共刺激阻断剂CTLA-4Ig在体外培养细胞中的表达

目的 鉴定腺病毒介导免疫调节基因CTLA-4lg在体外培养细胞中的表达能力和细胞毒性。方法以小鼠成纤维细胞(NH3T3)、中国仓鼠卵巢细胞(CHO)为靶细胞，观察感染强度为100、200、400时CTLA-4lg重组腺病毒转染靶细胞后不同时相细胞存活百分率；以免疫组化检测CTLA-4lg在细胞中的表达。结果转染后2d、4d，转染组两种细胞存活百分率与对照组相比无显著差异；转染后24 CTLA-4kg在NIH3T3和CHO中的阳性表达率分别为96．1％,94．6％结论重组腺病毒对非包装耙细胞毒性很小，能够介导CTLA-4kg基因时耙细胞的高效转染，并使靶细胞高效表达CTLA-4kg，为介导CTLA-4kg基因转染移植物和抗原提呈细胞提供了一种安全有效的载体。     

肺癌抑制免疫功能的靶细胞：树突状细胞

目的：了解肿瘤微环境下肺癌细胞对DC前体细胞产生DC、功能的影响。方法：DC前体细胞为健康人外周血CD14细胞，加入GM－CSF和IL－4，37℃，5％CO2培养7－10天收获，肿瘤细胞株CRL－5815，CRL－5826加入DC前体细胞共培养，健康入外周血为正常对照，FITC或PE交链的单克隆抗体标记DC细胞，流式细胞仪分析检测CD14，CD86，CD80，CD1a阳性表达。Annexin V方法，流式细胞仪分析细胞凋亡，混合淋巴细胞反应（MLR）检测DC检测T细胞反应的能力。结果：肺癌细胞株可诱导DC形成的不同时期产生凋亡，对DC产生的早期（第1、2天）影响较晚期（第6，7天）更明显，肺癌细胞株CRL－5815和CRL－5826与DC共培养时明显抑制DC细胞表型CD80，CD86，CD40的表达，与肺癌细胞株共培养DC其刺激T细胞扩增的能力（MLR）显下降，结论：肺癌细胞株CRL－5815和CRL－5826与DC前体细胞共培养时可导致DC的凋亡显增加，同时DC细胞表面表型表达下降，刺激T细胞扩增的功能减低，提示肿瘤（肺癌细胞）可通过DC细胞数量减少和功能下降影响机体免疫功能。     

肿瘤免疫逃逸分子机制与中药多靶点

HL A表达低下或缺陷、免疫细胞活化信号转导受阻、肿瘤细胞分泌免疫抑制因子、Fas-Fas L系统异常、可溶性细胞因子受体水平升高等多环节、多水平异常导致肿瘤免疫逃逸 .多靶点效应是中药的固有特点。采用分析 -综合的方法 ,针对性多靶点调节肿瘤机体的免疫系统 ,实现肿瘤预防和治疗的突破     

枸杞糖缀合物和糖链对小鼠巨噬细胞功能的影响

目的确定巨噬细胞是枸杞糖缀合物和糖链免疫作用的靶细胞之一。方法应用中性红吞噬实验和鸡红细胞吞噬实验测定了枸杞糖缀合物LbGp4和糖链LbGp4-OL对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;用硝酸根还原法、酶联免疫吸附实验(ELISA)和生物活性测定法测定了巨噬细胞产生一氧化氮(NO)、IL-1β和TNF-α含量和生物活性的变化。结果LbGp4和LbGp4-OL在(10~100)mg.L-1剂量范围内均可剂量依赖性地促进静息巨噬细胞吞噬中性红的能力,增加活化的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数;增加巨噬细胞培养上清NO、IL-1β和TNF-α的浓度,并增强对L929细胞的杀伤活性,促进胸腺细胞的增殖反应。结论LbGp4和LbGp4-OL对静息和活化的腹腔巨噬细胞的吞噬功能具有明显的促进作用,对巨噬细胞产生NO、分泌IL-1β和TNF-α的含量和生物活性亦具有明显的促进作用,表明巨噬细胞是LbGp4和LbGp4-OL免疫作用的靶细胞之一。     

