一种人神经母细胞瘤辅酶II-依赖性视黄醇脱氢酶cDNA的克隆及特征分析

背景与目的:检测神经母细胞瘤中新的辅酶II_依赖性视黄醇脱氢/还原酶[NADP(H)_dependen tretinold ehydrogenase/reductase,NRDR]选择性剪接亚型。材料与方法:我们用NRDR特异引物,从人神经母细胞瘤细胞系SK_N_SH和SK_SY_5YcDNA中分别经PCR扩增出635bp和429bpDNA片段,测序证实635bp片段是NRDR,而429bp片段是选择性剪接新亚型。再用快速cDNA末端扩增(Rapidamplification of cDN Aends,RACE)方法得到429bp片段cDNA全长序列。用绿色荧光蛋白与新亚型的融合蛋白做亚细胞定位。结果:得到新亚型全长并命名为humanNRDRA2(hum NRDRA2)(AY616182)。已知NRDR有8个外显子,而新亚型hum NRDRA2由选择性剪接造成了第4和第6外显子丢失,从第5外显子开始读码框架前移1bp,导致随后的编码区框码漂移(frameshift),同时蛋白翻译终止信号提前出现,产生仅有188个氨基酸的蛋白,其中第137氨基酸以后的序列相对于NRDR完全发生改变,同时C_末端的过氧化物酶体定位信号_SRL丢失,却在160～176氨基酸处出现了一个细胞核定位信号。我们在ESTs库中未找到与其相同的剪接形式,提示它可能是神经母细胞瘤特有的一种NRDR剪接亚型。用GFP_NRDRA2融合蛋白做该蛋白的亚细胞定位,发现发绿色荧光的细胞均已悬浮,但悬浮状态不佳,而作为对照的NRDR另一亚型则能定位成功,提示NRDRA2蛋白可能具有一定的细胞毒性。结论:人神经母细胞瘤NRDRA2选择性剪接亚型羧基端框移突变并有核定位序列;该蛋白可能是一种细胞毒性蛋白。     

维生素A的生物学作用及临床应用

维生素A(vitaminA)，视黄醇存在于动物肝脏，蛋黄和脂质微滴中(属脂溶性维生素)。植物中含有胡萝卜素(维生素A原)可转化为维生素A。维生素可分为活性较高的A1和A2二种，高热及紫外线照射可使之破坏。     

血清胱抑素C、视黄醇结合蛋白与尿微量白蛋白联合检测对糖尿病肾病的诊断价值

目的:观察血清胱抑素C(CysC)、视黄醇结合蛋白(RBP)及尿微量白蛋白(U-mAlb)联合检测对糖尿病肾病(DN诊断的应用价值。方法:选取60例DN患者为观察组,选择同期60例单纯糖尿病患者为对照组。比较两组CysC、RBP、U-mAlb含量,及单项检测和联合检测的阳性率、准确率、漏诊率、特异度及敏感度。结果:观察组CysC、RBP和U-mAlb检测结果均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组CysC、RBP和U-mAlb联合检测的阳性率、准确率、特异度和敏感度均高于对照组,且漏诊率低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:CysC、RBP和U-mAlb联合检测对DN诊断价值更大,可为临床诊断提供有效方案。     

新诊断2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化与视黄醇结合蛋白4水平的相关性分析

目的探讨新诊断2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者颈动脉粥样硬化与视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4,RBP4)水平的相关性。方法选取2012年10月至2017年4月于本院内分泌科住院的新诊断T2DM患者44例为研究对象,根据颈动脉内膜中层厚度(intima-media thickness,IMT)将入选患者分为A组(合并颈动脉粥样硬化)和B组(未合并颈动脉粥样硬化),测定两组患者血清RBP4、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,Hb A1c)水平及血压等指标,并计算体质指数(body mass index,BMI),分析新诊断T2DM患者颈动脉粥样硬化与RBP4水平的相关性。结果 A组患者血清RBP4、FPG、Hb Ac1、TG水平均显著高于B组(P<0.05),劲动脉IMT显著大于B组(P<0.05)。Pearson相关分析显示:血清RBP4水平与年龄、FPG、Hb A1c、TG、TC、LDL-C、IMT均呈正相关(r分别为0.408,0.426,0.455,0.533,0.492,0.346,0.870)(P<0.05),与BMI、HDL-C、收缩压、舒张压无明显相关性(P>0.05)。颈动脉IMT与年龄、FPG、Hb A1c、TG、TC、RBP4水平均呈正相关(r分别为0.456,0.344,0.449,0.382,0.397、0.870)(P<0.05),与HDL-C、LDL-C、收缩压、舒张压无明显相关性(P>0.05)。结论新诊断T2DM合并颈动脉粥样硬化患者血清RBP4水平明显高于未合并颈动脉粥样硬化者,且血清RBP4水平与颈动脉IMT呈正相关,提示RBP4可能是T2DM患者发生颈动脉粥样硬化的危险因素。     

