肠神经系统运动神经元的靶细胞及神经传递连接后电机理的研究进展

肠神经系统(enteric nerVous system,ENs)是胃肠道神经元在胃肠道内聚集在一起形成相对独立的神经网络。     

基于靶细胞萃取的延胡索药效成分的筛选和含量测定

目的 建立靶细胞萃取延胡索Corydalis Rhizoma中的药效成分并采用HPLC法进行定量分析的方法。方法 选用人脐静脉内皮细胞（HUVEC）作为靶细胞,萃取延胡索中的药效成分。在细胞对数生长期加入延胡索冻干粉,孵育2 h收集细胞并用液氮裂解,得到萃取药物后的细胞样品。采用UPLC/Q-TOF-MS对其进行检测,分析萃取进入细胞内的物质,即延胡索中进入细胞进一步发挥药效的有效成分。最后,用HPLC法对进入细胞中的有效成分进行定量分析。结果 HUVEC萃取到5个药效成分,分别为延胡索乙素、四氢小檗碱、延胡索甲素、盐酸小檗碱、去氢延胡索甲素。同时建立5个成分的含量测定方法。结论 靶细胞萃取的分析方法可以通过化合物与细胞之间的相互作用,反映出药物中发挥药效的活性物质,在中药复杂体系的研究中起到重要的作用。     

RNA干扰在猪内皮细胞抵御补体介导的细胞毒中的作用

目的　评价RNA干扰(RNAi)是否能有效抵御补体介导的对猪内皮细胞的细胞毒作用。方法　将小分子干扰RNA(SiRNA)转染猪内皮细胞系PED,检测PED转染前后α1,3 半乳糖转移酶(α1,3 GT)mRNA及α- 半乳糖糖链(αGal)抗原表位的表达,并评价RNAi对补体介导的细胞毒的影响。结果　SiRNA 1/PED的α1,3 GT基因异构体(isoform)表达量与空转组(Mock)相比减少了70%(isoform1,69%;isoform2,72%)(P<0 05),但SiRNA 2/PED的α1,3 GT表达量与错配组及空转组相比差异无统计学意义(P>0. 05),流式细胞学检查显示,SiRNA 1/PED的αGal平均荧光强度(52 9)明显小于错配组(493 9,P<0 01)及空转组(505 7,P<0. 01)。标准4h51Cr释放实验中SiRNA 1/PED的细胞溶解率较空转组分别减少了70%(20%正常人血清组)和60%(40%正常人血清组)(P<0. 05)。结论　PED在转染SiRNA- 1后发生了基因沉默,猪内皮细胞可以成为RNAi作用的靶细胞。本研究为更深层次探讨RNAi在异种移植中的作用奠定了基础。     

NGF、BDNF在脊髓可塑性中的研究进展

在损伤的中枢神经系统(Center Nerve System，CNS)不能再生的情况下，机体能通过一定的代偿方式修复部分功能的这种变化成为可塑性。脊髓神经纤维损伤后形态的可塑性主要是通过相邻完好的轴突侧枝出芽与失去神经终末的靶细胞建立代偿性联系和未损伤突触的代偿性变化而实现的。直到1958年，Liu和chambers第一次证实成年哺乳动物CNS损伤后仍具有可塑性后，才使人们对CNS损伤有了重新认识。     

