凋亡对女性生殖细胞的调节作用

卵泡被一层颗粒细胞包绕阻滞于减数分裂Ⅰ期，这种生殖细胞体细胞单位叫做卵泡，以后经过一系列成熟过程，包括卵母细胞生长、颗粒细胞增生以及卵母细胞的最后成熟阶段，完全成熟的卵泡释放出卵母细胞，进入生殖管道受精、形成胚胎并进一步发育成胎儿。成年女性在生殖年龄持续存在这个过程，直到卵泡耗竭终止，这时卵巢发生衰老，在人类形成绝经。在女性一生中仅有很少的一部分卵母细胞生长、排卵、     

干细胞因子及其受体在卵泡早期发育中的作用

目前认为卵泡早期发育是非促性腺激素依赖性过程。此期干细胞因子是启动原始卵泡发育、过渡为初级卵泡的必需因子,与受体c-Kit结合后激活c-Kit下游3-磷酸肌醇激酶等信号通路,调控卵母细胞生长、颗粒细胞和卵泡膜细胞分化、增殖及激素合成。干细胞因子与骨形态发生蛋白15、生长分化因子9等细胞因子相互影响,受促性腺激素调控,共同参与卵母细胞-颗粒细胞对话。     

阿魏酸钠对多囊卵巢大鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的:研究阿魏酸钠(SF)对多囊卵巢大鼠体重、血清激素和卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法:20只SD雌性大鼠注射脱氢表雄酮(DHEA)建立多囊卵巢大鼠(PCO)模型,随机分为SF组和DHEA组,观察用药前后动物体重和血清激素水平变化情况;TUNEL法和免疫组化法检测卵巢颗粒细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平变化。结果:SF组血清T水平和E2浓度均较DHEA组降低(P<0.05),血清P浓度则明显增加(P<0.05);DHEA组镜下可见卵巢颗粒细胞层数明显增加至4-8层,细胞凋亡率显著低于SF组(P<0.001),其Bcl-2表达较空白组低(P<0.05),Bax表达则较高(P<0.001),Bcl-2/Bax的比值下降;SF组Bcl-2的表达较DHEA组高(P<0.001);Bax表达较低(P<0.001),Bcl-2/Bax的比值增加。结论:阿魏酸钠改善多囊卵巢大鼠内分泌状况可能与调节Bcl-2和Bax蛋白表达,发挥其抗细胞凋亡有关。     

LNG对双室培养的卵巢颗粒细胞和卵泡内膜细胞分泌功能的影响

本文采用羊膜双室培养系统,观察了18甲基炔诺酮(LNG)对猪卵巢颗粒细胞(G-C)和卵泡内膜细胞(T-C)在甾体激素生成过程中的影响。生长在羊膜两侧的G-C和T-C在加入或不加FSH、LH及各种不同浓度LNG的条件下孵育48小时,用RIA测定内、外室培养液中孕酮(P)和雌二醇(E_2)的含量,并与单独培养时的结果相比较。结果表明:①在FSH刺激时,LNG(30、3000nmol/L)明显抑制双室培养的G-C的P和E_2产量:P产量由55.1±3.4μmol/L降为25.8±1.8和20.3±3.8μmol/L;E_2产量由9.35±0.06nmol/L降至5.24±0.64和3.34±0.72nmol/L。但对P和E_2的基础水平无影响。②不论有或无LH刺激,LNG(30、3000nmoL/L)均明显抑制双室培养的T-C的P产量。有LH刺激时,P产量由70.9±6.5μmoL/L分别降为47.1±11.8和4.8±0.5μmol/L;在无LH刺激时,则由26.9±1.7μmol/L分别降至16.9±1.1和5.6±0.9μmol/L。结论:①LNG抑制双室培养中G-C的P和E_2产量,这种抑制作用是通过降低促性腺激素的刺激作用而产生的;②LNG不但抑制T-C的P基础分泌量,而且还表现为降低促性腺激素对P的刺激效应。③双室培养系统模拟了两种卵巢细胞在体时的旁分泌调节作用,与单独培养相比,是研究避孕药对卵巢功能影响的一种更为理想的模型。     

镉对大鼠卵巢颗粒细胞孕激素合成的影响研究

目的研究镉对大鼠卵巢颗粒细胞孕激素合成的影响,并探讨其机制。方法未成年Wistar大鼠皮下注射孕马血清促性腺激素(PMSG)100IU,48h后,取出卵巢颗粒细胞体外培养,备用。①取备用细胞随机分成4组,染镉剂量分别为0、10、20、40μmol/L,孵化30min,测孕酮、cAMP含量。②取备用细胞,随机分为3组,分别为空白对照组、40μmol/LCdCl2、1mmol/L8-Br-cAMP(cAMP类似物) 40μmol/LCdCl2,培养2h,测量孕酮含量。结果各剂量组与对照组比较孕酮含量差异有统计学意义(P<0.01),且随着染镉剂量的增加孕酮含量明显下降;8-Br-cAMP 40μmol/LCdCl2组与单纯40μmol/LCdCl2比较,孕酮含量明显升高(P<0.01);高剂量(40μmol/L)、中剂量(20μmol/L)组镉抑制细胞内cAMP的含量(P<0.01)。结论在本实验的条件下,镉可抑制大鼠颗粒细胞孕酮的合成;8-Br-cAMP可增加孕酮含量,且可逆转镉所导致的孕酮降低;镉对cAMP的抑制作用可能是其抑制孕酮合成的机制之一。     

