A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

计算机X线摄影适宜照射线量的探讨

目的以噪声的频率特性评价计算机X线摄影系统(computed radiography, CR)的适宜曝光量.方法在相同摄影条件下获得中速 CaWO4屏-Fuji片组合照片和CR照片,以此为基础,改变mAs,获得不同照射剂量下的CR影像,经相同的后处理条件输出它们的CR照片.用显微密度计依次对这些照片进行扫描,每张获得10万个密度值,作为离散随机信号来处理,用快速傅立叶变换计算威纳频谱(Wiener spectrum, WS),测试CR照片噪声的WS与中速CaWO4屏-Fuji片组合的照片噪声WS值相等的曝光量值.结果 (1)在照射剂量均为5.61μGy、照片密度均为1.0的情况下,在空间频率(ω)=0.1 LP/mm处,CR系统的WS值为 23.1×10 -6 mm2,屏-片系统的为20.1×10 -6 mm2;在ω=0.5 LP/mm处,CR系统的WS值为 9.73×10 -6 mm2,屏-片系统的为8.41×10 -6 mm2 .(2)当ω=0.1 LP/mm时,照射剂量为5.61μGy的CR照片的WS值分别是照射剂量为1.40、2.80、8.76、13.67、21.11μGy CR片的0.53、0.75、1.14、1.44、1.80倍;当空间频率为0.5 LP/mm时,照射剂量为5.61μGy的CR片的WS值分别是照射剂量为1.40、2.80、8.76、13.67、21.11μGy CR片的0.40、0.58、1.26、1.47、2.16倍.(3)在ω=0.5 LP/mm时,与照射剂量为5.61μGy的屏-片组合有相当的噪声水平的CR照片照射剂量大致为7.70 μGy左右.结论相同摄影条件下CR照片的噪声要比中速 CaWO4屏-Fuji片组合的大;随着照射量的增加CR系统总WS将减小,噪声下降;如想获得和屏-片相同噪声的影像,应适当增大CR系统的照射量.     

开胸术后肺炎、肺不张防治体会

随着麻醉及胸外科技术的发展，胸部手术量越来越大，胸外病人围手术期的监护及治疗有了巨大进步，但胸部术后并发症仍是胸外科领域的常见并发症和重要课题。注意肺部并发症尤其是肺炎、肺不张的防治，能明显改善病人的预后。     

大庆地区青少年发育过程中胫骨超声骨量变化的研究

青少年的发育是全社会和家庭普遍关注的问题。青少年胫骨超声骨量测定是涉及解剖学、生理学、病理学、免疫学、声学、力学、分子生物学、临床医学等多学科的基础问题，是当前生命科学中的重大理论问题之一。因此了解青少年发育过程中不同阶段人群骨量的变化情况，从而进一步为在不同生长发育时期，家庭和社会根据不同情况给予不同的营养和体能训练提供科学的理论依据。     

抗戊型肝炎病毒重组蛋白单克隆抗体的制备和初步应用

目的:制备抗-戊型肝炎病毒的单克隆抗体,并将其用于分析戊型肝炎病毒不同毒株结构蛋白的抗原表位。方法:采用来自墨西哥株(Mexicanstrain)的戊型肝炎病毒重组蛋白(p166Mex)免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经酶联免疫吸附试验(ELISA)法筛选阳性克隆,并将获得的单克隆抗体与戊型肝炎病毒缅甸株(Burmastrain)和美国株(USAstrain)的重组蛋白(p166Bur、p166US)进行交叉反应测定。结果:最终获得4株能稳定分泌抗-p166Mex的杂交瘤细胞株,即D8G10、E5E12、D4A3、B7E6。其中D8G10,E5E12和B7E6细胞株的培养上清液,还能分别与p166Bur和p166US重组蛋白发生阳性反应。结论:利用已获得的抗-p166Mex单克隆抗体,初步确定3种不同的戊型肝炎病毒重组蛋白(p166Bur、p166US、p166Mex)含有一种共同的抗原表位。     

一阶导数光谱法测定小儿速效感冒冲剂中咖啡因的含量

目的：建立小儿速效感冒冲剂中咖啡因的含量测定方法。方法：样品经碱化，氯仿提取分离后，再以283nm为测定波长采用一阶导数光谱法测定，消除其他组分的干扰。结果：在6.72-15.12μg/mL浓度范围内线性关系良好（r=0.9998)，平均回收率为99.65%,RSD为0.60%。结论：该测定方法简便，准确，结果满意。     

肌注治疗量地西泮致死亡原因分析

地西泮是临床医生常用的镇静剂 ,使用过量或不当 ,会引起不良后果 ,但常用量下引起死亡的案例未见报道 ,作者在工作中遇到 2例肌注地西泮 10ｍｇ后在睡眠中死亡 ,现介绍如下 ,供同行参考。1　病例介绍患者 1,男 ,4 1岁 ,工人 ,既往健康 ,在矿井下不慎撞击伤 ,胸闷不适 ,无咯血 ,左膝 5 0ｃｍ× 2 5ｃｍ皮擦 ,血压、脉搏、呼吸无异常 ,Ｘ线片示骨无损伤。用消炎止血药 ,嘱卧床休息 ,当外伤后 5小时一觉醒来 ,起床排尿 ,突感头晕 ,恶心 ,并出冷汗 ,查血压 12 0 / 70ｍｍＨｇ ,脉搏 70次 /ｍｉｎ ,呼吸稍快 ,胸部听诊无明显异常 ,又嘱卧床少…     

晕厥患儿84例诊断与病因分析

晕厥(Syncope)是指由于一时性广泛性脑供血不足,导致大脑皮层高度抑制而引起的短暂的意识丧失,是儿科较为常见的一种病症。据美国流行病学调查表明,约有15%的儿童有过晕厥的病症经历(我国尚无此项调查数据)。但有资料表明,此病发病率呈上升趋势,越来越引起家长和儿科医师的关注     

静脉输液拔针后拇指按压方法的体会

静脉输液是临床上静脉给药最常见，也是最基本的方法之一。而拔针是静脉输液的最后一项操作，如果方法不当会使患者感觉疼痛、局部淤血青紫和静脉闭塞。不仅给患者带来不必要的紧张、疼痛和表浅静脉的缺失，也影响了下一次静脉穿刺的成功率。我们在工作中采用了一种新的压针方法，临床取得了较好效果，现报道如下：[第一段]     

临床医师实用统计学讲座 第二讲 临床有效率的统计分析(一)

临床工作中,常要比较两种疗法的优劣,其检验方法有 X~2法,X~2校正法,t 值法,Fisher 直接概率法……等。多数情况下各法的检验结果是一致的。但在 P=0.01或 P=0.05附近时,各法结果可能有所差