牙胚组织中成釉蛋白表达免疫组织化学和原位杂交的特点

目的:观察人牙胚组织中成釉蛋白的表达特点。方法:实验于2002-02/04在解放军第四军医大学口腔内科实验室完成。取孕5个月流产男性胎儿(产妇知情同意),截取上、下颌骨,常规方法制备人牙胚组织石蜡切片。用兔抗人AMBN多克隆抗体,对人牙胚组织石蜡切片和正常狗牙周组织石蜡切片进行免疫组织化学染色。标记人成釉蛋白cDNA探针,对人牙胚组织石蜡切片进行原位杂交。结果:①免疫组织化学染色发现成釉蛋白由内釉上皮细胞在分化为成熟成釉细胞前开始表达,分泌期成釉细胞高度表达并持续整个釉质形成期,新形成的牙釉质染色阳性;成牙本质细胞在分泌牙本质基质之前开始表达成釉蛋白,在牙本质形成过程中成牙本质细胞持续表达成釉蛋白,呈弱阳性,前期牙本质中呈弱阳性染色;上皮根鞘细胞染色阳性。狗牙周组织染色发现牙骨质表层细胞呈强阳性染色,新形成的牙骨质中可见阳性染色颗粒,呈网状分布。②对人牙胚组织石蜡切片的原位杂交显示,成釉蛋白在成釉细胞、成牙本质细胞、上皮根鞘细胞中有表达,表达部位与免疫组织化学结果一致。结论:内釉上皮首先表达成釉蛋白,之后前成牙本质细胞达成釉蛋白。成釉细胞、成牙本质细胞、上皮根鞘细胞表达成釉蛋白。     

转基因食品的快速PCR鉴定

用十六烷基-二甲基-乙基-溴化铵(CTAB)法快速高效地从样品中提取了可供分析的基因组DNA,经PCR扩增,鉴定了含有35S启动子和NOS终止子的转基因样品.该方法的灵敏度可达0.1%,并且具有很好的稳定性.     

快速杂交法定量检测HBV DNA及临床应用

目的：介绍一种快速定量检测HBV DNA的方法及临床初步应用。方法：对40例乙型肝炎病毒表面抗原阳性的慢性乙型肝炎患者共79份血清标本，采用Digene第二代杂交捕获试验(Hybrid Capture Ⅱ,HCⅡ,v2.0)定量检测HBV DNA，并与分枝链DNA信号扩增试验(bDNA，v1.0)作比较。结果：79份HBsAg阳性血清中，HCⅡ检出HBV DNA57份(72．2％)，bDNA法为45份(57％)，HCⅡ敏感性略高于bDNA法；2种方法定量检测HBV DNA的符合率为85.9％，相关性良好(r＝0．95)；19例抗病毒治疗乙肝患者，治疗后平均HBV DNA载量下降2(Log10)数量级，6例发生e抗原血清转换的患者平均HBV DNA载量下降3(Log10)数量级以上，且HBV DNA阴转早于e抗原血清转换。结论：HCⅡ比bDNA更为简便、经济、快速，可用于临床HBV DNA水平的定量检测、监控及抗病毒药物的筛选、考核。     

荧光偏振检测HBV DNA C区BCP双突变

目的：建立简便、灵敏的HBV DNA序列中BCP双突变点的检测方法．方法：采用终点终止法和偏振光检测技术进行点突变的检测．首先对HBV C区基因进行PCR扩增，然后用特异探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交，使探针的3’端可以在DNA聚合酶的催化下，依据其互补链上的待测核苷酸连接上一个标有特定荧光素的ddNTP，然后检测该3’端带有荧光素的探针，根据检测到的荧光素种类和偏振光的强度可以判定待测点是何种核苷酸．结果：该方法可以检测出HBV基因序列中BCP双突变核苷酸类型以及检测1个拷贝的模板，并且可以从BCP野性株DNA序列中检出5％BCP双突变DNA序列．结论：该技术可以检测血清中HBV DNA C区BCP双突变．     