4-1BBL胞膜外区蛋白对人外周血淋巴细胞体外活性的调节作用

目的:研究4-1BBL胞膜外区融合蛋白(ex4-1BBL)对人外周血淋巴细胞(PBL)体外活性的调节作用.方法:表达纯化人4.1BBL胞膜外区融合蛋白,台盼蓝计数观察其对淋巴细胞增殖的作用;CytoTox 96非放射性细胞毒试剂盒检测培养液的乳酸脱氢酶(LDH)水平,ELISA检测白介素-2(IL-2)水平.CytoTox 96检测其联合应用anti-CD3/anti-PgP微型双功能抗体及PBL对靶细胞K562/A02细胞的杀伤作用.结果:4-1BBL胞膜外区融合蛋白能够促进淋巴细胞增殖,减少细胞死亡,促进IL-2分泌;联合应用ex4-1BBL的淋巴细胞组的杀伤效率优于对照组.结论:ex4-1BBL可能成为增强淋巴细胞活性的重要免疫佐剂.     

神经干细胞在神经科临床的运用前景

干细胞是指具有自我更新和分化能力的细胞群。大量的研究已证实，在发育期及成年哺乳动物的各种组织和器官贮藏有干细胞。这些组织包括上皮、血液、脑、脂肪和胰腺等。在成年动物，干细胞的主要作用是参与补充因正常衰老或损伤而丧失的细胞。相对之，胚胎干细胞较成年动物干细胞贮备量大。哺乳动物的胚胎干细胞源于囊胚，之后，内细胞群的干细胞迅速分化产生原始外胚层，并最终分化为三胚层，以后再发生为各种组织、器官。     

两种抗T细胞免疫毒素对靶细胞杀伤效应的比较

免疫毒素杀伤靶细胞的关键取决于抗体对靶细胞的特异性识别和毒素对靶细胞的杀伤效率。本研究比较了我们所研制的两种抗Ｔ细胞免疫毒素（ＣＤ５：ｒＲＡ和ＣＤ５：Ｒｉｃｉｎ）对靶细胞的特异性杀伤效应。实验结果证实：①两种免疫毒素在１０＾－９－１０％－１１ｍｏｌ／Ｌ浓度范围内均可有效地清除ＣＤ５＾＋Ｔ细胞群,并对ＣＤ２５＾＋ＣＤ３＾＋激人有剂量依赖性抑制作用;②两种免疫毒素均对混合淋巴细胞增殖反应有明显抑制作用     

人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白的构建和表达

目的:构建和表达人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并测定该融合蛋白的生物学活性.方法:采用PCR和ovelap PCR方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用150 g/L SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化产物;采用FACS法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性.结果:DNA序列测定结果表明:人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白已构建成功,表达可溶性产物的产量达4 mg/L以上,具有与Raji细胞(CD20 )和A549(4-1BB )细胞结合的活性.结论:利用融合蛋白形式,首次成功地构建了人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白,并获得较高表达.表达产物具有与相应2个靶抗原结合的活性.     

单克隆抗体、人血清白蛋白、氨甲喋呤偶合物的制备及细胞毒作用

<正> 本研究成功地制备了单克隆抗体、人血清白蛋白、氨甲喋呤(McAb79-HSA-MTX)偶合物。实验证实,每克分子McAb最多可接117g分子的MTX。该偶合物中McAb79的抗体活性保存良好,对靶细胞的杀伤力明显强于对照的抗尿激酶McAb13-HSA-MTX偶合物。而单纯     

细胞毒性T淋巴细胞抗病毒感染作用机制的研究进展

人类及其他动物细胞经常受到病毒感染的威胁,故能够有效的发现并清除受感染的细胞对维持器官及组织的正常功能非常重要。虽然自然杀伤细胞和活化的巨噬细胞有杀伤靶细胞的作用,但破坏病毒感染的靶细胞主要靠细胞毒性T淋巴细胞（CTL）,CTL是执行细胞免疫、排斥同种异体移植物、杀伤病毒感染细胞和肿瘤细胞的效应细胞。CTL是一类具有CD^8＋表面标志、受主要组织相容性抗原I（MHCI）类分子限制的具有杀伤功能的T细胞。CTL介导的靶细胞杀伤的特点是：杀伤受T细胞受体（TCR）以及MHCI类分子的严格限制,且对靶细胞的杀伤具有特异性、程序性和快速性。本文对CTL抗病毒感染作用机制方面的研究作一综述。