Molecular characterization of L-amino acid oxidase from king cobra venom.

An L-amino acid oxidase from Ophiophagus hannah snake venom (Oh-LAAO) was purified by successive gel filtration, ion-exchange and heparin chromatography. Oh-LAAO did not induce platelet aggregation; however, it had potent inhibitory activity on platelet aggregation induced by ADP and U46619, but showed no effect on platelet aggregation induced by thrombin, mucetin, ristocetin and stejnulxin. By RT-PCR and 5'-RACE methods, the complete Oh-LAAO cDNA was cloned from the venom gland total RNA preparations. The cDNA sequence contains an open-reading frame (ORF) of 1476-bp, which encodes a protein of 491 amino acids comprising a signal peptide of 25 amino acids and 466-residue mature protein. The predicted protein sequence of Oh-LAAO was confirmed by N-terminal and trypsin-digested internal peptides sequencing together with peptide mass fingerprinting. cDNAs encoding for ORF of LAAOs from Bungarus fasciatus and B. multicinctus were cloned and reported in this study. In addition, partial cDNA encoding for Naja atra LAAO was also reported. Oh-LAAO shared approximately 50% protein sequence identity with other known snake venom LAAOs. Phylogenetic analysis indicated that Oh-LAAO is evolutionary distant to other snake venom LAAOs.     

咖啡酸苯乙酯对糖尿病大鼠视网膜VEGF和ICAM-1表达的影响

【摘要】 目的 观察咖啡酸苯乙酯对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子（VEGF ）和细胞间黏附因子-1（ICAM-1）蛋白表达的影响。方法 将30只STZ诱导的糖尿病大鼠随机分为3组,糖尿病组（DM,n=10）,CAPE低剂量治疗组（CAPE5,n=10）,CAPE高剂量治疗组（CAPE10,n=10）。另取10只大鼠作为正常对照组（CON,n=10）。饲养三个月后,取大鼠双眼视网膜做组织匀浆,Elisa法检测视网膜VEGF 和ICAM-1的表达。结果 腹腔注射咖啡酸苯乙酯（CAPE）后,糖尿病大鼠视网膜VEGF和ICAM-1蛋白水平表达降低,低剂量治疗组可分别减少40%VEGF和29% ICAM-1蛋白的表达,高剂量治疗组可分别减少42%VEGF和44% ICAM-1蛋白的表达。 结论 咖啡酸苯乙酯可减少糖尿病大鼠视网膜VEGF 和ICAM-1蛋白的表达。     

HPLC法测定益欣雪中的阿司匹林含量及水杨酸限量检测

目的建立益欣雪中阿司匹林含量测定及水杨酸限量检测的HPLC方法。方法色谱柱为shim-packCLC-ODS柱,流动相为乙腈-水(25;75)冰醋酸调pH值至3．0,流速1．omL．min^-1,检测波长为276nm(阿司匹林),300nm(水杨酸限量检测)。结果阿司匹林的平均回收率为100．4%(RSD=1．52％),重复性RSD为1．2％。水杨酸限量检测HPLC方法简单、有效、专属性高。结论方法可用于益欣雪的质量标准研究。     

白桦酸类化合物的研究进展

白桦酸类化合物是一类可以从多种植物中分离得到的天然产物，包括白桦酸、23-羟基白桦酸、白桦素及其衍生物等，是一类结构及作用机制相对新颖、具有抗HIV-1和抗肿增活性的天然化合物。对这类化合物的结构修饰和改造，目前已经获得大量具有良好生物活性的衍生物。现对这方面的研究进展进行综述。     

甘草浸膏HPLC指纹图谱及多指标成分含量测定研究

目的 建立甘草浸膏HPLC指纹图谱及多指标成分含量测定方法。方法 采用HPLC建立甘草浸膏的指纹图谱,并通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统对13家企业的35批次样品进行相似度评价;以甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、新异甘草苷、甘草查尔酮B和甘草酸6种成分为指标,采用Boston Green ODS色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈（A）-0.1%甲酸（B）为流动相,梯度洗脱,建立了甘草浸膏的多指标HPLC含量测定方法。结果 建立了甘草浸膏HPLC指纹图谱,标定了22个共有峰,并指认了其中10个共有峰,35批样品相似度均>0.96,说明各批次甘草浸膏有较好的一致性;建立了6种指标成分含量测定方法,方法学考察符合规定。结论 本实验所建立的方法准确、简便、重复性好,可用于全面评价甘草浸膏的质量。     