使用回路介导等温扩增法迅速敏感诊断人细小病毒B19感染

背景:人细小病毒B19(B19)感染表现为多种皮损并与很多其他皮肤病相似,因此难以鉴别。B19感染的病原学诊断通常以费时的血清学试验和多聚酶链式反应(PCR)为依据。目的:本研究中使用一种DN A扩增法———回路介导等温扩增法(LAM P)来诊断B19感染,并与PCR法比较。方法:纳入10例B19     

化学振荡技术在中药研究中的应用

中药是一个多组分的复杂体系,质量监控因多方面因素较难实现,虽已有高效液相色谱等多种分析方法,但仍不十分理想,因此,有不少学者针对中药特性开展了多方面研究,力求开发一种既简便,又快捷,且能反映中药特性的分析方法。探讨采用电化学手段和振荡技术,获取中药及其制剂的特征振荡指纹图谱,依据图谱所反映的信息,确定中药种类及有关成分的量;通过15种草药和六味地黄中成药的振荡图谱,探讨了建立中药特征振荡图谱的理论,并进行了反应机制研究;介绍了中药特征振荡指纹图谱的研究方案及拟解决的关键问题;讨论了振荡体系对中药振荡图谱的影响,给出了中药振荡反应振荡系数的研究方法,基于图谱进行了动力学和反应机制研究。这种方法克服了中药化学成分复杂,相互干扰严重,难以确认的弊端,是一种新的研究手段。     

泽菲的临床应用及护理

泽菲（注射用盐酸吉西他滨）是一种新型抗肿瘤药物，是核苷同系物，属抗代谢类抗肿瘤药物。主要作用于肿瘤细胞的DNA合成期。临床上主要用于治疗局限或已转移的非小细胞肺癌。一般与顺铂联合应用，效果更佳。我科自2002年6月至今对30例病人用泽菲和顺铂联合化疗，近期疗效较好。因为其药物用量大，病人均出现不同程度的毒副反应。通过我们细心护理，病人均顺利完成治疗，未发生严重并发症。     

DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达与颅咽管瘤预后的关系

目的检测颅咽管瘤组织中DNA拓扑异构酶Ⅱα(DNATopoⅡα)的表达情况,分析其表达与肿瘤复发的关系,探讨其是否可作为判定颅咽管瘤预后的一个有效指标。方法设计前瞻性队列研究方案,采用免疫组化方法和图像分析技术测定63例颅咽管瘤组织切片中DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平,评价颅咽管瘤釉质上皮瘤与鳞状乳头瘤病理亚型、复发组与非复发组、原发组与复发组之间肿瘤细胞的增殖能力。结果32例釉质上皮瘤14例复发,31例鳞状乳头瘤6例复发;釉质上皮瘤与鳞状乳头瘤病理亚型之间以及复发组与非复发组肿瘤之间DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平有显著性差异(P<0.05),而原发组与复发组肿瘤之间DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平无统计学差异(P>0.05)。结论颅咽管瘤的病理亚型以及DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平与肿瘤的预后和复发有关,可作为预测肿瘤复发危险性的一个参考指标;DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平在原发组和复发组肿瘤之间无显著性差异,提示肿瘤在复发过程中瘤细胞的增殖活性无明显变化。     

乙肝两对半模式与乙肝DNA关系的探讨

目的:通过326例血清标本同时进行乙肝两对半和乙肝病毒核酸扩增酶联定量(HBVDNA)检测,探讨乙肝两对半不同模式和乙肝病毒HBVDNA之间的关系,说明依靠乙肝两对半进行诊治和判定是否具人传染性是不够的。     

抗肿瘤药物作用的重要靶点—DNA拓扑异构酶

目前，以ＤＮＡ拓扑异构酶为靶点的抗肿瘤药物研究受到了广泛的重视，发现了许多新的有效抗肿瘤药物。本文对它的历史沿革和生理学特性进行了简要的综述，以便更深入地了解其生理功能，为抗肿瘤药物的设计提供新思路。