不同类型的HBsAg真核表达质粒在EBV永生化B淋巴母细胞中的表达

目的 探讨3种不同类型的HBsAg真核表达质粒在EBV永生化B淋巴母细胞中的表达。方法 用3种不同类型的质粒载体分别构建乙型肝炎表面抗原（HBsAg)真核表达质粒（pCI-S,pMEP4-S,pLXSN-S)；然后用阳离子脂质体介导的转染法分别转染正常人EBV永生化的B淋巴母细胞，经G418或HygromycinB筛选出抗性细胞克隆，用RT-PCR检测抗性细胞总RNA中目的基因在转录水平的表达；用ELISA检测抗性细胞培养上清和细胞裂解液中HB-sAg的含量。结果 3种不同类型HBsAg重组表达质粒转染的EBV永生化B淋巴母细胞，在转录水平上，可检出HB-sAgmRNA的表达；在蛋白水平上，细胞增养上清和细胞裂解液均可检出HBsAg；而以EB病毒表达质粒pMEP4-S表达最高，真核表达质粒pCI-S和逆转录病毒表达质粒pLXSN-S表达HBsAg的量无明显差异。结论 3种不同类型的HBsAg真核表达质粒均可在EBV永生化B淋巴母细胞中稳定表达，EB病毒表达质粒pMEP4-S表达的HBsAg明显高于真核表达质粒pCI-S和逆转录病毒表达质粒pLXSN-S。     

北海市区食品和公共场所从业人员HBsAg携带现状分析

本文对1999年度广西北海市区食品生产经营及公共场所从业人员HBsAg的携带情况进行了统计分册。结果表明:①北海市区食品生产经营行业及公共场所从业人员HBsAg的总携带率为4.09％;②食品生产经营行业从业人员HBsAg携带率为4.03％,公共场所从业人员的为4.3％。两者 无显著性差异(x2=0.22,P>0.05);③男性从业人员的HBsAg携带率为5.33％,女性的为3.28％,两者具有显著性差异(x2=27.41,P<0.01);④HBsAg携带率明显呈现出随着年龄性别的提高而降低的趋势。     

统计有偿和无偿献血者HBsAg抗—HCV与抗—HIV检测结果及比较

目的：了解有偿和无偿献者HBsAg、抗－HCV、抗-HIV I/II测定结果。方法：均采用酶联吸附试验（ELISA）法。结果：有偿和无偿献血者之HBsAg阳性率分别为2.39％和3.32％,抗－HCV阳性率分别为4.81％和2.89％,抗－HIV I／II结果均为阴性。结论：有偿与无偿献血者之间的HBsAg和抗－HCV阳性率比较均有显著性差异（t值分别为2.8633和2.3638,P＜0.05）。     

对乙型肝炎表面抗原破坏试验中HBsAg试验浓度的初步探讨

目的：探讨乙型肝炎表面抗原破坏试验中不同浓度HBsAg对消毒剂效能的影响。方法：通过对不同浓度的HBsAg采用定性破坏试验和定量破坏试验。观察HBsAg的破坏程度,确定对消毒剂效能的影响。结果：通过HBsAg定性破坏试验。证实HBsAg酶标检测试剂盒灵敏度为1ng/ml,有效氯含量为500ml/L,加入HBsAg悬液的浓度为100μg/ml,作用15min S/N值＜2．1,当加入HBsAg悬液的浓度为30μg/ml时,作用30minS/N值仍＞2．1,通过HBsAg定量破坏试验,证实当消毒剂的作用浓度相同时,HBsAg悬液的浓度为10μg/ml,作用15min,HBsAg残余量较作用6min时下降78．02％,而HBsAg悬液的浓度为32μg/ml时,只下降了60．19％,结论：所使用的HBsAg浓度越低,消毒剂最低有效浓度和最短有效时间将随之减小。     

用末梢血检测HBsAg

儿童血管比较细 ,有些儿童静脉血不好采 ,增加患者的痛苦 ,用耳垂微量全血代替静脉采血 ,用 0 9%氯化钠溶液稀释法 ,通过对 10 0人份血清对比检测 ,结果相符 ,现将具体作法介绍如下供参考。1　试剂材料1 1　试剂 :山东潍坊 3ＬＨＢｓＡｇ测定试剂盒 ,0 9%氯化钠溶液。1 2　器材 :输液管 ,吸头 ,试管 ,采血针。1 3　样品 :门诊和病房患者随机采样。2　原理方法2 1　根据全血中的血清含量 ,取一定量末梢血于 0 9%氯化钠溶液中稀释 ,取上清用酶法测定。2 2　方法 :(1)自患者耳垂采血 5 0 μｌ加入盛有 10 0 μｌ0 9%氯化钠溶液试管中 ,混…     

死胎肺组织中HBsAg检测的临床和病理研究

目的：观察乙型肝炎病毒通过产妇传播在胎儿肺组织中表达的情况。方法：采集40例乙型肝炎产妇娩下的死胎,常规尸检,取肺组织,SP法检测HBsAg;回访产妇产前静脉血HBV的检测结果。结果：HBsAg阳性颗粒在死胎的肺泡上皮细胞细胞质、肺血管中及肺泡囊、肺泡管、细支气管表面呈点、灶状发布,肺泡上皮细胞核不着色。HBV呈大三阳的产妇较HBV呈单项阳性、小三阳的产妇分娩的死胎肺组织中HBsAg阳性率、肺泡上细胞变性、肺羊水栓塞发生率明显升高,差异显著（P＜0．05）;HBV呈单项阳性、小三阳的产妇分娩的死胎肺组织中HBsAg阳性率比较,差异不显著（P＞0．05）。结论：产妇静脉血HBV大三阳是乙型肝炎病毒通过母婴垂直传播在胎儿肺组织中表达的高危因素。     

