血清乙型肝炎病毒前S1抗原检测在预防性健康体检中的应用

[目的]探讨血清前Sl抗原检测在预防性健康体检中的应用价值。[方法]用双抗体夹心ELISA法检测233例健康体检者乙型肝炎病毒(HBV)及正常人血清中HBV前S1抗原(Pre-S1),并将其结果与荧光定量HBVDNA、HBVM及ALT的检测结果进行比较。[结果]在各组HBV感染者中均检出Pre-S1,检出率为20%~75%。HBeAg阳性组中检出率和相对滴度显著高于HBeAg阴性组(P<0.001);Pre-Sl和HBVDNA检测结果符合率达81.12%,Pre-Sl的相对滴度与HBVDNA含量之间呈正相关(r=0.9293,P<0.001);HBeAg阴性组ALT异常血清的Pre-Sl阳性率高于ALT正常血清(P<0.05),同是ALT异常,则HBeAg阳性血清的Per-SI阳性率高于HBeAg阴性血清(P<0.05)。[结论]血清前Sl抗原与HBV活动性复制、肝细胞损伤关系密切,可作为健康体检乙型肝炎传染性筛选的重要补充。     

上海市部分地区散发性戊型肝炎病毒基因型别和发病危险因素研究

目的探讨上海市部分地区急性散发性戊型肝炎（戊肝）病毒（HEV）型别和发病危险因素.方法用巢式RT-PCR方法检测HEV序列,并进行序列的同源性比较分析;同时采取1：2病例对照研究的方法,选取上海市3个区2003-2004年急性散发性确诊戊肝86例住院病例,分别配以本区和其他区健康人群对照组,用单因素和多因素logistlc回归模型进行分析.结果病毒序列分析表明戊肝病例中的HEV病毒序列属于Ⅳ型;单因素分析结果显示居住条件、外出就餐、有海鲜河鲜食用史等均为戊肝发病的危险因素;多因素分析结果显示海鲜（生、炝）食用史（OR=7.048）是戊肝感染 的危险因素.结论上海市部分地区散发性HEV流行株以Ⅳ型病毒株为主,海鲜（生、炝）食用史等是戊肝发病的危险因素.     

福州市2004年登革热流行病学和病原学特征分析

目的对福州市2004年登革热疫情及病原学特征进行分析.方法调查和分析福州市2004年登革热流行病学特点及影响因素;用C6/36细胞分离患者血清标本中病毒,并用单克隆抗体鉴定型别;通过比对核苷酸序列,分析本次疫情可能的传染源.结果福州市2004年9月中旬起至10月底发生一起登革热暴发疫情,所确认的93例病例消长情况基本与当地的蚊媒消长情况相一致.从病例的10份血清标本中分离出6株病毒,经单克隆抗体鉴定均为登革热病毒1型,病毒基因的核苷酸序列比对证明同源性与柬埔寨分离株（DENV-1/KHM/2001;GenBank Accession No.L0904278）最为接近.结论福州市2004年登革热疫情为感染登革1型病毒所引起;疫情的发生主要为输入性病例流行引起.     

狂犬病毒TaqMan PCR检测方法的建立

目的建立检测狂犬病毒（RV）核蛋白（N）基因片段的TaqMan PCR检测方法。方法针对RVN基因保守区域设计特异性引物与探针；优化检测体系中引物与探针的浓度；以体外转录的RV完整的N基因RNA作为定量分析模型；考核检测体系灵敏性、特异性、稳定性；初步用于RV的检测。结果引物和探针具有良好的特异性，使用浓度分别为0．6μmol／L和0．2μmol／L，可检测到2700个RNA拷贝数，较传统RT-PCR检测方法敏感性提高了10倍；同一样品Ct值重复检测5次，变异系数均〈5％，表明检测体系具有较好的稳定性；通过所建立的检测体系，绘制了以模板拷贝数为分析指标的RV定量检测标准曲线，对实验室内保存毒株的检测结果显示TaqMan PCR检测比普通PCR检测更快捷、敏感。结论所建立的RV TaqMan PCR可以用于RV的实验室检测，并且比普通PCR检测方法更灵敏、特异。     

中国部分地区HIV患者B′和B′/C亚型毒株tat第一外显子基因变异与HIV疾病进展关系的研究

目的 了解中国B’和B’／C亚型HIV／AIDS患者tat第一外显子的基因序列及其二级结构的特征和变异特点，探讨其与HIV-1感染疾病进展之间的关系。方法 从辽宁、吉林和云南省HIV-1感染者中选取病情呈缓慢进展的B’亚型感染者8例和B’／C亚型感染者5例，选择年龄、性别感染时间与前二者匹配的病情呈典型进展的B’亚型感染者26例和B’／C亚型感染者9例。采集外周静脉血，提取前病毒DNA，用巢式聚合酶链反应扩增HIV-1的tat基因，纯化后直接进行基因序列测定，序列编辑后翻译成氨基酸序列，进行氨基酸变异情况分析和二级结构预测。结果 B’和B’／C亚型缓慢进展者、典型进展者Tat第一外显子中发现多种氨基酸替换，但除A58T外均未显示出与病毒载量以及疾病进展的明确相关性。23N、31S、32Y、46F变异均显示出亚型特异性；Tat蛋白的二级结构未发现规律性变化。结论 中国HIV／AIDs患者tat第一外显子某些位点的基因变异，如A58T可能与病毒载量以及疾病进展有关，Tat蛋白的二级结构可能与HIV感染后的疾病进展无明显关系。     

