99Tcm-SC显像联合蓝染法探测乳腺癌前哨淋巴结

目的　探讨用核素显像联合染料法探测前哨淋巴结 (SLN)及其在乳腺癌外科治疗中的作用。方法　乳腺癌患者 332例 ,均为女性。用99Tcm 硫胶体 (SC)显像联合蓝染料法 ,与单独使用蓝染料法对比 ,进行SLN检出率比较 ,并判断以SLN病理结果推断腋窝淋巴结 (ALN)累及状况的可行性 ;同时对 2 5例患者进行前哨淋巴结活检术 (SLNB)替代全腋窝淋巴结切除术 (ALND)的前瞻性研究。结果　SLNB成功率为 97.8% (32 5 332例 ) ,准确性为 94 .2 % ,假阴性率为 14 .0 % ,其中单纯蓝染料法分别为 96 .7% ,92 .2 %和 2 1.6 % ,联合法分别为 10 0 % ,97.5 %和 4 .8% ,2种方法比较差异均有显著性 (u =1.97和 1.96 5 ,χ2 =7.91,P <0 .0 5 ,0 .0 5和 0 .0 1)。SLNB替代ALND者未发现明显近期术后并发症。结论　联合应用99Tcm SC显像及染料法检出SLN成功率较单独应用染料法高。SLNB替代ALND可提高患者术后生存质量。     

P4对双氧水诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的：研究P4对双氧水诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法体外培养SH-SY5Y细胞,建立双氧水诱导SH-SY5Y细胞凋亡的模型,给予P4进行干预。应用Hoechst染色,测定细胞凋亡率。结果10uM的双氧水24 h可以使SH-SY5Y细胞凋亡率达到(56.33±13.17)%。然而,给予P4后,SH-SY5Y细胞的凋亡率明显减低,P4加双氧水组与双氧水组对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论P4对SH-SY5Y细胞的凋亡有保护作用。     

ANAE染色检测正常与照射后小鼠外周血和脾脏淋巴细胞亚群的变化

本实验建立了小鼠脾细胞酸性α醋酸茶酯酶(ANAE)细胞化学染色方法。并采用ANAE染色方法检测了经羊红细胞(SRBC)免疫后的C57BL/6小鼠外周血及脾脏淋巴细胞染色结果,并对ANAE~+细胞进行了颗粒分型。结果表明,外周血中ANAE~+细胞数为69.0±5.4％,其中斑点型占54.5±5.0％,分散型占14.5±4.6％。小鼠脾脏ANAE~+细胞为43.1±12.1％,其中斑点型占35.7±10.6％,分散型占7.4±2.9％。同时观察了小剂量γ射线照射对小鼠外周血及脾脏淋巴细胞ANAE染色的影响,结果在24.4mGy至122.0mGy剂量范围内未见淋巴细胞亚群有明显变化。     

对家兔糖尿病模型胰岛素治疗的实验观察

目的以胰岛细胞的变化和凋亡程度为判断标准,探讨家兔糖尿病模型胰岛素用药治疗的适宜方案。方法利用四氧嘧啶制作家兔糖尿病模型,设计了多次胰岛素治疗组（A组）、50R预混胰岛素治疗组（B组）、30R预混胰岛素治疗组（c组）3种治疗方案,共治疗30d,记录血糖达标时间及达标时Ins剂量,并与未治组、对照组比较血糖、胰岛素抗体及组织病理学变化;用苏木素-红染色（HE染色法）标记观察胰岛组织片及胰岛凋亡细胞。结果B组的达标胰岛素用量为（5．62±0．67）U／kg,较A、C少,C达标时胰岛素用量最多为（8．83±1．17）U／kg,差异有统计学意义（P〈0.01）。A组血糖达标时间最短为（7．00±1．31）d、C组血糖达标时间最长为（19．63±1．41）d,各组间比较差异有统计学意义（P〈0．001）。胰岛素抗体结合率C组最高,与A、B组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。C组胰岛损害最轻,胰岛凋亡细胞最少。各治疗组胰岛受损和凋亡严重程度A〉B〉C。结论30R预混胰岛素治疗方案最佳。提供一个较高的基础胰岛素浓度加少量餐时胰岛素峰值量治疗糖尿病,血糖平稳缓降,对糖尿病胰岛细胞有治疗和保护作用。多次胰岛素3短加1中的强化治疗及太短时间达标的方法不可首选。     

Livin、Survivin蛋白在非小细胞肺癌胞核中的表达及意义

目的研究凋亡抑制蛋白Survivin和Livin在tPA,细胞肺癌（NSCLC）细胞核中阳性表达（核阳）水平及其临床意义。方法采用免疫组织化学sP法检测40例NSCLC组织和20例癌旁正常肺组织中Survivin蛋白和Livin蛋白核阳水平。并分析其与临床特征的关系。结果在NSCLC和癌旁正常肺组织中,Survivin蛋白细胞核表达的阳性率分别为80％（32／40）和5％（1／20）,Livin蛋白细胞核表达的阳性率分别为80％（32／40）和10％（2／20）。Survivin蛋白和Livin蛋白核阳在NSCLC组织中的表达显著高于癌旁组织（P〈0．05）。Survivin蛋白核阳与淋巴结转移、肿瘤分期高度相关（尸〈0．05）。结论Survivin蛋白和Livin蛋白在NSCLC细胞核中高表达,可能成为NSCLC诊断的新指标和治疗的潜在靶点。     

