我国部分地区HCV感染者抗—HCV抑制率的研究

收集了我国部分地区ＨＣＶ感染者血清３６３份，分别做了抗－ＨＣＶＥＬＩＳＡ和抗－ＨＣＶ中和抑制试验。结果显示，我国不同地区（甚至同一地区不同民族）ＨＣＶ感染者抗－ＨＣＶ抑制率不同，而且中和抑制试验前后平均ＯＤ值的差异也有所不同，特别是西藏地区藏族和新疆地区维吾尔族分别只有３．２％和３０．８％抗－ＨＣＶ（＋）血清能被同种多肽抗原所抑制，提示我国不同地区人群（甚至同一地区不同民族）ＨＣＶ感染者的抗－ＨＣＶ免疫反应性不同，并可能与不同地区的ＨＣＶ变异性有关。     

黄芩苷对变异链球菌UA159体外的抑制作用

目的 探讨黄芩苷对变异链球菌国际标准株UA159的体外抑制作用.方法 采用液体倍比稀释法结合酶标仪测OD600值测定黄芩苷对变异链球菌UA159的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC).利用酶标仪测定不同浓度的黄芩苷药液中变异链球菌UA159的OD600值,绘制生长曲线...     

2011 - 2016年云浮地区新甲型H1N1流感病毒血凝素基因进化与变异

目的 分析2011 - 2016年云浮地区新甲型H1N1流感病毒血凝素（HA）基因进化特征及抗原表位变异特征。方法 收集流感监测哨点医院流感样病例咽拭子标本,通过MDCK细胞对标本进行病毒分离。按时间顺序选取19株云浮地区新甲型H1N1流感毒株,对HA基因进行测序。与Genbank中13株参考毒株相应序列比较,用BioEdit5.0、MEGA6.0软件构建HA基因系统进化树,进行核苷酸序列同源性和氨基酸位点变异分析。结果 19株毒株HA核苷酸序列高度相似;进化树可分为三大分支,各具基因特征。在19株毒株HA中发现45个氨基酸位点变异,其中有6个高频变异位点:P100S 、S202T/N、S220T、I338V、E391K、S468N;发生在抗原决定簇上的变异位点有位于Sa区的N142S、G172E、S179N、K180Q,Sb区的S202T/N和Ca区S220T;2016年分离的3株毒株中,抗原决定簇发生了Sa区S179N和K180Q、Sb区S202T和Ca区S220T变异。结论 云浮地区新甲型H1N1流感病毒HA蛋白在某些氨基酸位点发生了突变,抗原决定簇Sa、Sb 和Ca区的氨基酸位点发生了变异,2016年云浮地区可能出现了新甲型H1N1流感新变异株。     

亮菌多糖ATPSⅡ-2的抗肿瘤活性分析

目的:研究亮菌多糖ATPSⅡ-2的抗肿瘤活性及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:以4种人肿瘤细胞株为模型,采用噻唑蓝法检测体外抗肿瘤活性;建立小鼠S180荷瘤模型,以抑瘤率检测ATPSⅡ-2的体内抗肿瘤作用,以对荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响评价ATPSⅡ-2对小鼠免疫功能的作用;ELISA法检测对荷瘤小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-2(IL-2)水平的影响。结果:ATPSⅡ-2对人肺癌细胞株的生长具有抑制作用,对Hela,K562和Hep G2细胞的增殖无明显的抑制作用;ATPSⅡ-2高、中、低剂量组对S180的抑瘤率分别为52.7%,45.9%和12.8%,且能提高荷瘤小鼠脾脏和胸腺指数。与阴性组比较,ATPSⅡ-2多糖高、中剂量组可提高荷瘤小鼠血清中细胞因子IL-2和TNF-α的水平,差异有统计学意义。结论:亮菌多糖ATPSⅡ-2有一定的细胞毒活性,有较强的体内抗肿瘤活性,其机制与调节血清细胞因子水平、增强机体免疫功能有关。     

髓样相关蛋白14真核表达载体的构建及其细胞内定位研究

目的:构建小鼠髓样相关蛋白14(MRP14)的真核表达载体,观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况。方法:提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增得到MRP14编码序列。然后将该编码序列克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后转染NIH3T3细胞,在荧光显微镜下观察结果。结果:重组质粒经聚合酶链反应(PCR)、酶切和测序鉴定证明构建正确。转染实验发现,该质粒能够在NIH3T3细胞中表达,表达产物主要定位在细胞质中。结论:成功构建带HA标签的MRP14真核表达载体。该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为下一步深入研究MRP14作用细胞的信号通路提供了一个重要工具。     

表没食子儿茶素没食子酸酯联合曲妥珠单抗对HER2过表达乳腺癌细胞增殖的影响及其机制

目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）联合曲妥珠单抗对人表皮生长因子受体2(HER2)过表达乳腺癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法 表达纯化曲妥珠单抗;用CCK-8细胞增殖检测试剂盒（CCK8）检测不同浓度EGCG、曲妥珠单抗及两药联用对HER2过表达乳腺癌细胞BT474、SK-BR-3的增殖抑制作用;用Western blot法检测EGCG、曲妥珠单抗及两药联用对BT474乳腺癌细胞中HER2,表皮生长因子受体（EGFR）,丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）和蛋白激酶B(Akt)及它们的磷酸化蛋白的表达水平的影响。结果 细胞增殖试验结果显示,EGCG、曲妥珠单抗以及二者联用均能有效抑制BT474和SK-BR-3细胞的增殖,且在一定浓度范围内,EGCG与曲妥珠单抗联用显示出协同增殖抑制作用。Western blot结果显示EGCG、曲妥珠单抗以及二者联合均能抑制BT474细胞中Akt,MAPK,EGFR,HER2的磷酸化蛋白表达,与单药相比,二者联合抑制作用显著增强,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 EGCG联合曲妥珠单抗能协同抑制HER2过表达乳腺癌细胞的增殖,...     

