缬沙坦对糖尿病大鼠肾皮质中肾上腺髓质素受体(ADMR)表达的影响

目的 探讨缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用.方法 30只SD大鼠随机均分为正常对照组(N组)、糖尿病未干预组、糖尿病大鼠缬沙坦干预组.采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病动物模型,缬沙坦干预组以缬沙坦10mg/(kg·d)灌胃.8周后通过RT-PCR和Western blot方法,以GAPDH为内参照,检测肾皮质中肾上腺髓质素受体(ADMR) mRNA和蛋白的表达. 结果缬沙坦干预组较糖尿病未干预组大鼠体重明显增加(P＜0.01), 24h尿白蛋白排泄率显著降低,两组糖化血红蛋白及血糖比较无显著性差异;缬沙坦干预组大鼠肾皮质中ADMR mRNA和蛋白的表达显著高于糖尿病未干预组.结论 缬纱坦可上调糖尿病大鼠肾皮质中ADMR基因和蛋白的表达;ADMR可能参与了缬沙坦对肾脏的保护作用.     

肾上腺髓质素对缺氧复氧诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞凋亡的影响及其机制

目的 探讨肾上腺髓质素(ADM)对缺氧复氧(HR)诱导的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡的影响及其机制.方法 体外培养的NRK-52E细胞,随机分为4组:正常对照组、HR组、空质粒+HR组、ADM质粒+HR组.采用Fugene HD转染试剂,将pcDNA3.1-myc-his B空质粒和ADM真核表达质粒分别转染至NRK-52E细胞内,应用免疫细胞化学的方法检测转染效率,转染成功48 h后制作HR模型.锥虫蓝摄取法进行细胞计数并计算细胞存活率,分光光度法检测上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量评价细胞活力;Annexin V和PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡率;RT-PCR法检测ADM、Bax、Bcl-2、Fas的mRNA表达;Western印迹法检测活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、8、9(Caspase-3、8、9)的蛋白表达.结果 HR组ADM的表达显著高于正常对照组(P＜0.05).ADM质粒+HR组的ADM表达显著高于空质粒+ HR组(P＜0.05).与正常对照组相比,HR组活细胞计数和细胞存活率显著降低,LDH含量及细胞凋亡率显著升高,Bax、Bcl-2、Fas、活性Caspase-3、8、9表达显著上调,Bax上调更明显,故Bax/Bcl-2升高(均P＜0.05).与HR组相比,ADM质粒+HR组活细胞计数和细胞存活率显著升高,LDH含量及细胞凋亡率显著降低,Bax、Fas、活性Caspase-3、8、9表达显著下调,Bcl-2表达进一步上调,Bax/Bcl-2降低(均P＜0.05).空质粒+HR组和HR组比较,上述各指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 ADM在NRK-52E细胞中的高表达可以减轻HR诱导的细胞凋亡,其机制至少部分是通过抑制线粒体通路和死亡受体通路实现的.     

黑皮素-1受体在瘢痕疙瘩中的表达及基因沉默黑皮素-1受体对成纤维细胞增殖的影响

目的检测黑皮素-1受体(MC-1R)在瘢痕疙瘩中的表达,同时研究基因沉默黑皮素-1受体对成纤维细胞增殖的影响。方法用MTT法比较α-MSH对正常皮肤成纤维细胞(hDF)和瘢痕疙瘩成纤维细胞(hKF)增殖能力的影响;用qPCR法检测正常皮肤及瘢痕疙瘩组织中MC-1R的表达水平;用MTT法检测RNA干扰MC-1R基因后对α-MSH抑制hDF增殖能力的影响。结果α-MSH可抑制hDF的增殖,而未对hKF的增殖产生明显影响;与正常皮肤组织相比,瘢痕疙瘩组织中MC-1R的mRNA表达水平明显下降,而α-MSH的表达增加;最后,将hDF转染MC-1R siRNA后,α-MSH对其增殖能力的抑制程度显著降低。结论瘢痕疙瘩中MC-1R表达降低,导致α-MSH抑制hKF增殖的功能无法实现,促进了瘢痕疙瘩的形成。     

Prediction about severity and outcome of sepsis by pro-atrial natriuretic peptide and pro-adrenomedullin

