肾综合征出血热疫苗后备毒株的分离和生物学特性研究

目的从肾综合征出血热(HFRS)疫区阳性鼠肺中分离汉坦病毒(HV),并对分离到的病毒进行型别鉴定和生物学特性研究,为HFRS疫苗后备毒种库的建立打下基础。方法疫区阳性鼠肺研磨液接种长爪沙鼠分离病毒,并将分离到的HV经乳沙鼠脑内连续传代,采用直接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验,检查毒株的型别,研究传代后毒株的繁殖特性、病毒滴度和抗原滴度。结果从疫区32份阳性鼠肺中分离到9株HV,经单克隆直接荧光血清检查6株为汉滩病毒株,3株为汉城病毒株,经乳沙鼠脑内连续传代,其中4株毒株的病毒滴度和抗原滴度较高,汉滩和汉城毒株的病毒和抗原滴度最高分别达106.50、106.00和1∶5120、1∶5120。结论4株毒株的病毒滴度和抗原滴度均较高,可作为HFRS疫苗后备毒种的筛选毒株。     

人乳头瘤病毒重组质粒的构建及蛋白表达

目的 构建重组原核表达质粒获得人乳头瘤病毒18型L1片段(HPVl8LI)活性蛋白。为进一步研制人乳头瘤病毒18型(HPV18)基因工程疫苗打下基础。方法 以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板，利用PCR方法扩增HPV18L1DNA片段。将HPV18L1DNA与质粒(pUC19)重组构建重组质粒(pUC19-HPV18L1)。用酶切电泳验证重组结果的正确性；并通过测序检查质粒重组后序列有无变化。再利用质粒(pQE32)做表达载体构建重组质粒(pQE32-HPV18L1)，并用酶切电泳验证。将重组质粒pQE32-HPV18L1转入工程菌(M15)。用酶切电泳验证重组工程菌(pQE32-HPV18L1／M15)正确性。利用SDS-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测HPV18L1目的蛋白。采用不同浓度异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)、不同诱导时间来优化HPV18L1目的蛋白表达条件。利用Western印迹检测蛋白质(Western blot)鉴定HPV18L1目的蛋白的特异性。结果PCR扩增DNA片段约为1．7Kb。与预期结果相同。克隆重组质粒pUC19-HPV18L1酶切后显示的酶切图谱与预期相同。而且测序验证插入片段全序列无改变。表达重组质粒pQE32-HPVl8L1酶切图谱亦与预期相同。蛋白表达条件优化结果为1mmol／LIPTG诱导4h后，获得HPV18L1最佳蛋白表达量：SDS-PAGE显示，约63KD处可见目的蛋白带，与预期结果一致。Westem blot鉴定，在约63KD处可见目的条带，与预期结果一致。结论 成功构建表达重组质粒pQE32-HPV18L1并能表达HPV18L1目的蛋白。     

昆明地区2型糖尿病危险因素病例对照研究

目的探讨昆明地区2型糖尿病的主要危险因素，以指导开展2型糖尿病预防控制工作。方法选取昆明地区新近发现的2型糖尿病患者131例，进行1：1匹配病例对照研究，通过条件Logistic回归分析，探讨2型糖尿病的主要危险因素。结果昆明地区人群2型糖尿病的主要危险因素是超重肥胖、胰岛素抵抗、经历不良生活事件、喜食甜食等；经常参加体育锻炼、食用植物油和多食新鲜蔬菜等是2型糖尿病的保护因素。结论提倡合理膳食、加强体育锻炼、控制体重、注意心理平衡、改变不良行为习惯等是预防2型糖尿病的重要措施。     

孕妇血型抗体效价与新生儿ABO血型和ABO溶血的关系

目的　分析新生儿 O、 A、 B型血型与孕妇血型抗体效价的关系 ,了解能否用血型抗体效价≥ 1:5 12来预测新生儿 ABO溶血的严重程度。　方法　 35 4例孕妇为 O型血型、丈夫为 A、B、 AB型血型 ,孕妇分娩时测定抗体效价 ,分娩后立即采集脐血做新生儿溶血病检测。　结果　新生儿血型不论是 A型、 B型 ,还是 O型 ,母亲血液中均可以检出抗 A或抗 B抗体 ,O型组新生儿与A、 B型组新生儿中母亲 Ig G抗 A或抗 B抗体效价分布不同 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。新生儿 ABO溶血的发生率与母亲抗体效价相关 ,效价越高 ,新生儿 ABO溶血发生率越高 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,但母亲抗体效价与新生儿溶血性贫血的发生率不相关。　结论　母亲血型免疫抗体效价的高低与新生儿血型有关 ,血型抗体效价≥ 1:5 12不能作为新生儿 ABO溶血严重程度的预测指标     

Effects of Insulin Treatment on Intracellular Lipid Metabolism in Liver of Diabetic Rats