胃镜活检组织P53和C-erbB-2同步检测的意义

目的 分析P53和C-erbB-2在胃癌和肠化生组织中表达的差异，以期有助于筛检胃癌高危人群及临床早期诊断。方法 以免疫组化ABC法对15例正常黏膜、16例轻度肠化生、15例中度肠化生、13例重度肠化生和14例胃癌组织进行同步检测。结果 P53和C-erbB-2免疫组化阳性在胃癌组织中分别是8／14(57．1％)和7／14(50％)。胃癌组中P53和C-erbB-2双重表达免疫组化阳性的敏感性是28．6％，特异性是100％；P53和(或)C-erbB-2(合并表达)表达免疫组化阳性的敏感性是84．6％，特异性是88．1％。结论 C-erbB-2特异性高，临床上可用作胃癌肿瘤诊断的标记物。P53和C-erbB02双重表达在胃癌早期诊断中可作为一种辅助手段，合并表达能在临床活检筛检高危人群中起作用。     

革兰阴性杆菌β-内酰胺酶表型和基因型研究

目的了解铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)和金属β-内酰胺酶(MBL)的分布情况,并检测产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型鉴定。方法采用三维试验检测革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶,纸片协同法检测MBL,用聚合酶链反应(PCR)对ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行TEM型、SHV型、CTX-M型三种耐药基因检测并克隆测序。结果356株革兰阴性杆菌检出产酶株90株,检出率25.3%。单产ESBLs革兰阴性杆菌57株,检出率16.0%,以肺炎克雷伯(31.6%)、大肠埃希菌(31.0%)检出率高;单产AmpC酶4株,检出率1.1%,其中阴沟肠杆菌3株;同时产ESBLs和AmpC酶16株,检出率4.5%,以鲍曼不动杆菌(12.5%)检出率最高;产MBL细菌13株,均为非发酵菌,以嗜麦芽窄食单胞菌检出率最高,为71.4%。17株ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌有16株检出ESBLs耐药基因,其中CTX-M型15株(88.2%),TME型13株(76.1%),SHV型2株(11.8%),有11株细菌同时带有两种ESBLs基因,1株带有3种ESBLs基因。结论革兰阴性杆菌产生ESBLs、AmpC酶和MBL多种β内酰胺酶,铜陵地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX-M型为主。     

肿瘤患者T细胞核仁嗜银蛋白和辅助性T细胞亚群变化

目的 :探讨肿瘤患者外周血单个核细胞 (PBMC)中T细胞核仁嗜银蛋白 (AgNORs)表达和辅助性T(Th)细胞亚群变化的关系及其临床意义。方法 :采取肿瘤患者 86例、正常对照者 44例的外周血。PBMC经多克隆T细胞活化剂刺激 ,用图像分析法检测AgNORs区面积与细胞核仁面积的百分比 (I .S % ) ;PBMC用离子霉素和佛波醇酯活化 5h后 ,以酶联免疫斑点法 (ELISPOT)检测IFNγ和IL 4产生细胞的频度 (% ) ;用相同的活化剂刺激 2 4h ,用ELISA试剂盒检测培养上清液中的γ 干扰素 (IFNγ)和白细胞介素 4(IL 4)水平。结果 :肿瘤患者和正常人 ,AgNORs表达分别为 4.9± 1.2I .S %和 7.82± 1.2 8I .S % ,肿瘤组显著下降 (P <0 .0 5 ) ;肿瘤组PBMC中Th2细胞频度显著上升 ,Th1/Th2比值显著下降 ;同时 ,肿瘤组PBMC产生IFNγ和IL 4水平发生相应变化 ,变化方式与Th亚群变化相似 ;系统分析 5 1例肺癌 ,转移组比未转移组 ,复发组比未复发组 ,Th1细胞数、Th1/Th2和IFNγ产生水平显著下降 ;在肿瘤组AgNORs表达与Th1细胞频度、Th1/Th2、IFNγ产生和肿瘤患者生活状态的Karnofsky评分正相关。结论 :肿瘤患者PBMC中T细胞表达AgNORs下降 ,与患者Th1细胞功能下降呈正相关 ,与临床状态变化一致     

结肠直肠癌中FOXO4的表达与临床病理关系

目的：研究叉头样转录因子O4（FOXO4）在结肠直肠癌患者组织中的表达情况,并探讨FOXO4转录因子与结肠直肠癌发病间联系及临床意义。方法：选取结肠直肠癌102例患者手术切除肿瘤及其癌旁正常组织,应用免疫组织化学染色法检测FOXO4表达情况,并进一步分析其与患者临床病理参数的关系。结果：在CRC102例肿瘤组织中FOXO4阳性56例（54.9%）,显著低于FOXO4在癌旁组织中的表达91例（89.2%）,两者比较差异有统计学意义（χ2=27.335,P〈0.05）。肿瘤组织中FOXO4表达水平在患者年龄、性别,肿瘤大小和浸润深度间差异无统计学意义（P〉0.05）;但在肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移之间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：FOXO4转录因子可能既是一种细胞增殖的负性调节因子,亦是一种细胞凋亡促进因子,参与肿瘤的发生、分化及转移,发挥肿瘤抑制因子的作用。     

DNA直接银染测序法的建立和优化

目的：建立一种简便易行,灵敏经济的DNA直接银染测序法。方法：以标准DNApGEMR -3Zf( )(1g/L）为测序模板,测序电泳后,分别用银染试剂盒的银染色法及改良的银染色法进行染色,比较这两种方法的优劣。结果：改良的银染法具有操作简便,对显影温度不苛求,耗费少等优点。所显示的DNA带型与传统的方法比较,同样清晰可读,结论：优化的DNA直接银染测序法因简便经济,无放射性污染,更适合大多数实验室使用。