A purified extract from Clematis mandshurica prevents staurosporin-induced downregulation of 14-3-3 and subsequent apoptosis on rat chondrocytes

OBJECTIVE: To dissect the mechanism of the protection of staurosporin-induced apoptosis on rat chondrocytes by a purified extract from Clematis mandshurica. DESIGN: Primary cultured rat articular chondrocytes as well as RCJ3.1C.18 cells were incubated with 1 microM staurosporin and 300 microg/ml purified extract from Clematis mandshurica. Western blot assay, silencing 14-3-3 gene and immunoprecipitation were conducted. RESULTS: Clematis mandshurica prevented staurosporin-induced downregulation of several antiapoptotic bcl-2 family proteins Bcl-xL and Bcl-2, and staurosporin-induced upregulation of an apoptotic bcl-2 family protein Bax. Clematis mandshurica also prevented staurosporin-induced downregulation of a premitochondrial antiapoptotic protein 14-3-3. It is noticeable that siRNA to 14-3-3 abolished the prevention of caspase-3 activation by Clematis mandshurica. Furthermore viability assay corroborated that silencing of 14-3-3 gene abolished this apoptosis protection efficacy by Clematis mandshurica. Immunoprecipitation assay elucidated that Clematis mandshurica prevented the staurosporin-induced reduction of the interactions between 14-3-3 with phospho-ser112-Bad and Bcl-xL to phospho-ser155-Bad. CONCLUSIONS: Clematis mandshurica prevents staurosporin-induced apoptosis of rat chondrocytes via 14-3-3.     

太行铁线莲生药学初步研究

对太行铁线莲进行了原植物,药材性状,显微鉴定等生药学方面的初步研究,并与威灵仙作对比区别,以澄清混乱,挖掘中药资源。     

基于高通量测序技术的9种铁线莲属药材混合粉末分子鉴定

目的 建立基于高通量测序技术的9种铁线莲属混合粉末分子鉴定方法。方法 采用高通量测序技术,对9种铁线莲属药材混合粉末样品中的总DNA经提取,对ITS2片段进行PCR扩增,利用IlluminaMiSeq平台对DNA片段进行双端测序,最后采用 FLASH、QIIME、GraPhlAn及 MEGA 7.0 软件对序列进行整理并聚类分析,鉴定混合粉末中的物种。结果 混合粉末样品中得到高质量的ITS2序列共496条,铁线莲属物种含有序列72条,比对出棉团铁线莲、女萎铁线莲、短尾铁线莲、灌木铁线莲、单叶铁线莲、黄花铁线莲、粗齿铁线莲等7个物种,未能比对出东北铁线莲和芹叶铁线莲。结论 以ITS2 作为条形码,采用高通量测序技术,可以鉴定出铁线莲属药材混合样品中的 7个物种,为混合药材的鉴定提供依据。     

棉团铁线莲中新葡萄糖基萘类成分

目的：研究棉团铁线莲（Clematis hexapetala Pall.）的干燥根及根茎的化学成分方法：利用溶剂提取、硅胶柱色谱和高效液相色谱等技术进行分离、纯化，根据理化性质和坡谱数据鉴定化合物的结构，结果：从中分离得到1个葡萄糖基萘类化合物，鉴定为5，8-二氢-6-甲基萘-1，4-二-O-β-D-葡萄糖苷（1），结论：该化合物为一新化合物，丰富了棉团铁线莲的化学成分.     

中药透骨草的形态组织学研究

目前中药应用的透骨草主要有五种——大戟科植物地构叶Speranskia tuberculata(Bunge)Baill.的地上部分、凤仙花科植物凤仙花Impatiens balsamlna L.的地上茎、紫葳科植物角蒿Incarvillea sinensis Lam.的地上部分、毛茛科植物黄花铁线莲Clematis intricata Bunge的地上部分(黄花铁线透骨草)和细叶铁线莲C.aethusaefolia Turcz.的地上部分(细叶铁线透骨草)的生药形态、组织构造及粉末特征。     

中药玉竹的本草考证

目的:研究本草中记载的中药玉竹的基源植物,并对中药玉竹进行全面的本草考证,为研究中药玉竹提供文献依据。方法:查阅历代本草书籍,从形态、功效以及炮制方法鉴别女萎和葳蕤,又对中药玉竹进行本草考证,分别进行了名字来源的考证,植物形态的考证以及对其功效进行了论证,并对现代玉竹的食用价值进行研究。结果:考证出玉竹在历代本草品种来源:本草中记载的葳蕤为现代百合科植物玉竹Polygonatum odoratum,本草中记载的女萎为今毛茛科植物女萎Clematis apiifolia。玉竹的本草考证包括名字来源的考证,玉竹又名荧,地节,马薰,称为玉竹以表示根状茎形状。茎似小竹竿,叶光莹如竹叶,地下根状茎长而多节,故有玉竹和地节之称。形态考证:根状茎圆柱形,互生叶,叶椭圆形,先端尖。玉竹功效为滋阴润肺,养胃生津。玉竹现代不只作为药品应用,还广泛应用在保健品以及食疗中。结论:玉竹作为传统的药食两用的中药材,适应广,用量大,疗效好。加强对玉竹的应用研究,生产方面的管理,形成一个完整的管理体系,将玉竹作为一个产业来开发,把玉竹的产业做大、做强,让玉竹走向现代化,走向世界的发展方向。表明玉竹具有开发利用的前景。     