2010—2012年中国农村6～17岁儿童青少年维生素A营养状况

目的分析2010—2012年中国农村地区6~17岁儿童青少年维生素A营养状况。方法基于2010—2012年中国居民营养与健康监测项目,采用多阶段分层与人口成比例的随机抽样方法,以一般农村和贫困农村地区调查点送检的儿童青少年血清样本为研究对象,采用单纯随机抽样法共抽取样品5888份,高效液相色谱法(HPLC法)测定血清视黄醇浓度,评价农村儿童青少年的维生素A营养状况。结果中国农村儿童青少年血清视黄醇浓度为(1.44±0.58)μmol/L,其中一般农村和贫困农村分别为(1.40±0.56)μmol/L和(1.46±0.60)μmol/L(t=1.88,P<0.05)。6~11岁组一般农村和贫困农村血清视黄醇浓度分别为(1.31±0.53)μmol/L和(1.37±0.60)μmol/L,均显著低于12~17岁组的(1.52±0.57)μmol/L和(1.52±0.60)μmol/L(t=11.90和t=5.54,P<0.05)。农村儿童青少年维生素A总缺乏率为5.53%,其中一般农村和贫困农村分别为6.14%和4.55%;边缘缺乏率为18.75%,其中一般农村和贫困农村分别为19.17%和18.07%,差异均无统计学意义。结论中国农村地区儿童青少年的维生素A缺乏仍普遍存在,其中边缘缺乏情况较为突出。     

RBP4、α2-MG、SAA在2型糖尿病及其微血管病变中的表达意义

目的 探讨血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)、α2巨球蛋白(α2-MG)、淀粉样蛋白A(SAA)和脂代谢指标等在2型糖尿病(T2DM)及其微血管病变发病中的作用与意义.方法 选择2018年3-9月该院内分泌科收治的T2DM住院患者197例,分为单纯糖尿病无微血管并发症组(NMCD组,n=132)、糖尿病合并微血管病变组(MCD组,n=65),另选取同期在该院体检中心健康体检者80例作为健康对照组(NGT组),检测各组α2-MG、SAA、RBP4水平并进行比较,选择多个可能对微血管病变产生影响的因素,通过二分类logistic进行多因素分析.结果 NMCD组较NGT组RBP4、SAA、α2-MG升高(P<0.05),较MCD组RBP4、SAA升高(P<0.05);MCD组较NMCD组LDL-C、TC、非HDL-C、载脂蛋白B100(ApoB100)显著升高(P<0.05).logistic回归分析显示,RBP4升高(OR=1.128,95％CI:1.004～1.267,P<0.05)、空腹C肽降低(OR=0.139,95％CI:0.029～0.652,P<0.05)、SAA升高(OR=1.219,95％CI:1.075～1.382,P<0.01)、脂蛋白a[LP(a)]升高(OR=1.073,95％CI:1.017～1.132,P<0.05)是发生T2DM微血管病变的危险因素.结论 RBP4、SAA升高与胰岛素抵抗及T2DM的发生相关;高RBP4、SAA、LP(a)及胰岛功能减退可能是发生T2DM微血管病变的危险因素;脂代谢紊乱在T2DM微血管病变的发生、发展中起着一定推动作用.     

A study on the role of serum Retinoi Binding Protein 4 in nonalcoholic fatty liver disease

目的 探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)的临床意义.方法 选择NAFLD肝患者62例,正常对照60例,采用ELISA方法测定空腹血清RBP4,同时检测其血糖、血脂、肝功能及胰岛素水平,并计算胰岛素抵抗指数( HOMA - IR).结果 与正常对照组比较,NAFLD患者的空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度酯蛋白(LDL-C)、血清胰岛素(FINS)、HOMA - IR、ALT、AST和RBP4显著增高(P＜0.01),而且NAFLD患者治疗后血清RBP4水平显著降低.相关分析显示,血清RBP4与FBG、TC、TG、FINS、HOMA - IR呈正相关.结论 在NAFLD的发病过程中,RBP4可能参与其发病,在其早期诊断和评判肝脏损害程度中有一定的临床意义.     

姜黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注载脂蛋白E及类视黄醇X受体、肝X受体表达的影响

目的:探讨姜黄素(curcumin)对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型载脂蛋白E(Apo lipoprotein E,Apo E)及类视黄醇X受体(Retinoic X receptor,RXR)、肝X受体(Liver X receptor,LXR)表达的影响。方法:采用插线法制作大鼠大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血再灌注(MCAO)模型。将48只SD大鼠随机分为四组:假手术组(SH);模型组(IR);姜黄素剂量组(100mg/kg、300mg/kg)。再灌注24h,采用盲评法进行神经功能缺损评分估计;测定脑含水量;Western印迹法检测Apo E及LXR、RXR的表达;观察脑组织形态学改变及运用原位细胞凋亡检测(TUNEL法)法检测大鼠海马CA1区神经元凋亡情况。结果:姜黄素在100mg/kg、300mg/kg剂量范围内,可显著改善MCAO大鼠的行为学体征;降低脑含水量;减轻脑组织形态学改变和神经元凋亡;上调APOE及LXR、RXR的表达,姜黄素300mg/kg组治疗效果最为显著。结论:姜黄素具有脑缺血再灌注保护作用,此作用可能与上调APOE及LXR、RXR的表达有关。     

视黄醇结合蛋白4与心血管疾病的研究进展

视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein4,RBP4)属于视黄醇结合蛋白(RBP)家族中的分泌型RBP,主要由肝细胞和脂肪细胞分泌,在协助视黄醇发挥生理功能中起着不可替代的作用。同时RBP4作为一种循环性脂肪细胞因子,在许多研究中均发现其于肥胖、胰岛素抵抗、代谢综合