类的平均预测命中率可达0.8,而且NNE对潜在T细胞表位的预测能力也较高，约84%的真实表位归于高和中等亲合性的潜在抗原肽一类。 结论： 可以利用神经网络集成预测MHC-Ⅰ类分子结合肽，并进而预测相应的T细胞表位。经适当修改，NNE预测工具可扩展为能涵盖任意长度的Ⅰ类分子结合肽甚至可扩展到Ⅱ类分子结合肽的预测。     

硼替佐米与吡柔比星协同抑制T细胞淋巴瘤Hut-78细胞增殖的体外研究

 目的　探讨硼替佐米（BTZ）对人类皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞系的细胞毒作用及其与吡柔比星（THP）联合应用的抗肿瘤效果。方法　采用MTT法观察BTZ、THP单药及两药联合不同给药顺序对Hut-78细胞增殖的抑制作用,利用中效方程分析两药是否存在协同效应。结果　BTZ、THP单药均能有效抑制Hut-78细胞的生长,且呈时间和剂量依赖性,培养48 h的半数抑制浓度分别为8.53 nmol／L和2515.27 μg／L。两药联合具有显著的抗肿瘤活性,当增殖抑制率＞50 %时,THP序贯BTZ呈现拮抗效应,而BTZ与THP同时及BTZ序贯THP均具有协同效应,后者的抗肿瘤作用更为显著。结论　BTZ单药及其与THP联合体外可有效抑制T细胞淋巴瘤细胞增殖。BTZ是一种很有前景的治疗T细胞淋巴瘤的靶向药物,为BTZ与THP联合治疗T细胞淋巴瘤的临床研究提供了实验依据。