阻断乙型肝炎病毒母婴传播对血清病毒转录体的影响

目的进一步探讨阻断乙型肝炎病毒（HBV）母婴垂直传播的效果，明确携带HBV孕妇干预治疗对保护婴儿抗-HBV感染的意义。探讨乙型肝炎病毒转录体（RNA）检测在母婴传播诊断中的意义。方法将91例HBsAg／HBeAg呈阳性孕妇分成两组。其中治疗组为61例，以乙肝免疫球蛋白（HBIG）与左旋咪唑涂布剂阻断治疗；对照组为30例。治疗组在孕26周起开始阻断治疗，自母亲及其婴儿血清和母亲乳汁中提取核酸，经PCR及RT—PCR分别扩增HBV DNA和RNA，Southern—blotting验证反应的特异性，取代表性产物克隆、测序，检测血清HBV DNA及全长型（IRNA）和顿挫性转录体（trRNA）。结果治疗组和对照组新生儿外周血HBV DNA、fRNA和trRNA的阳性率分别为3．3％，3．3％，47．5％和6．7％，13．3％。70．0％。治疗组的前二项指标明显低于对照组，差异有显著意义（P〈0．01），但trRNA差异无显著意义（P〉0．05）。结论携带HBV孕妇于孕晚期给予HBIG和左旋咪唑涂布剂阻断治疗后，婴儿HBV DNA和fRNA携带率明显降低。治疗组和对照组均有超过1／2的患儿携带trRNA。trRNA在HBV母婴垂直传播过程中有可能是一个出现更早期的可检测指标，有助于确定新生儿HBV感染的状态。     

干扰素γ基因内含子1+874位点多态性与乙型肝炎病毒感染关系的研究

目的 研究干扰素γ（IFN-γ）基因内含子1＋874位点多态性与乙型肝炎病毒（HBV）感染、转归的关系,探讨慢性HBV感染的遗传易感因素.方法 采用序列特异性引物-聚合酶链反应（PCR-SSP）技术检测231例慢性HBV携带患者、165例自限性HBV感染者和135名正常对照者IFN-γ基因内含子1＋874位点T/A单核苷酸多态性.结果 慢性HBV感染组IFN-γ基因＋874位点AA基因型频率（TT、TA、AA频率分别为9.1%、12.1%、78.8%）高于正常对照组（TT、TA、AA频率分别为12.6%、23.0%、64.4%）（x2=9.60,P=0.008）;而自限性HBV感染组（TT、TA、AA频率分别为13.9%、23.7%、62.4%）和对照组之间差异无显著性（x2=0.16,P=0.92）.结论 IFN-γ基因内含子1＋874位点多态性与慢性HBV感染有关,该位点多态性可能在决定个体HBV感染遗传易感性方面有一定意义.     

肝癌组织、癌旁组织中HBsAg、HCV抗原表达与肝组织纤维化分期的相关性研究

目的研究肝癌组织、癌旁组织中乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒（HCV）抗原表达与肝组织纤维化分期的相关性.方法采用免疫组织化学方法对肝癌组织及癌旁组织中的HBsAg、HCV抗原表达进行了标记和分析,同时对肝癌组织及癌旁组织进行肝组织纤维化分期.结果肝组织纤维化程度与HBV、HCV感染有明显相关性（rs=0.32,P=0.001）;HBsAg和HCV抗原在癌组织及癌旁组织中表达有差异,HBsAg主要在癌旁组织表达（79%）,高于癌组织（23%）;而HCV抗原在癌组织（15%）与癌旁组织表达（23%）水平相当.结论有病毒感染背景的肝癌组织,其纤维化程度高于无病毒感染的肝癌组织;病毒的感染是肝癌发生的原因,长期的病毒血症会加速肝纤维化的进展.     

TaqMan荧光定量RT-PCR快速检测登革1、2型病毒

目的 建立特异、灵敏、快速的荧光定量RT—PCR方法用于检测登革1、2型病毒核酸，并初步应用于登革热的临床标本检测。方法 根据GenBank登录的登革热毒株序列。应用生物学软件进行序列比对，分别在登革病毒1型的NS5基因和2型的C基因的保守区设计特异性引物和TaqMan探针。对荧光定量RT—PCR反应条件进行优化，验证该方法的特异性、灵敏度和稳定性。同时对疑似登革热病例血清标本进行检测。结果 该方法对登革1、2型病毒的检测有高度的特异性，与登革病毒的4个血清型之间以及流行性乙型脑炎病毒、肾综合征出血热病毒等均无交叉反应，检测的灵敏度均达0．1TCID50，可从疑似登革热病例血清标本中直接检测登革病毒核酸，从病毒核酸提取至完成检测仅需3h左右。结论 本研究建立的TaqMan荧光定量RT—PCR是一种快速检测登革1、2型病毒特异、敏感的方法，适用于临床早期诊断。     

2004年新疆某中专学生HBsAg、抗-HBs的检测结果分析

目的为了解新疆中等专业学校新生乙型肝炎病毒感染状况和抗-HBs水平。方法采用整群抽样法，抽取558名入校新生用ELISA法检测乙肝表面抗原（HBsAg）与抗体（抗-HBs）。结果558名新生的HBsAg阳性率为8．42％，城市来源的学生HBaAg阳性率高于农村来源的学生，但是差异无统计学意义（P〉0．05）。抗-HBs阳性率为54．84％，城市来源的学生高于农村来源的学生，差异有统计学意义（P〈0．01）。乙肝病毒无免疫保护作用的占检测总人数36．74％，其中农村学生高于城市学生，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论新生体检很有必要，对乙肝无免疫力的给予乙肝全程免疫，抗-HBs弱阳性的给予一次加强免疫。