江苏省2005-2019年接受抗病毒治疗的HIV/AIDS合并HBV感染情况分析

目的 分析2005-2019年江苏省抗病毒治疗的HIV/AIDS的HBV感染情况。方法 采用回顾性资料分析,研究对象来源于中国疾病预防控制信息系统艾滋病防治基本信息系统江苏省2005-2019年HIV/AIDS首次入组抗病毒治疗数据库,采用SPSS 16.0软件进行统计学分析。分析不同特征HIV/AIDS的HBsAg检测率和HBsAg阳性率的差异及其影响因素,单因素分析采用χ²检验,多因素分析采用非条件logistic回归模型。结果 2005-2019年江苏省首次入组抗病毒治疗的HIV/AIDS共29 288例,总体HBsAg检测率为49.8%（14 594/29 288）,2005-2019年HBsAg检测率由0.0%（0/80）增加到75.2%（3 448/4 586）,呈逐年上升趋势。进行HBsAg检测的HIV/AIDS中,江苏省籍占81.6%（11 915/14 594）,男女性别比7.34：1（12 845：1 749）,年龄（38.5±13.8）岁,汉族占96.1%（14 023/14 594）,已婚/同居占48.9%（7 131/14 594）。男男性传播和异性性传播感染途径占97.9%（14 294/14 594）。logistic回归分析结果显示,HBsAg检测率的影响因素中,2015年及以后入组、外省户籍、已婚/同居、大专及以上文化程度、注射吸毒感染途径的人群HBsAg检测率较高。HIV/AIDS的HBsAg阳性率为8.6%（95%CI：8.2%~9.1%）,HBsAg阳性率在2016年之前均>10.0%,自2016年以后稳定在6.7%~8.2%。HBsAg阳性率的影响因素中,2015年及以后入组、女性、年龄>59岁、大专及以上学历人群的HBsAg阳性率较低,而45~59岁年龄组和少数民族人群的HBsAg阳性率较高。结论 2005-2019年江苏省首次入组抗病毒治疗的HIV/AIDS中,HBsAg检测率总体不高,合并HBV感染高于一般人群,需要加强其HBsAg相关检测工作。     

粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子与HBsAg融合蛋白基因的 …

目的 研究粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的免疫活性。方法 用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增出粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）３８４ｂｐ的基因片段及ＨＢｓＡｇ８４６ｂｐ基因片段，扩增产物经柱纯化后，由Ｔ４ＤＮＡ酶连结因子１２３０ｂｐ的片段，将此片段命名为ＬＧＨ，克隆到ｐＵＣ１９质粒中，利用菌落ＰＣＲ法快速筛选阳性克隆及限制酶切鉴定片段的大小。结果 该基因全长１２３０ｂｐ，经     

重组HBsAg免疫逃逸突变体的表达及其抗原性分析

为了深入研究乙型肝炎病毒S基因变异所致的包膜抗原抗原性的改变，从含ＨＢＶＤＮＡ双拷贝的质粒载体ｐＥｃｏｂ６，获得一个８３７ｂｐ的ＨＢＶ－Ｓ基因片段，将其插入至载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＫＳ~＋的ＳｍａⅠ位点，通过体外寡核苷酸介导的人工定点突变分别获得第１４５位、１２６位和第１４５位＋１２６位氨基酸三种Ｓ基因变异型。然后将这些Ｓ基因变异片段克隆到真核表达载体ｐＭＥｐ４上，从而构建了含ＨＢＶ－Ｓ基因及其突变型的表达载体ＰＭＥｐ４ＨＢＶＳＭ。用其转染人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２，获得稳定分泌ＨＢｓＡｇ及其变异体的抗性细胞系。经体外初步研究表明，ＨＢｓＡｇ １４５位氨基酸变异体可影响ＨＢｓＡｇ的“ａ”抗原决定簇的结构。     

包裹天然骨架CpG ODN和HBsAg的非磷脂脂质体疫苗的免疫效果

非磷脂脂质体NovasomeR○(Np )是由Brij5 2、胆固醇和油酸组成 ,可作为同时传递佐剂和抗原的载体。我们将HBsAg与天然骨架CpGODN (phosphodiesterCpGODN ,pdCpGODN )包裹于Np后免疫BALB/c小鼠 ,检测其免疫效果。结果显示 ,包裹pdCpGODN和HBsAg的Np在小鼠中诱导了很高滴度的抗 HBs抗体产生并诱生了HBsAgS2 8 3 9特异性的CTL ,而铝佐剂组和仅包裹HBsAg的Np组诱生的抗体滴度较低 ,未检测到CTL活力。抗体亚类分析结果表明包裹pdCpGODN和HBsAg的Np诱生的免疫应答类型与pdCpGODN剂量有关 ,较低剂量 (2 4 μgpdCpGODN )诱生的为IgG2a为主的Th1型应答 ,而较高剂量(4 7μgpdCpGODN )诱生的是Th1/Th2混合型应答。铝佐剂和仅包裹HBsAg的Np组诱生的是以IgG1为主的Th2型应答。此外 ,包裹pdCpGODN和HBsAg的Np免疫小鼠脾淋巴细胞在体外HBsAg刺激培养后特异性增殖并分泌高水平的IFN γ。这些结果表明包裹pdCpGODN和HBsAg的Np能增强HBsAg的免疫原性 ,诱生体液 /细胞免疫均衡应答 ,有可能发展为慢性乙肝的治疗性疫苗