ELISA(双抗体夹心法)共系统检测抗-HBe与HBeAg结果分析

目的探讨用双抗体夹心法检测HBeAgEIA商品试剂盒共系统检测抗-HBe与HBeAg的可行性及结果判定方法。方法用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒结合配套中和(竞争)抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒中的中和试剂(HBeAg)等试剂组分共系统检测1000份随机血清(浆)标本抗-HBe与HBeAg,并分别以常规ELISA检测抗-HBe与HBeAg作平行对照。结果ELISA共系统检测抗-HBe与HBeAg易于目测;它们的比色判定临界值同常规ELISA易于设定(或使用临界值血清,检测HBeAg时也使用抗-HBe阴性对照),与常规ELISA检测比色判定无显著性差异(配对计数资料比较的χ2检验:相关检验均为P<0.005,υ=1,a=0.05;抗-HBe优劣检验(ELISA共系统检测抗-HBe前两项COV与抗-HBe临界值血清)均为P>0.900,υ=1,a=0.05;HBeAg优劣检验依次为HBeAg临界值血清:(1)P>0.900,υ=1,a=0.05,抗-HBe阴性对照;(2)0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05,ELISA共系统检测HBeAgCOV;(3)0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05,但χ21<χ22<χ23)。结论用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒与配套中和(竞争)抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒试剂组分重组共系统检测抗-HBe与HBeAg是可行的,两种试剂盒能够相互替代,在有优质现代酶标仪的实验室,可以省去常规ELISA试剂盒其中之一,实用价廉,值得推广。     

大学新生抑郁与行为抑制/激活系统及心理弹性的关系

目的 探讨大学新生抑郁与行为抑制/激活系统、心理弹性的关系,为抑郁干预提供参考依据.方法 采用分层随机抽样,利用贝克抑郁自评量表(Beck depression inventory-Ⅱ,BDI-Ⅱ)、行为抑制/行为激活系统(behavioral inhibition system/behavioral activation system,BIS/BAS)量表中文版、心理弹性量表中文版对某高校570名大一新生进行调查.结果 新生抑郁与BIS成正相关(r=0.22,P＜0.01);与心理弹性3个因素成负相关(r=-0.43～-0.35,P＜0.01).不同程度抑郁症状组的BIS及心理弹性3个因素相比,差异有统计学意义(P＜0.01).力量、BIS、乐观性可有效预测新生抑郁,总解释率为22％.结论 大学新生抑郁与BIS/BAS、心理弹性密切相关,高BIS和低心理弹性可有效预测抑郁.     

苦豆子总生物碱对小鼠乳腺癌4T1细胞体外增殖抑制及诱导凋亡作用的研究

目的研究苦豆子总生物碱对小鼠乳腺癌4T1细胞体外增殖抑制及诱导凋亡作用。方法苦豆子总生物碱提取并纯化,处理成澄清的药物溶液后用于细胞给药。CCK-8法测定不同浓度的苦豆子总生物碱作用24h后4T1细胞存活率。流式细胞术检测给药24h后4T1细胞凋亡率。结果与对照组比较,实验组药物浓度为5.00mg/mL时,4T1细胞存活率为63.05%;药物浓度为10.00mg/mL时,4T1细胞存活率为20.30%,随着给药浓度的增加,细胞存活率呈明显下降趋势。实验组药物浓度为6.25mg/mL时,细胞凋亡率为11.4%;药物浓度为10.00mg/mL时,细胞凋亡率为41.7%,随着给药浓度的增加,细胞凋亡率明显增加。结论苦豆子总生物碱能诱导细胞凋亡,对小鼠乳腺癌4T1细胞的增殖有明显抑制作用。     

丙戊酸钠诱导人结肠癌细胞HT-29自噬及其机制研究

目的对丙戊酸钠诱导人结肠癌细胞HT-29发生自噬性死亡的过程进行观察,并初步探讨其可能的机制。方法用不同浓度、不同作用时间的丙戊酸钠处理人结肠癌细胞系HT-29,用细胞计数试剂盒CCK8法观察其对细胞增殖的抑制作用,丹酰戊二胺染色法观察细胞自噬,荧光测试仪检测自噬水平,荧光定量PCR法检测以下基因表达水平的变化：微管相关蛋白轻链3Ⅱ（LC3-Ⅱ）、自噬相关基因Beclin-1、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）和磷酸化核糖体蛋白S6激酶（p-p70S6K）。结果随着丙戊酸钠处理浓度的递增及作用时间的延长,其对人结肠癌细胞HT-29的增殖抑制率逐渐提高,呈剂量依赖性及时间依赖性（P均﹤0.01）;同时,随着药物浓度的增加,细胞中自噬泡数量增多,荧光强度增强,与对照组比较,差异有统计学意义（P均〈0.05）。经丙戊酸钠处理后,自2 mmol/L浓度始,人结肠癌细胞系HT-29自噬相关基因LC3-Ⅱ和Beclin-1表达水平明显升高（P均〈0.01）,而mTOR、p-Akt和p-p70S6K表达水平明显降低（P均〈0.01）。结论丙戊酸钠可诱导结肠癌细胞发生自噬,其诱导结肠癌细胞发生自噬的机制可能与阻断mTOR-Akt信号转导通路及激活Beclin-1信号转导通路有关。