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采用ELISA法及逆转录—PCR(简称RT—PCR)法检测36例非甲—戊型肝炎患者血清庚型肝炎病毒抗体(简称抗HGV)和庚型肝炎病毒(简称HGVRNA)。结果:7例(19.4%)抗HGV阳性,2例(5.4%)同时HGVRNA阳性;急性肝炎抗HGV阳性者临床表现与抗HGV阴性者无显著差异,慢性肝炎抗HGV阳性者较抗HGV阴性者轻。提示:HGV可引起急、慢性肝炎,在非甲—戊型肝炎中占有一定比例,但不是主要原因。 相似文献
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根据嗜肺军团菌基因组DNA的种特异性DNA片段序列,合成一对引物进行聚合酶链反应(PCR)。经琼脂糖凝胶电泳、EB染色结果表明,一条870bp的核苷酸区带为嗜肺军团菌1~14血清型菌株所共有。PCR检测水中军团菌,其敏感性为350cfu/ml,而用同位素标记探针、斑点杂交法检测,其敏感性为43cfu/ml。PCR检测人工感染嗜肺军团菌的豚鼠组织标本,阳性率为83.3%,而细菌分离培养的阳性率仅为26.6%。在现场调查中,用PCR法初步验证了一起由Lp10引起的军团菌病爆发。上述结果表明,PCR法能快速、敏感、特异性检测嗜肺军团菌感染。 相似文献
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Conventional PCR-SSP, which is based on an agarose gel-based read-out, has the disadvantages of time-consuming post-PCR steps and low potential for automation. The aim of our study was to sort out these drawbacks by establishing a fluorescence-based PCR-SSP system for HLA-C. The assay relies on the sequence-specific identification of amplicons with individually labeled probes that are cleaved during successful PCR by the 5'-3' exonuclease activity of the Taq-DNA Polymerase. The oligonucleotides are labeled with a unique and spectrally resolvable fluorescent reporter dye at the 5' terminus (FAM or TET) and a common quencher dye at the 3' terminus (TAMRA). In case of amplification, the reporter escapes from the quenching control caused by the physical separation of the dyes, resulting in a significant increase of the reporter fluorescence. This allows simultaneous and differential detection of the specific HLA (FAM) and internal control (TET) product. The HLA-C fluorotyping information is based on the individual reporter fluorescence released by 18 PCR primer mixes. Using this method, we analyzed 145 samples previously typed with conventional PCR-SSP and found a concordance rate of 100%. Furthermore, fluorotyping revealed quantitative results that may indicate the presence of homozygosity by high signal intensities. This provided extra protection not to miss new alleles which are not amplified by the current primer mixes. These features as well as the capability of high sample throughput and the possibility of automation makes fluorotyping an attractive tool for PCR-based HLA typing. 相似文献
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本文对14例HBV-DNA阳性患儿的家庭成员23人进行血清学检测,并收集22例正常人血清为对照组。23例家庭成员中HBV-DNA阳性率为34.8%(8/23),明显高于对照组4.5%(1/22),P<0.01。HBV-DNA阳性率在患儿的双亲为40%(4/10),而在其祖父母辈为33.33%(3/9),二者无显著差异(P>0.05)。提示乙肝病毒感染的家庭聚集性存在双亲或祖父母辈与患儿间的易感性相似。 相似文献
38.
肝癌组织辅助性T细胞-2细胞因子强势分泌研究 总被引:4,自引:2,他引:2
目的 探讨人肝癌组织中辅助性T细胞亚群 (Th1/Th2 )细胞因子表达模式。方法 收集我科手术切除肝癌组织标本 15例 ,肝良性疾病或肝硬化门静脉高压手术患者肝组织标本 15例作为对照 ,β 肌动蛋白 (β actin)作为参照 ,采用半定量逆转录 聚合酶联反应 (RT PCR)方法检测人肝癌组织中γ 干扰素 (IFN γ)和白细胞介素 4(IL 4)mRNA的表达。结果 人肝癌组织中IFN γmRNA表达 (相对数 :1.18± 0 .3 1)比对照组肝组织中IFN γmRNA表达弱 (相对数 :1.86±0 .5 0 ) ,而IL 4mRNA表达 (相对数 :1.73± 0 .5 1)比对照组强 (相对数 :0 .94± 0 .41,P <0 .0 5 )。结论 人肝癌组织中Th1类细胞因子表达弱 ,Th2类细胞因子表达强 ,呈现Th2细胞因子表达模式 ,肝癌组织局部微环境处于免疫抑制状态 ,肿瘤细胞易发生免疫逃逸 相似文献
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目的:对耐万古霉素的肠球菌进行表型及基因型分析,了解临床耐万古霉素肠球菌(VRE)的流行状况。指导临床合理使用抗生素。方法:48株肠球菌,按常规方法进行鉴定,并采用琼脂筛选法对耐万古霉素肠球菌进一步筛选。将筛选出的3株耐万古霉素肠球菌,以多重PCR法进行基因分型。结果:共检出3株对万古霉素耐药肠球菌,其中1株为天然耐万古霉素株。基因型分析结果为1株VanA型,1株VanCl型,另1株基因型不明。结论:已发现3株VRE。临床应合理使用抗生素,以防止VRE的爆发流行。 相似文献
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目的 克隆出视蛋白基因启动子。方法 以小鼠全基因组为模板,用PCR法克隆出目的大小的片断。然后连接到T-载体上作酶切鉴定,最后测序。结果 酶切结果与预期相符,测序结果与公布序列完全一致。结论 视蛋白基因启动子克隆成功。 相似文献