Objective： Measurement of biomarkers is a potential approach to early prediction of the risk of mortality in patients with sepsis. The aim of the present study was to evaluate the prognostic value of pro-atrial natriuretic peptide （pro-ANP） and pro-adrenomedullin （pro- ADM） levels in a cohort of medical intensive care patients and to compare it with that of other known biomarkers and physiological scores. Methods： Blood samples of 51 consecutive critically ill patients admitted to the intensive care unit and 53 age-matched healthy control people were evaluated in this prospective study. The prognostic value ofpro-ANP and pro-ADM levels was compared with that of acute physiology and chronic health evaluation （APACHE） II scores and various biomarkers such as C-reactive protein, interleukin-6 and procalcitonin. Pro-ANP and pro-ADM were detected by a new sandwich immunoassay. Results： On admission, 25 patients had systemic inflammatory response syndrome （SIRS）, 12 sepsis, 9 severe sepsis and 5 septic shock. At that time, the median levels （ng/ml） of pro-ANP and pro-ADM were 87.22 and 0.34 respectively in patients with SIRS, 1533.30 and 2.23 in those with sepsis, 1098.73 and 4.57 in those with severe sepsis, and 1933.94 and 8.21 in those with septic shock. With the increasing severity of disease, the levels of pro- ANP and pro-ADM were gradually increased. On admission, the circulating levels ofpro-ANP and pro-ADM in patients with sepsis, severe sepsis, or septic shock were significantly higher in non-survivors than in survivors （P〈0.05）. In a receiver operating characteristic curve analysis for the survival of patients with sepsis, the areas under the curve （AUCs） for pro-ANP and pro-ADM were 0.89 and 0.87 respectively, which was similar to the AUCs for procalcitonin and APACHE II scores. Conclusion： Pro-ANP and pro-ADM are valuable biomarkers for prediction of severity of septic patients.     

黑皮质素4型受体在大鼠脊髓星形胶质细胞释放兴奋性氨基酸中的作用

目的 探讨黑皮质素4型受体(MC4R)在大鼠脊髓星形胶质细胞释放兴奋性氨基酸中的作用.方法 原代培养大鼠脊髓星形胶质细胞,随机分为3组,每组6孔:正常白对照组(C组)、T组和TH组.C组未作任何处理,T组加入终浓度为10μg/L的TNF-α;TH组同时加入终浓度为10μg/L的TNF-α和终浓度为1 μmol/L的MC4R特异性阻断剂HS014.各组孵育3 h后采用高效液相-串联四级杆质谱法检测上清液谷氨酸(Glu)和天门冬氨酸(Asp)的浓度.结果 与C组比较,T组Glu和Asp浓度升高(P＜0.01),TH组Glu和Asp浓度差异无统计学意义(P＞0.05);与T组比较,TH组Glu和Asp浓度降低(P＜0.01).结论 MC4R介导了大鼠脊髓星形胶质细胞释放兴奋性氨基酸的作用.     

乳腺癌患者血清中ADM的表达及其意义

目的:探讨肾上腺髓质素(ADM)在乳腺癌患者血清中的表达情况。方法:应用ELI SA方法检测36例乳腺癌患者手术前、手术后及15例健康人的血清ADM的水平进行分析。结果:乳腺癌患者血清中ADM表达水平与健康对照组比较无差异(P>0.05);乳腺癌患者手术前血清中ADM的表达水平高于手术后的水平(P<0.05)。肿瘤大小T1、T2、T3的乳腺癌患者血清中ADM的表达水平有差异(P<0.05);相关分析显示呈正相关,肿瘤直径越大,患者血清ADM水平越高(P<0.05)。结论:乳腺癌患者血清中的ADM的主要来源是肿瘤组织,其高表达与乳腺癌的恶性行为有关,可能与乳腺癌的转移、发生、发展有重要关系。随着乳腺癌的疾病进展,肿瘤越大,临床分期越晚,患者血清的ADM表达水平越高。     

肾上腺髓质素前体肽段（45—92）的心血管效应

目的：观察肾上腺髓质素前体肽段４５－９２的心血管效应。方法：离体大鼠血管灌流，离体心脏灌流和整体动物心血管功能测定。     

内分泌疾病

内分泌疾病齐藤寿一等一、心血管、水电解质肾上腺髓质素（ａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｉｎ，ＡＭ）是１９９３年从嗜铬细胞瘤组织中发现的由５２个氨基酸组成的降压肽。ＡＭ作用于血管平滑肌细胞借助增加ｃＡＭＰ舒张血管，并抑制血管平滑肌细胞的增殖。此外，ＡＭ也作用于血...