Withtherecognizedneedforstrictglycemiccontrolinthepreventionofcomplications,strate giesforaggressivetreatmentmustbeputintoeffect.Hence,theuseofinsuliniswiderandwi der,somuchastheearlyuseofinsulinisempha sized.Asitiswildlyknownthatinsulinisalipo genesishormone,andtype2diabetesarefrequent lyassociatedwithfattyliver,thisstudywasthere foredesignedtoexploretheeffectsofinsulintreat mentonhepaticintracellularlipidcontentandlipidmetabolisminliverinhigh fatfeedingtype2dia beticratsandthepossiblemechani…     

无血液培养基分离嗜血杆菌的方法学研究

目的评价自制不加血液的培养基和传统的羊血巧克力培养基分离嗜血杆菌的效果。方法将流感嗜血杆菌ATCC10211接种于无血液培养基和传统培养基上,计算和比较两种培养基上嗜血杆菌的平均生长指数,并用此两种培养基对225份临床痰标本进行嗜血杆菌的分离,比较两种培养基上嗜血杆菌的分离率。结果无血液培养基与传统巧克力培养基的平均生长指数分别为11.06、8.05,225份痰标本中嗜血杆菌的分离率分别为20%、11.6%,两者有显著性差异(P<0.01)。结论无血液培养基分离嗜血杆菌的方法简便、实用、效果较好,有应用推广价值。     

福州市2004年登革热流行病学和病原学特征分析

目的对福州市2004年登革热疫情及病原学特征进行分析.方法调查和分析福州市2004年登革热流行病学特点及影响因素;用C6/36细胞分离患者血清标本中病毒,并用单克隆抗体鉴定型别;通过比对核苷酸序列,分析本次疫情可能的传染源.结果福州市2004年9月中旬起至10月底发生一起登革热暴发疫情,所确认的93例病例消长情况基本与当地的蚊媒消长情况相一致.从病例的10份血清标本中分离出6株病毒,经单克隆抗体鉴定均为登革热病毒1型,病毒基因的核苷酸序列比对证明同源性与柬埔寨分离株（DENV-1/KHM/2001;GenBank Accession No.L0904278）最为接近.结论福州市2004年登革热疫情为感染登革1型病毒所引起;疫情的发生主要为输入性病例流行引起.     

从解决"看病难、看病贵"看创建"节约型医院"的积极效应

“看病难、看病贵”问题已成为社会反响强烈的热点问题，问题的产生既有医院自身的内因，又有医疗卫生行业长期积累的体制性、机制性和结构性矛盾，以及人民群众对卫生需求不断提高等外因。医院成为矛盾的集聚地、但不是问题的发源地。医院应从自身出发，通过采取挖掘潜力、强化管理等措施创建“节约型医院”来缓解“看病难、看病贵”问题。     

登革2型病毒浙江分离株的鉴定与分子流行病学研究

目的 为了对2004年浙江省报告的输入性疑似登革热病例查明病因，从分子水平分析流行毒株的生物学特征，追踪传染源，为疾病的预防控制提供实验室依据。方法 对疑似患者血清标本采用ELISA、IFA和荧光RT—PCR方法分别检测登革病毒IgM、IgG抗体和病毒核酸，并用C6／36和BHK-21细胞分离登革病毒。采用RT—PCR方法扩增病毒E基因和NS1基因后分别进行序列测定，并与不同国家和地区的登革热毒株进行同源性和进化树分析。结果 从患者血清中检测到登革病毒IgM、IgG抗体和登革2型病毒核酸，并分离到登革2型病毒；浙江省登革2型病毒分离株（ZJ／01／04）与登革2型国际标准株Jamaica、国内Fujian／10／99株和Saudi／92株在E基因上氨基酸的同源性分别为97．1％、99．2％和99．6％，而与登革1、3、4型毒株相同区域氨基酸同源性分别为68．7％、66．9％和63．6％。基因进化树显示ZJ／OI／04分离株与Saudi／92株亲缘关系最近，在进化树的同一分支上。结论 从病原学、血清学和分子生物学特征上均证实该输入病例是由登革2型病毒引起，该毒株最有可能来源于沙特阿拉伯。     

初诊2型糖尿病短期胰岛素治疗前后C肽水平的变化

目的通过观察初诊2型糖尿病患者短期胰岛素治疗前后C肽水平的变化,了解短期胰岛素治疗能否改善胰岛β细胞功能。方法对146例初诊断2型糖尿病患者(空腹血糖≥12mmol/L,未接受过其他治疗的患者)进行1～3月的短期胰岛素治疗,使血糖在短期内得到较好的控制,比较治疗前后标准馒头餐C肽释放试验的C肽水平变化。结果经过短期胰岛素治疗,所有病例血糖得到了良好控制,3个月后复查C肽释放试验,空腹及餐后30min、60min、120min和180min的C肽水平较治疗前均明显升高(P<0.001),恢复到了2型糖尿病自然病程中较为早期的水平。结论初诊2型糖尿病短期胰岛素治疗,可以使血糖在短期内达到良好控制,C肽水平明显提高,胰岛β细胞分泌功能明显得到改善。