高效液相色谱法同时测定脑血栓片中丹参素、原儿茶醛、芍药苷、阿魏酸和丹酚酸B的含量

目的:建立同时测定脑血栓片中丹参素、原儿茶醛、芍药苷、阿魏酸和丹酚酸 B 含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱:Zorbax Extend-C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相:1%甲酸甲醇溶液(A)-1%甲酸溶液(B),梯度洗脱[0～8 min,A-B(8:92);8～23 min,A-B(8:92)→A-B(40:60)],流速1.0 mL·min~(-1),柱温30℃,检测器:DAD 检测器,检测波长为280 nm。结果:丹参素、原儿茶醛、芍药苷、阿魏酸和丹酚酸 B 的线性范围分别为0.072～0.72μg(r=0.9999),0.04～0.4μg(r=0.9999),0.032～0.32μg(r=0.9999),0.002～0.02μg(r=0.9993),0.08～0.8μg(r=0.9997);平均加样回收率(n=3)分别为97.2%,97.7%,98.3%,98.3%,96.7%。结论:本方法简便快速,结果准确可靠,适用于脑血栓片的质量控制。     

总丹酚酸的抗脑缺血研究

目的探讨总丹酚酸对脑缺血的影响及其相关机制。方法脑缺血模型采用ＭＣＡＯ,离体测定总丹酚酸对脂质过氧化、超氧阴离子、羟自由基的作用。结果发现在ＭＣＡＯ模型上,总丹酚酸１２５～２５ｍｇ·ｋｇ－１有缩小脑梗塞面积、减轻脑水肿之功效,离体研究发现,总丹酚酸抗氧化作用极为明显,５～５０ｍｇ·Ｌ－１时可抗Ｆｅ２＋ 半胱氨酸诱导的肝微粒体脂质过氧化、清除黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子、清除Ｆｅ２＋ Ｈ２Ｏ２体系产生的羟自由基作用,且同等剂量下均强于对照药ＶｉｔＥ。结论总丹酚酸有抗脑缺血作用,机制与抗氧化有关。     

不同商品规格川贝母总生物碱含量测定的方法研究

目的 建立酸性染色法用于测定川贝母中总生物碱的含量.方法 采用三氯甲烷-甲醇(4∶1)混合溶液提取川贝母总生物碱;采用酸性染料染色法,以西贝母碱为指标成分,测定总生物碱的含量.结果 4个规格川贝母样品中总生物碱含量均符合2010年版《中国药典(一部)》的规定.结论 该方法不需要复杂仪器、操作简便,可作为川贝母的质量检测方法.     

盐酸伐昔洛韦联合美能治疗带状疱疹的临床应用观察

目的评价盐酸伐昔洛韦合美能(复方甘草甜素)治疗带状疱疹的临床应用情况。方法回顾性分析入院就诊的100例带状疱疹患者,其中50例患者给予盐酸伐昔洛韦0.13g,2次/d口服;另50例患者B组给予盐酸伐昔洛韦联合美能。疗程均为10d,记录用药后临床症状和体征变化情况。并比较疼痛消失时间、结痂时间,并进行有效率的比较。结果 A组患者的治疗有效率低于B组。在不良反应、疼痛消失时间、结痂时间上B组优于A组(P<0.05)。结论盐酸伐昔洛韦联合美能治疗带状疱疹疗效好,见效时间快,并可降低后遗神经痛的发生率。在临床上有较好的临床应用。     

盐酸甲氯芬酯的合成

目的合成盐酸甲氯芬酯。方法以对氯苯氧乙酸和N,N-二甲基乙醇胺为起始原料,以对甲苯磺酸为催化剂,在甲苯条件下共沸分水,进行酯化反应,制得甲氯芬酯。然后在异丙醇中直接加入氯化亚砜进行成盐,最终制得盐酸甲氯芬酯。结果两步收率达到60%。结论此工艺条件简单可行,成本低,且适合工业化生产。