HIV-1包膜V3区在病毒侵入靶细胞中的增强作用

目的　明确Ⅰ型人免疫缺陷病毒 (humanimmunodeficiencyvirustype 1,HIV 1)包膜糖蛋白gp12 0第三可变区 (variableregion ,V3)在病毒进入靶细胞的早期阶段中的作用。方法　合成了 3个环状V3多肽 ,包括V3 BH10、V3 ADA和V3 89.6以及直链和短链多肽V3 BH10 /CA、V3 NNT2 4和V3 IRI12。构建了 3株分别带HIVHXB2株、ADA株和 89.6株包膜的伪病毒并观察了多肽对不同嗜性HIV侵入靶细胞能力的影响。结果　 (1)HIV 1V3区多肽以毒株特异性模式增强HXB2、ADA和 89.6进入靶细胞 ;(2 )直链V3多肽与其环状多肽具有相似作用 ;带有C末端的短肽V3 NNT2 4也有与长链V3 BH10 /CA相近的作用 ,只有中央保守区的短链V3 IRI12没有类似功能。结论　本研究首次发现HIV 1V3区在病毒进入靶细胞早期阶段中具有毒株特异性增强病毒侵入的作用。该发现有助于进一步明确HIV 1进入靶细胞的机制     

两种靶细胞在ADCC检测中的比较

选用绵羊红细胞 (SRBC)和鸡红细胞 (CRBC)作为靶细胞 ,用微量比色法检测人外周血单个核细胞 (PBMC)的抗体依赖细胞介导的细胞毒 (ADCC)活性。结果测得靶细胞对绵羊红细胞细胞毒指数为 9 0 3± 6 74 % ,对鸡红细胞的指数为 31 77± 16 2 7%。经t检验 ,有显著性差异 (t =4 75,P <0 0 1)。在 10例配对比较中 ,经相关性检验 ,对两靶细胞的指数具有显著相关性 (r =0 7152 ,P <0 0 5) ;经t检验 ,对两靶细胞的指数具有极显著差异 (t=4 33,P <0 0 1)。相同条件下 ,对CRBC的指数比SRBC的指数高。故认为 ,用CRBC作为靶细胞检测人PBMC的ADCC活性较好。     

瘤体内直接注射mIL-21基因抑制小鼠实验性淋巴瘤生长及其机制的初步研究

IL 2 1的生物学功能比较广泛 ,能促进骨髓中的NK细胞增殖与分化并表达CD16分子 ,与抗CD4 0单克隆抗体(McAb)协同可刺激B细胞增殖 ,与抗CD3McAb协同可刺激T细胞增殖。我们利用先前构建的含小鼠IL 2 1基因重组质粒pcDNA3.1 mIL 2 1,直接在小鼠皮下Sp2 0肿瘤模型的瘤体局部注射治疗 ,探讨IL 2 1能否在肿瘤的基因治疗中发挥一定的作用 ,从而寻找新的用于肿瘤治疗的生物应答调节剂。取 6～ 8周龄BALB c雌鼠 ,以对数生长期Sp2 0细胞 5× 10 5背部皮下注射形成肿瘤模型。挑选肿块直径 0 .5cm左右小鼠 ,随机分pcDNA3.1 mIL 2 1质粒…     

关节软骨损伤基因治疗研究进展

关节软骨损伤是一种在临床上较为常见的疾病,近年来,发病率逐年增高。随着生物技术和基因工程的不断发展,基因治疗成为研究关节软骨损伤的新思路,可能成为关节软骨损伤修复的有效方法。基因治疗关节软骨损伤是一项新兴技术,主要包含以下几个关键:合适的目的基因、靶细胞、载体及基因导入方式等,本文将对关节软骨损伤基因治疗的以上几个内容研究进展作一综述。     

Wee1-GFP在CTL介导的细胞毒效应中的作用研究

目的: 研究Wee1-GFP融合蛋白对胞毒T细胞介导的胞毒效应的影响.方法: 采用脂质体将融合基因Wee1-GFP导入鼠胰岛瘤细胞(NIT-1)并检测其表达.以转染pWee1-GFP和空载体的NIT-1为靶细胞, 采用ELISA凋亡试剂盒和乳酸脱氢酶法检测胞毒T细胞介导的细胞毒效应.结果: Western blot检出Wee1-GFP融合蛋白的表达.转染Wee1-GFP的靶细胞发生凋亡及损伤的细胞数比转染空载体的靶细胞少.结论: Wee1-GFP基因转染靶细胞具有一定的抵抗CTL介导的胞毒效应的能力.