糖尿病肾病中医药诊治进展

糖尿病肾病是糖尿病患者的主要微血管病变之一,亦是导致终末期肾脏病的重要原因之一。中医药诊治糖尿病肾病有多种理论学说,从不同角度阐释了糖尿病肾病的病机,其中大部分医家认为气阴两虚,肾络瘀阻为主要病因病机。文章将糖尿病肾病中医药诊治进展进行了总结。     

从"湿热瘀结"论治子宫内膜异位症探讨

“瘀血阻滞”为EMT的基本病机似得以共识。根据EMT的中、西医学病因病理基础,结合临床与实验研究情况,认为湿热瘀结是EMT的主要病机之一,亦是病情缠绵难愈,反复发作的病理基础。治疗EMT不应仅仅针对瘀血阻滞的基本病机和盆腔已形成的病灶,而更应针对导致瘀血内阻的相关病因以及瘀阻成变生的病理结果,即针对病因的所谓“治病求本”和兼顾病理的“标本兼治”的治疗方法,以阻断因果交织的恶性循环,从“湿热瘀结”论治EMT即是对这种方法的探索。     

Deoxyribonucleic acid of Chlamydia trachomatis in fresh tissue from the Fallopian tubes of patients with ectopic pregnancy

OBJECTIVES: The role of persistent chlamydial infection of the Fallopian tubes in ectopic pregnancy is still unresolved. Therefore, we examined tissue of the Fallopian tubes from patients with ectopic pregnancy for the presence of Chlamydia trachomatis. In addition, other markers of C. trachomatis infection implicated in the pathogenesis of tubal damage were studied including antibodies to heat shock protein 60 of chlamydial and human origin. STUDY DESIGN: Fresh frozen tubal tissue from 55 patients with ectopic pregnancy in a hospital setting were examined for the presence of C. trachomatis DNA by polymerase chain reaction (PCR) and blood sample were analysed for antibodies to C. trachomatis including heat shock protein 60 (hsp60). RESULTS: Chlamydial DNA was not detected in any of the 55 tubal specimens using a commercial test, Cobas Amplicor, Roche, and an in-house real time PCR able to detect a few copies of the organism. Logistic regression showed that chlamydial IgG antibodies were more common in a subgroup of patients with previous PID than in controls (OR=7.84, CI 1.78-34.6). Specific antibodies to hsp60 of chlamydial (OR=7.00, CI 1.50-32.6) but not of human origin (OR=2.13, CI 0.14-31.6) were associated with ectopic pregnancy in this group. CONCLUSIONS: No evidence of persistent infection of C. trachomatis in the fallopian tubes at the time of ectopic pregnancy was found in this study.     

局部热激对大鼠睾丸生精细胞凋亡与增殖的影响

目的 研究局部热激对大鼠睾丸生精细胞凋亡和增殖的动态变化及二者相关性的影响,以探索生精细胞凋亡与增殖的关系。方法 36只60天龄雄性Wistar大鼠随机分为对照组(22℃,20min)与热激组(43℃,20min),热激组按睾丸局部处理后1、2、3、4、5天分成5个亚组;采用HE染色分析各组大鼠曲细精管的形态变化;采用TUNEL法检测各组生精细胞凋亡情况;采用免疫组织化学方法(以下简称免疫组化)分析各组大鼠曲细精管Ki-67表达与分布的变化。结果 HE染色显示,热激后生精细胞逐渐脱落、缺失,至第4天最为严重,而第5天生精细胞有所恢复;TUNEL法检测显示,热激后各组的TUNEL凋亡信号显著增加(P<0.01),热激2天组达到高峰,热激3~5天组凋亡信号逐渐降低;免疫组化结果显示,热激后各组的Ki67表达显著下降(P<0.01),热激1天组很少见到Ki67表达,热激2~5天组Ki67表达逐渐增加;比较各组Ki67与TUNEL的比值,发现热激1~2天组二者比值小于1,热激3天组二者比值几乎等于1,热激4天组二者比值大于1。结论 睾丸局部热激可导致生精细胞凋亡,生精细胞增殖抑制,热激后早期凋亡过程胜于增殖,热激后期增殖强于凋亡过程,表明凋亡过程的可逆可能在于增殖活性增强。     

CEA、CA199、CA724及HSP60在胃癌患者血清中的表达及应用价值

目的:探讨肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA199)、糖类抗原7-24(CA724)及热休克蛋白60(HSP60)在胃癌患者血清中的表达及应用价值。方法:采用电化学发光法和酶联免疫法检测胃癌组与正常对照组血清CEA、CA199、CA724及HSP60水平,分析其与胃癌淋巴转移、临床分期的关系及4项指标单一、联合检测的阳性率。结果:CEA、CA199、CA724及HSP60在胃癌组中的表达明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);血清CEA、CA199、CA724及HSP60的阳性率与胃癌淋巴转移、临床分期有关(P<0.05);4项指标联合检测阳性率达74.36%,明显高于单项指标检测(P<0.05)。结论:胃癌患者血清CEA、CA199、CA724及HSP60水平与胃癌的发生、发展关系密切,联合检测血清水平变化对胃癌诊断及病情变化的判断具有重要意义。     