基于网络药理学探讨威灵仙-天花粉药对抗癌的作用机制

目的:基于网络药理学探讨"威灵仙-天花粉"抗癌症的潜在靶点和作用机制。方法:应用中药系统药理学分析平台(TCMSP)根据口服生物利用度(OB)和类药性(DL)对威灵仙和天花粉的活性成分和相应靶蛋白进行筛选;应用GeneCards,OMIM数据库筛选癌症疾病的靶点,应用R语言软件筛选威灵仙、天花粉与癌症疾病共同靶点;应用Cytoscape3.7.2软件构建"药物-活性成分-疾病-靶点"网络图;应用STRING数据库绘制共同靶点蛋白互作网络(PPI);应用R语言软件对有效作用靶点进行基因本体(GO)功能,京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:从威灵仙-天花粉药对中共获得9个有效活性成分,共检索出31个靶点基因,从癌症疾病中检索出的相关靶基因为814个,两者相关靶基因进行匹配,得到共同靶基因9个,这些靶点主要涉及内肽酶、半胱氨酸型内肽酶活性参与凋亡过程以及癌症坏死因子受体超家族结合等生物学过程,并通过调节细胞凋亡,麻疹,乙型肝炎,卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染,p53,白细胞介素(IL)-17,肿瘤坏死因子(TNF)等多条通路从而发挥治疗癌症的作用。结论:初步研究了威灵仙-天花粉治疗癌症的作用机制,威灵仙-天花粉药对具有多个活性成分,能通过多个靶点、多个通路来发挥治疗癌症的作用。     

威灵仙注射液关节腔离子导入对骨关节炎NO、SOD和PGE2的影响

目的:研究威灵仙注射液关节腔离子导入对骨关节炎NO、SOD和PGE2的影响。方法:新西兰兔40只,除保留10只作为正常组外,余均采用木瓜蛋白酶关节腔注射复制OA模型。造模4周后,根据模型动物关节肿胀度随机分为模型组、威灵仙组(Wlx组)、醋酸曲安奈德组(Qand组)。实验结束时,抽取各组动物关节滑液进行NO、SOD和PGE2的检测。结果:与模型组相比较,Wlx组和Qand组动物关节滑液中的NO和PGE2的含量显著降低(P0.05),SOD的含量升高(P0.05);但与Qand组相比,Wlx组动物关节滑液中NO和PGE2的抑制作用显著弱于Qand(P0.01),对升高SOD有微弱的优势。结论:威灵仙关节腔离子导入可能具有抑制炎症相关因子NO、PGE2的释放和增强SOD的活性来减缓OA的病变过程。     

铁线莲属蒙药材的rDNA-ITS序列分析

目的:比较研究铁线莲属入蒙药的6种药用植物(芹叶铁线莲、长瓣铁线莲、黄花铁线莲、棉团铁线莲、辣蓼铁线莲、短尾铁线莲)的rDNA - ITS序列差异性及其规律,寻找6种植物药之间的分子鉴别方法.方法:从铁线莲属蒙药材中提取总DNA,用PCR法扩增ITS,运用Clustal X、MEGA等软件比较和分析ITS的序列特征.结果:铁线莲属入蒙药的6种药用植物ITS序列长度为548～552bp,具变异位点57个,其中信息位点23个,特异性鉴别位点33个.序列已提交至NCBI数据库,登录号为JN809679 - JN809684.结论:ITS序列对铁线莲属入蒙药的6种药用植物具有较好的分辨性,为铁线莲属蒙药材分子鉴别提供了参考.     

不同产地甘木通药材多谱图鉴定及质量控制

目的:构建甘木通药材的薄层色谱(TLC)、高效液相色谱(HPLC)、傅里叶红外光谱(FTIR)、气相色谱-质谱(GC-MS)多谱图体系,控制其质量。方法:采用HPLC法测定药材中的山柰素含量,色谱柱为WatersXbridgeC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%冰乙酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为326nm;TLC法中甘木通石油醚部位与乙酸乙酯部位的展开剂分别为石油醚-甲醇(9:1)和氯仿-甲醇(9:1);采用FTIR法对石油醚和乙酸乙酯部位的特征吸收峰进行标注;采用GC-MS联用法分析甘木通的挥发油成分。结果:不同产地甘木通药材在TLC、HPLC与IR图中有共性的特征峰用于定性;HPLC测定山柰素含量可用于定量;GC-MS法共鉴定出37个组分。结论:多谱图体系可综合鉴定甘木通药材并用于其质量控制。