靶细胞萃取联用UPLC/Q-TOF-MS方法分析川芎中的药效成分

目的:建立靶细胞萃取联用UPLC/Q-TOF-MS技术分析川芎中药效成分的方法。方法:选用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为靶细胞,萃取川芎中的药效成分。在细胞对数生长期加入川芎供试品溶液,孵育2 h收集细胞并用液氮迅速冷冻,反复冻融使细胞破碎,离心得到萃取药物后的细胞样品。采用UPLC/Q-TOF-MS对其进行检测,分析川芎化学成分中与细胞结合的物质,即川芎中与细胞结合进一步发挥药效的可能有效成分。结果:从川芎中筛选到2个可能的药效成分,分别为阿魏酸和藁本内酯。结论:本研究建立的方法可以通过化合物与细胞中靶点(受体、通道、酶等)之间的特异性结合作用,筛选出川芎中药效活性成分,从而为药物活性成分的筛选以及药物机制的研究提供思路,同时推动了中药安全性的快速发展。     

HBs／CD3双特异性抗体介导LAK对HBVDNA转染细胞的细胞毒作用

双持异性抗体已应用于导向LAK细胞杀伤胃癌细胞、肝癌细胞、人免疫缺陷病毒(HIV)感染细胞，是继单克隆抗体之后又一重大进展。本研究应用化学偶联方法合成HBs/CD3双特异性抗体，并观察其对LAK细胞的细胞毒性怍用影响。用化学偶联剂SPDP将鼠源的CD3与HBs单克隆抗体连接得到HBs／CD3双特异性抗体。以LAK细胞为效应细胞，HBV DNA转染的2.2.15细胞为靶细胞。设HepG-2和K562细胞为对照组。实验显示，HBs／CD3双特异性单克窿抗体能显著提高LAK细胞与2．2．15细胞结合率；应用^125I-UdR释放试验检铡细胞毒性发现双特异性抗体能增强LAK细胞对2.2.15细胞的细胞毒性并且与抗体浓度相关，BsAb浓度递增．细胞毒性作用随之增加．对细胞毒性作用的特异性研究表明．加入HBs／CD3BsAb后。LAK细胞对2.2.15细胞毒性显著高于HepG-2和K562细胞组。上述结果表明。HBs／CD3双特异性抗体具有双向识别LAK细胞和2．2．15细胞特性。特异地促进LAK细胞与靶细胞结合，发挥选择性细胞毒性作用．     

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基因治疗是利用基因工程和细胞生物学技术 ,将外源性遗传物质转移到人体内 ,从而获得治疗效果的方法。近年来 ,随着基础理论与技术的逐步突破 ,基因治疗的研究已取得重大进展。目前 ,已有 2 0 0多项基因治疗项目正在临床试验中 ,以Ｉｓｎｅｒ为首的美国Ｂｏｓｔｏｎ小组 ,针对外周和冠状动脉缺血性疾病的基因治疗项目就是其中之一。血管是治疗基因容易导入的靶组织 ,在多数情况下 ,只需要外源基因短期表达就有可能达到治疗效果。但血管系统疾病大多是多基因病变 ,目的基因的选择较困难。尽管如此 ,在晚近的 10年里 ,血管疾病基因治疗发展迅…     

自然杀伤细胞表面受体NKp46的研究进展

一、自然杀伤细胞(natural killer cells,NK细胞)简介NK细胞来源于骨髓的淋巴细胞,是机体抵抗病毒感染和防止肿瘤发生的第一道防线,与T细胞不同,NK细胞无需抗原的刺激即可杀伤靶细胞。NK细胞表面活化性受体和抑制性受体的平衡调控NK细胞的活性[1]。NK细胞表面受体包含在免疫球蛋白超家族(immunogloblin gene superfamily,IgSF)或细胞毒性T淋巴细胞受体(cytotoxic T lymphocytes receptor,CTLR)     

正常人外周血NK细胞形态学观察

NK细胞是淋巴细胞中的一类杀伤细胞,它既不需抗原刺激,亦不需抗体参与,即能杀伤靶细胞,因而称为自然杀伤细胞(natural iller ell,NK细胞)。NK细胞是机体发挥免疫监视功能的重要组成部分,可通过其受体识别“自己”靶细胞MHCI类分子的抗原决定簇,从而对NK细胞活性产生抑制信号,避免对“自己”靶细胞的攻击,而对“非己”靶细胞,如肿瘤细胞、病毒感染细胞则产生非特异性杀伤作用。     

可溶性CD4受体阻断HIV的感染性

寻求阻止人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-Ⅰ)感染的途径正从三方面着手：①疫苗和免疫支持药引出抗HIV免疫反应；②抗病毒药和阻止病毒感染靶细胞的方法；③病毒包膜糖蛋白(gpl20)附着于靶细胞的CD4受体蛋白。     

抗CD4抗体可增强恩夫韦地抗HIV-1的效果

据Medscape．com7月7日报道（原载Antimicrob Agent Chemother2006：50：2231—2233），体外实验发现人源化抗CD4单克隆抗体TNX-355可增强融合抑制剂恩夫韦地（T-20）阻断HIV-1病毒进入靶细胞的作用。     

关节疾病的基因治疗

随着人类基因组计划的开展和对于疾病发生的分子机理认识的深入，基因治疗作为一种革命性的治疗方式已经渗透到了医学的各个领域，骨科领域更是如此。基因治疗是指在特定的靶细胞、靶组织、靶器官中表达原本不表达的基因，或者导人新基因，使某基因过表达或限制、关闭异常表达的基因从而治疗疾病的方法。关节疾病是发病率高，后果严重的一类疾病，近年来基因治疗关节疾病更成为研究的热点，     

LAK及TIL对靶细胞杀伤活性中效靶作用的细胞表面物质基础

在ＬＡＫ及ＴＩＬ杀伤靶细胞过程中介导效靶作用的细胞表面分子主要包括细胞粘附分子（ＣＡＭ）群类中的各种分子，其它一些尚未鉴定分属ＣＡＭ大类的糖蛋白，糖脂，层粘连层白（ｌａｍｉｎｉｎ）类似物和波形纤维蛋白（ｖｉｍｅｎｔｉｎ）类似物等。这些分子是效靶特异识别，结合的物质基础。虽然ＴＩＬ较ＬＡＫ杀伤活性呈现对靶细胞的特异性，但两者均存在不同程度的非特异性。本文以介绍ＬＡＫ及ＴＩＬ杀伤活性中效靶作用的细胞…     

基因打靶技术及其发展和应用

通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定位点的基因打靶技术，已经成为哺乳动物遗传学领域的重要工具。本文拟针对胚胎干细胞和体细胞的基因打靶的原理、技术路线及基因打靶技术的发展和应用作一综述。