二噁英对大鼠卵巢颗粒细胞分泌功能的影响

分别以4．00、0．40、0．04ng/ml浓度的2,3,7,8-四氯苯二噁英（TCDD）对体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞进行24h染毒,测定细胞活性和细胞分泌产物（雌二醇和孕酮）含量。结果显示,各染毒组与对照组比较,雌二醇和孕酮水平均有所降低,差别有统计学意义（P〈0．01）,且有剂量-反应关系。提示TCDD抑制大鼠卵巢颗粒细胞分泌功能。     

转化生长因子-β和Smad4在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达

目的 探讨转化生长因子-β（TGF-β）、Smad4 在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达,分析其与卵巢功能衰退的关系。 方法 雌性SD大鼠分为对照组（C组,6月龄,阴道涂片筛选,n=9）、绝经过渡期组（MT组,12~14月龄,阴道涂片筛选,n=8）,大鼠麻醉处死后迅速取出卵巢,采用机械分离方法释放卵泡颗粒细胞,于CO₂培养箱中培养,利用免疫细胞化学法检测促卵泡刺激素受体（FSHR）蛋白的表达,鉴定卵巢颗粒细胞;免疫细胞化学法检测TGF-β、Smad4蛋白在两组卵巢颗粒细胞的表达;采用Real-time PCR的方法检测各组颗粒细胞中TGF-β、Smad4 mRNA的表达。 结果 免疫细胞化学显示分离培养的颗粒细胞纯度＞95%,MT组TGF-β、Smad4蛋白表达水平低于对照组（P<0.05）;Real-time PCR结果显示,两组均有TGF-β、Smad4 mRNA的表达,MT组TGF-β、Smad4 mRNA表达水平显著低于对照组（P<0.05）。 结论 TGF-β、Smad4参与绝经过渡期大鼠卵巢功能的衰退过程,绝经过渡期大鼠功能衰退的部分原因可能与卵巢颗粒细胞中TGF-β、Smad4 的表达降低有关。     

补肾活血方对卵巢早衰模型大鼠性激素水平及颗粒细胞凋亡调控相关因子的影响

  目的：探讨补肾活血方对卵巢早衰大鼠性激素水平及颗粒细胞凋亡调控因子B淋巴细胞瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响  方法：将SD大鼠随机分为6组,包括空白组、模型组、生理盐水对照组(简称对照组)及补肾活血方中药低、中、高剂量组。除空白组外,其余各组均用雷公藤多苷(终浓度50 μg/g)连续灌胃14天建立卵巢早衰大鼠模型。其后各组给予相应干预。观察大鼠动情周期改变及大鼠卵巢组织形态学变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测大鼠血清雌二醇(E₂)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)水平;采用免疫组化方法检测颗粒细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3 的表达  结果：①与空白组比较,模型组大鼠血清FSH水平明显升高(P<0.05),LH水平有一定程度升高,且E₂水平有所降低,但LH及E₂的改变差异不显著(P>0.05);中药各剂量组大鼠FSH水平较模型组显著降低(P<0.01);LH水平除中药高剂量组外,低、中剂量组明显低于模型组(P<0.01);补肾活血方组大鼠E₂水平与模型组比较,除中剂量组外均有明显升高(P<0.01)。②免疫组化染色结果显示,模型组大鼠颗粒细胞Bax、Caspase-3蛋白表达较空白组明显上升(P<0.01),Bcl-2 蛋白有所下降,但下降幅度不明显(P>0.05);中药各剂量组大鼠卵巢颗粒细胞Bax及caspase-3的表达均显著下降(P<0.01),而Bcl-2 蛋白表达仅略有增强(P>0.05)  结论：雷公藤多苷可诱发大鼠卵巢颗粒细胞凋亡致卵巢早衰;补肾活血方能降低Bax 及Caspase-3蛋白的表达,减轻颗粒细胞的凋亡,从而对雷公藤多苷所致卵巢早衰起到治疗作用。     

细胞凋亡途径探讨二仙汤治疗大鼠卵巢早衰实验研究

目的：通过卵泡颗粒细胞的凋亡途径探讨二仙汤对化疗性损伤卵巢早衰的影响。方法：将SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性组和二仙汤组,腹腔注射顺铂建立化疗性损伤大鼠卵巢早衰动物模型。造模后连续4周各组灌胃给予相应药物治疗。观察大鼠一般情况;测定血清中E2、FSH、LH和Pro含量;观察卵巢组织形态;TUNEL法分析卵泡颗粒细胞的凋亡;免疫组化检测BAX、Bcl-2和VEGF蛋白的表达情况。结果：模型组体质量下降,动情周期紊乱,治疗后体质量增加,动情周期恢复。与正常组比较,模型组E2、LH下降,FSH水平升高,Pro含量各组比较无显著差异。TUNEL检测模型组较正常组阳性表达增多,二仙汤组较模型组阳性表达减少。模型组较正常组BAX表达明显升高,Bcl-2下降,二仙汤治疗后与模型组比较BAX表达量下降,Bcl-2表达升高;VEGF蛋白在模型组中表达明显低于正常组,二仙汤组较模型组表达增多,阳性组表达略有恢复。结论：顺铂可致卵泡颗粒细胞凋亡,造成卵巢功能过早衰退;二仙汤通过调节血清中各激素含量,改变凋亡细胞相关蛋白的表达量来降低顺铂对卵巢的损害,促进卵泡发育,改善并增强卵巢功能。     