基于血清代谢组学分析热习服相关代谢产物及通路特征

目的：比较热习服与未习服人员血清中小分子代谢物差异,揭示人体热习服相关血清小分子代谢物特征。方法：以70例由温到热跨域作业人员为研究对象,以跨域后暴露于自然高温高湿环境作业或人工空调舒适环境作业为标准分为热习服组（n=40）和未习服组（n=30）。收集他们跨域后60d时清晨空腹血样,标准处理后采用液相色谱-串联质谱法对血清样本进行代谢组学检测,进一步使用Progenesis QI软件和ropls R包筛选两组人员的差异小分子代谢物,并进行KEGG通路富集度分析。结果：两组间年龄和BMI差异均无统计学意义。血清代谢组学检测共发现小分子代谢物1320个,未监督聚类分析能显著预测热习服组和未习服组。两组血清样本间浓度差异在1.5倍（p＜0.05）以上的小分子代谢物89个,其中57个在热习服组升高、32个在热习服组下降;进一步发现差异小分子代谢物主要富集于氨基酸代谢和甘油磷脂代谢等13条代谢通路,涉及色氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、精氨酸和脯氨酸等通路。结论：热环境暴露下的热习服训练改变了人体血清小分子代谢物的组学特征,表现为氨基酸代谢水平增强,其可能和热耐力的维护有关。     

高温与细菌脂多糖复合应激大鼠动脉血气的变化特点

目的监测高温与细菌脂多糖复合应激大鼠生命体征与动脉血气等指标的动态变化特点。方法雄性SPF级Wistar大鼠随机分为:常温生理盐水组(C组)、高温生理盐水组(H组)、常温细菌脂多糖组(L组)、高温细菌脂多糖组(HL组)。持续监测动物肛温(Tr)、心率(HR)、平均动脉压(MAP)以及动脉血气的动态变化。结果(1)HL组Tr上升到43.04℃±0.11℃,HR加快到(660±42)次min,MAP下降到(49.0±3.5)mmHg。HL组Tr、HR、MAP与L组[分别为35.00℃±0.21℃、(408±27)次min、(97.2±2.3)mmHg]的差异有统计学意义(P<0.01),HL组HR、MAP与H组[分别为(576±33)次min、(67.2±4.8)mmHg]的差异亦有统计学意义(P<0.01)。(2)HL组PaO2、HCO-3、PaCO2于致伤40min时即出现明显下降,致伤120min时分别为(11.59±1.11)kPa、(10.42±1.06)mmolL、(2.82±0.81)kPa。结论高温与细菌内毒素复合应激能够促发与加重生命体征、动脉血气的改变以及全身炎症反应综合征。     

结核杆菌HSP65与IL—12多价DNA疫苗的构建

[目的]构建结核杆菌H37RV株HSP65基因与IL-12基因的共表达载体pVIVO2-HSP65-IL-12,并研究其在Vero—E6细胞内表达的可行性,为新一代结核多价DNA疫苗寻找理论依据。[方法]采用PCR技术,从培养的结核杆菌H37RV中抽提HSP65基因,克隆到pVIVO2-MCS上的一个多克隆位点,构建pVIVO2-HSP65,将质粒pORF—IL-12上的IL-12基因经双酶切后,亚克隆到pVIVO2-HSP65上,构建成共表达载体pVIVO2-HSP65-IL-12。并经XbaⅠ／AvrⅡ和NcoⅠ／NheⅠ进行双酶切和测序鉴定;用间接免疫荧光法（IFA）检测HSP65和mIL-12基因在Vero—E6细胞中的表达。[结果]双酶切和测序分析证明HSP65基因和mIL-12基因成功克隆到pVIVO2-MCS上,且方向正确,序列无突变;间接免疫荧光试验结果为阳性。[结论]共表达载体pVIVO2-HSP65-IL-12构建成功,且pVIVO2-HSP65-IL-12可在Vero—E6细胞中获得共表达。     

人外周血淋巴细胞热应激蛋白70的流式细胞术检测

目的 建立一种操作简单、快速而又可靠性强的检测细胞热应激蛋白（HSPs）表达水平的方法。方法 采用流式细胞术和免疫印迹方法检测人外周血淋巴细胞热应激蛋白70（HSP70）。结果 外周血淋巴细胞在43℃受热应激30min后,HSP70水平迅速升高,6h达到峰值,之后逐渐降低至正常水平。两种方法所得结果具有高度一致性,但流式细胞术操作简单、省时,可测样本量大,结果可靠,因此更适合于大样本快速研究。结论 运用流式细胞术大规模检测人外周血淋巴细胞HSP70是可行的。     

急性受热及热适应对机体免疫系统的影响

雄性ＳＤ大鼠随机分为５组：２５℃对照组，３７℃每天２ｈ共７天热适应组，４２℃分别受热３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ，９０ｍｉｎ的３个热处理组。检测全血淋巴细胞转化率、α－醋酸萘酯酶活性、腹腔巨噬细胞活性和吞噬功能。结果显示：７天热适应组与受热３０ｍｉｎ组即明显降低，随受热时间延长（超过３０ｍｉｎ），巨噬细胞吞噬功能显著降低，不能形成吞噬峰。７天热适应组与受热３０ｍｉｎ组用ＰＨＡ刺激全血淋巴细胞转化的刺激指数比对照组稍高，但差异不明显（Ｐ＞０．０５），而６０ｍｉｎ和９０ｍｉｎ受热却使该指数显著下降（Ｐ分别为０．００３１和０．００６３）。α－醋酸萘酯酶除热适应组降低外，其余各组无明显变化。结果提示，急性受热时机体免疫系统功能有受抑制倾向。