促性腺激素释放激素激动剂对卵巢黄素化颗粒细胞甾体激素合成急性调节蛋白表达的影响

自上世纪90年代开始，促性腺激素释放激素激动剂（gonadotropin-releasinghormoneagonist，GnRH—a）被广泛用于辅助生育技术领域控制性超排卵治疗中。近年来，人们逐渐认识到GnRH-a在提高获卵数量和妊娠率的同时，存在着对垂体和卵巢黄体的过度抑制作用。前期研究显示，在不同剂量GnRH-a降调节方案中，启动日血清黄体生成素（LH）、雌二醇水平以及人绒毛膜促性腺激素（hCG）注射日的LH、雌二醇、孕酮水平存在差异。本研究针对这一现象，通过对GnRH-a降调节的体外受精-胚胎移植（invitrofertilizationandembryotransfer，IVF-ET）周期中卵巢黄素化颗粒细胞甾体激素合成的关键性调节蛋白——甾体激素合成急性调节蛋白（steroidogenicacuteregulatoryprotein，StAR）表达的实验研究，探讨GnRH-a剂量对黄体功能影响的程度和机制，为选择GnRH-a降调节方案和改善黄体支持方案提供实验依据。[第一段]     

大鼠卵巢颗粒细胞IGF—I,TGFβ,Fas—L表达与卵泡闭锁发生？…

为研究ＩＧＦ－Ｉ,ＴＧＦβ和Ｆａｓ－Ｌ在维持卵泡颗粒细胞存活和介导颗粒细胞凋亡中的作用。探讨卵泡闭锁的局部分子机理,将ＳＤ大鼠卵巢石蜡切片,用ＴＵＮＥＬ法和ＰＣＮ免疫组地区别闭锁和生长卵泡,用免疫组分法标记言之有理三种因子以及它们的膜受体在卵泡内的表达,结果显示,无腔和有腔生长卵泡内大多数颗国ＰＣＮＡ阳性,早期有腔闭锁卵泡有５个以上颗粒细胞被衍标记,部分颗粒细胞为ＰＣＮＡ阳性;晚期有腔闭锁卵泡剩余     

逍遥丸对人卵巢壁颗粒细胞ALK5/Smads通路的影响

目的 研究逍遥丸治疗不孕症的可能作用机制.方法 60例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕症患者中肝郁证者21例(治疗组),其余39例患者为对照组.对照组采用西医常规方案促排卵,治疗组在对照组的基础上口服逍遥丸,每次20丸,早晚分服.测定两组患者成熟卵泡壁颗粒细胞激活素受体激酶5(ALK5)、Smad2、Smad3和Smad4mRNA和蛋白的表达.结果 治疗组颗粒细胞ALK5和Smad2 mRNA及蛋白的表达显著高于对照组(P＜0.05)；Smad3、Smad4 mRNA和蛋白的表达两组比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 逍遥丸治疗不孕症的机制可能与上调壁颗粒细胞受体ALK5和Smad2 mRNA及蛋白,调节ALK5/Smads信号通路而达到促进卵泡发育目的,调节卵巢功能.     

一氧化氮——环鸟苷酸通路与鼠小脑颗粒细胞存活的关系

目的：研究一氧化氮－环鸟苷酸通路（NO-cGMP)通路与鼠小脑颗粒细胞（GGC）存活的相关性。方法：通过光学显微镜观察N－甲基－D－天门冬氨酸（NMDA），一氧化氮释放剂2‘，2‘－（hydroxy-nitrosohydrazono)bisethanamine(Deta-NONOate）和环鸟苷酸类物质8－溴鸟苷－3‘，5‘－环单磷（cGMP)通过NO-cGMP通路而对CGC存活所产生的影响。以及一氧化氮酶抑制剂N^G－硝基－L－精氨酸（NAME），可溶性鸟苷酰环化酶抑制剂6－Anilinoquinoline-5,8-quinolinedione(LY83583)，环鸟苷酸蛋白激酶G抑制剂Guanosine3‘,5‘-cyclic monoplosphorothioate,8-(4-Cholrophenylthio)-,mRp-Isomer,Trithylammonium salt(Rp-8-8pCPT-cGMPS)对通路的阻断作用，结果：NMD，Deta-NONOate和cGMP均能在无酒精的环境下，促进细胞的生存。并能不同程度地对CGC产生保护作用，减轻酒精对细胞的毒性作用。但NAME和LY83583却分别能抑制NMDA和Deta-NONOate的作用,而Rp-8-pCTP-cGMPS则能消除cGMP对细胞的影响。结论：NO-cGMP通路在促进鼠小脑颗粒细胞的存活和抵抗酒精的神经毒性过程中起到关键的作用。     

大鼠窦状卵泡颗粒细胞中磷酸化蛋白激酶B表达与凋亡的关系

目的探讨大鼠窦状卵泡中磷酸化蛋白激酶B(PKB,又称Akt)的表达与卵泡颗粒细胞凋亡之间的关系。方法应用免疫组织化学法和Western blot法检测磷酸化Akt(phosphorylation-Akt,p-Akt)在大鼠不同发育阶段卵泡颗粒细胞中的表达,应用TUNEL法检测成年大鼠卵泡颗粒细胞的凋亡情况。结果在大鼠窦前及窦状卵泡的颗粒细胞中,p-Akt表达高的颗粒细胞凋亡程度较轻,而p-Akt低表达的颗粒细胞凋亡现象较明显。结论 p-Akt的高表达在一定程度上与颗粒细胞凋亡受抑制有关,并有可能参与了窦状卵泡阶段卵泡的闭锁的选择。