山茱萸总萜调控伴胰岛素抵抗的PCOS大鼠及其卵巢颗粒细胞分泌作用的机制

目的研究山茱萸总萜调控伴胰岛素抵抗的PCOS大鼠及其卵巢颗粒细胞分泌作用的机制。方法22日龄雌性SD大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠9 mg·100g-1·d-1共20 d,伴高脂饮食喂养60 d建立伴IR的PCOS大鼠模型,将PCOS大鼠随机分为模型组和治疗组。治疗组以山茱萸总萜、氯米芬和罗格列酮干预。葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖（FBG）。放射免疫法测定空腹胰岛素（Fins）、睾酮（T）、雌二醇（E2）、促卵泡刺激素（FSH）和黄体生成素（LH）的含量。同时,随机取各组大鼠2只皮下注射PMSG 10 IU/kg,48 h后颈椎脱臼法处死。在无菌条件下迅速剖取卵巢,刺破卵泡,获取卵巢颗粒细胞。光镜观察卵巢形态及颗粒细胞分布,用不同浓度山茱萸总萜、氯米芬和罗格列酮干预培养,检测颗粒细胞对葡萄糖的摄取量和分泌孕激素（P）的量。结果与模型组比较,治疗组大鼠Fins浓度均显著降低（P<0.01）,ISI显著升高（P<0.01）,T和E2浓度均显著降低（P<0.01）,FSH浓度显著升高（P<0.01）,大鼠卵巢卵泡内颗粒细胞层数明显增加,孕激素分泌增加（P<0.05）,葡萄糖摄取能力增加（P<0.05）。与氯米芬和罗格列酮双阳性对照组相比,无明显区别（P＞0.05,P＞0.05）。结论山茱萸总萜可改善胰岛素抵抗,细胞葡萄糖摄取,并增加其雌激素和孕酮的分泌。     

正常卵巢与多囊卵巢的颗粒细胞E2和P的产生及其卵泡液中E2和雄？…

为了解正常卵巢与多囊卵巢颗粒细胞功能的异同。本研究对１２例正常人卵泡期的２５个卵泡和７例ＰＣＯ的约６０个卵泡的颗粒细胞进行了培养，用放免法测定卵泡液中雌二醇和雄烯二酮及培养液中Ｅ２和孕酮的含量。结果表明ＰＣＯ的颗粒细胞对ＦＳＨ和ＬＨ刺激更敏感，产生更多的Ｅ２和Ｐ。     

垂体腺苷酸环化酶激活肽增加新生大鼠小脑颗粒细胞钙通道电流

应用膜片箝"全细胞"电流记录方法，研究了垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP）对新生大鼠小脑颗粒细胞高电压激活（HVA）的钙电流作用。实验结果发现：PACAP－38、PACAP－27能明显增加小脑颗粒细胞钙电流的幅值，两者增加钙内流的效应无显著差异，并且都具有脱敏现象；而出于同一家族的血管活性肠肽（VIP）对此电流却没有任何影响。当记录电极内加入GTPγS后，PACAP增加钙电流的效应成为不可逆；而细胞内液加入GDPβS或预先用百日咳毒素孵育细胞12h后，PACAP的钙通道激活作用完全消失。此外，细胞内应用cAMP和磷酸二酯酶抑制剂3－isobutyl－1－methylxanthine（IBMX），既不影响钙通道本身的活动，也不修饰PACAP增加颗粒细胞钙通道电流的效应。我们的结果提示：新生大鼠小脑颗粒细胞上存在着具有功能意义的PACAP受体，该受体被PACAP－38和PACAP－27激活后可增加细胞膜上钙通道的开放，促进钙内流。PACAP的这种作用与百日咳毒素敏感的G蛋白偶联，但并不依赖腺苷酸环化酶参与的第二信使系统。     

双侧卵巢幼年型颗粒细胞癌1例

患女，14岁，因腹痛腹胀一周于2000年12月26日住院。患月经规律，12岁初潮，间隔30天，每次4至6天，经量中等，无痛经。查体：体温36．5度，脉搏93次/分，呼吸18次/分，血压120／60mmHg，一般状况好，生长发育正常，无性早熟。皮肤无黄染。腹部膨隆，全腹轻压痛，无反跳痛及肌紧张，肝脾肋下未触及，